1、毕业论文开题报告生物技术三种贝类养殖中的有害性纤毛虫研究一、选题的背景与意义1、背景纤毛虫（CILIATE）具纤毛的单细胞生物，纤毛为用以行动和摄取食物的短小毛发状小器官。通常指纤毛亚门CILIOPHORA的原生动物，约有8000个现存种，纤毛通常呈行列状，可汇合成波动膜、小膜或棘毛。绝大多数纤毛虫具有一层柔软的表膜和近体表的伸缩泡。有些有丝泡、毒囊或菌囊等小器官，其功能尚不甚了解。虽然大部分纤毛虫营自由生活和水生生活，但有些种类如致痢疾的肠袋虫属BALANTIDIUM则是寄生的。还有许多种类是在无脊椎动物的鳃或外皮上营外共栖生活。有性现象包括接合个体之间核的交换和自体受精在一个体内核的重建，
2、无性生殖通常是出芽或横向的二分裂。纤毛虫具有大核和小核。大核一至几十个，控制代谢和发育功能；小核一至几百个，为接合所必需，但对於生存并不是必需的。这种遗传物质的分离与复杂的细胞质分化有密切关系。纤毛亚门可能是一个高度特化的类群，仅有一纲纤毛纲CILIATEA，并以纤毛为依据分成四个亚纲全毛亚纲HOLOTRICHIA、缘毛亚纲、吸管亚纲和旋毛亚纲。养殖业中的病害原生动物包括了种类繁多的几个大类（孢子虫类、鞭毛虫类、纤毛虫类以及簇虫类等），其中许多类群均可专性或兼性寄生/栖生于海水养殖动物的体内外，从而构成对宿主的危害。迄今的记录表明，血淋巴内寄生的纤毛虫已成为越冬对虾的重要致死病原；扇贝鳃表的车
3、轮虫可导致贝类滞育直至死亡；肠膜袋虫是多种鱼类消化道疾病的病原；因盾纤类纤毛虫寄生所引发的牙鲆、牙鲆溃疡病可直接构成幼鱼的死因；而孢子虫以及各类缘毛目纤毛虫对养殖动物所造成的危害则早已为人们所熟知。2、意义国内目前围绕该类病害，仍处于零星的病例报道和对个别种类防治措施的探寻阶段，由于观察者经验和资料的限制（该类工作者通常为从事水产养殖研究或非原生动物学领域的病害学研究者），许多病原报道均不同程度地存在着错误，混乱或不实之处。国外目前有关的研究主要限于淡水寄生原虫。海洋种类尤其是鱼类、贝类和虾类之寄生虫报道极少，系统工作基本缺失。基础研究的空白进而导致了我国该领域目前的状况参考资料严重缺乏，养殖
4、生产中对这类病原生物的调查鉴定，病害预报以至防治工作实际上处于一种无据可依，无章可循的状态。因此从病原构成和基本资料着手全面摸清该类病害原的基本现状并进而为下一步防治工作创造条件已成为我国目前原生动物病害学研究首当其冲的任务。所以说对养殖水体中纤毛虫的形态分类学研究是各类相关研究开展的基础（如病害学、毒理学等），鉴于此，对贝类养殖中的若干种纤毛虫的形态学做相关研究。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题基本内容本实验主要对几种纤毛虫原生动物的形态学进行研究。定期对贝类养殖水体中的纤毛虫进行采集，样品带回实验室后，通过光学显微镜观察目标生物的活体形态，根据不同类群选择不同染色方法得到纤毛图式、银线
5、系、核器等结构。主要染色方法包括蛋白银染色、氨银法、CHATTONLWOFF等方法。最后结合纤毛虫原生动物的活体形态与染色后得到的结构对其进行种类确定，了解其在水体中所扮演角色。拟解决的问题通过活体形态学观察与现代银染方法，对养殖水体中几种纤毛虫原生动物的分类学做初步了解。掌握样品的采集方法，包括纤毛虫原生动物各种类群的采集，如浮游生类群、周丛生类群、底栖类群等；显微镜及影像采集系统的熟练运用，如相差法、微分干涉法等；初步掌握一种或两种现代银染方法，如蛋白银染色。知道研究纤毛虫原生动物所需要的基本步骤，最终取得锻炼动手力能及细心、细致工作方法的培养。三、研究的方法与技术路线贝类养殖水体现场测定
6、部分理化因子水温、盐度、PH、溶解氧周丛类群PFU法、载玻片框法底栖类群挖取地质、沙子，捞取沉积物样品采集样品室内处理纤毛虫分离、富集形态学观测活体观察、显微图像记录、形态学记录染色制片各种银染法获得纤毛图式、银线系等结构特征分析、数据统计处理种类鉴定技术路线技术路线四、研究的总体安排与进度2010年11月2010年12月1实验前准备工作查找资料，对实验内容做初步了解2取样工具、实验仪器和药品的准备3学习银染方法4完成开题报告、任务书及文献综述的撰写2011年1月2011年2月1实验2翻译英文文献2011年2月2011年3月1实验2数据整理3撰写初稿2011年4月2011年5月1初稿经指导老师
7、指正后进行修改和完善2毕业论文定稿，准备答辩五、主要参考文献1宋微波,徐奎栋纤毛虫原生动物形态学研究的常用方法J海洋科学,1993,27692范鑫鹏,林晓凤,李继秋,等南中国海五种新纪录纤毛虫的形态学观察J动物分类学报,2009,3423293343宋微波拟天鹅漫游虫的形态学研究J动物学报,1994,4021311364姜佳枚,邵晨,李俐琼,等青岛沿海七种腹毛类纤毛虫的形态学研究J动物分类学报,2008,3311151195LIN,X,SONG,W,WARREN,ATWONEWMARINEPLEUROSTOMATIDCILIATESFROMCHINA,AMPHILEPTUSGUINOVSPEC
8、ANDAMPHILEPTUSYUIANUSNOVSPECCILIOPHORA,PLEUROSTOMATIDAEURJPROTIST2005,41,1631736LIN,X,SONG,W,WILBERT,N,ETALTWONEWMARINEPLEUROSTOMATIDCILIATESFROMCHINA,LOXOPHYLLUMJINNIANDLQIUIANUMCILIOPHORAPLEUROSTOMATIDAACTAPROTOZOOL2005,441471577LIN,X,SONG,W,LI,JDESCRIPTIONOFTWONEWMARINEPLEUROSTOMATIDCILIATES,LOXO
9、PHYLLUMCHOIINOVSPECANDLSHININOVSPECCILIOPHORA,PLEUROSTOMATIDAFROMCHINAEURJPROTIST2007,431311398宋微波,马洪钢我国海洋纤毛虫原生动物的研究进展J生物学通报,2000,35510139宋微波,N维乐伯特,B希尔南极海胆体内的共栖纤毛虫原生动物J南极研究,1994,63536110宋微波海水养殖中的危害性原生动物M北京科学出版社,200311宋微波,徐奎栋,施心路,等原生动物学专论M青岛青岛海洋大学出版社,199912徐奎栋,宋微波海洋贝类的病害性纤毛虫研究III触毛亚目盾纤类纤毛虫J青岛海洋大学学报,2
10、000,30223023613徐奎栋,宋微波海洋贝类的病害性纤毛虫研究I吻毛类纤毛虫J青岛海洋大学学报,2000,30221722314胡晓钟,徐奎栋,宋微波扇贝外套腔内的共栖生纤毛虫J青岛海洋大学学报,1996,26218418815王崇明,王秀华,艾海新,等栉孔扇贝大规模死亡致病病原的研究J水产学报,2004,28554755316周丽人工越冬对虾体内寄生纤毛虫病的研究J海洋湖沼通报,1995,1616717徐奎栋,宋微波海产贝类车轮虫病及控制途径初探J青岛海洋大学学报,1996,26217217818宋微波,魏军三种危害性纤毛虫的形态学研究J水生生物学报,1998,2236136619徐
11、奎栋,宋微波海洋贝类几种危害性纤毛虫的研究J中国水产科学,1999,62414520陈相瑞海洋纤毛虫的多样性研究D中国海洋大学,200921宋微波,王梅海水养殖水体中的病害纤毛虫J海洋科学,1993,4414722宋微波,朱明壮,陈子桂,等海水养殖水体中危害性纤毛虫原生动物研究盾纤目习见类群的口器结构及鉴别特征J青岛海洋大学学报,2000,30220721623王娅宁,施心路,刘桂杰,等纤毛原生动物研究的经济意义J2009,266727524徐奎栋,宋微波海洋贝类的病害性纤毛虫研究嗜污亚目盾纤类纤毛虫J青岛海洋大学学报,2000,30222422925徐奎栋,宋微波贻贝外寄生病害纤毛虫1新种威海下毛虫J中国水产科学,1998,541116
