抗氧化活性乳酸菌的筛选及其遗传稳定性研究【开题报告】.doc
《抗氧化活性乳酸菌的筛选及其遗传稳定性研究【开题报告】.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《抗氧化活性乳酸菌的筛选及其遗传稳定性研究【开题报告】.doc(4页珍藏版)》请在温州文客信息科技有限公司上搜索。
1、毕业论文开题报告食品科学与工程抗氧化活性乳酸菌的筛选及其遗传稳定性研究一、选题的背景与意义氧化反应是许多生物产生能量的必要反应。然而,过多的氧化反应也会破坏生物大分子。尽管人类和其它生物具有的抗氧化防御系统能保护他们免于氧化损伤,但这些系统对于防止氧化损伤并不能完全有效地发挥其作用。近年来证实,抗氧化剂可以被用来帮助人体减少氧化损伤,但是,合成抗氧化剂对健康和长期效应等存在安全的问题。寻找天然的安全的抗氧化剂将成为研究热点。乳酸菌广泛应用于食品工业,不仅可以提高食品的营养价值,改善食品风味,增加食品贮藏期,而且具有特殊的营养价值和生理活性。大量研究表明,乳酸菌可以调节机体肠胃道正常菌群,抑制肠
2、道内腐败菌生长繁殖产物的产生,保持微生态平衡,促进免疫能力,还具有降低血脂胆固醇,抗肿瘤、防癌等功能,从而对机体的生理功能、免疫反应、肿瘤发生和衰老过程等产生全面的营养保健作用。因此,筛选具有抗氧化活性的乳酸菌具有很大的研究和应用价值。我国的发酵乳制品行业发展的十分迅速,但是由于在这方面的研究较少,还是出现了许多问题,例如我国保藏的发酵剂菌种大部分从国外的发酵剂中分离,对其在遗传中的稳定性并不了解,这方面的研究也甚少。要想真正发展我国的发酵乳制品行业,这个问题是需要被重视的。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题以20种实验室保藏菌种为来源,从中筛选出具有抗氧化活性的乳酸菌,通过电泳的方法,分析
3、抗氧化活性乳酸菌全菌体蛋白在传代遗传过程中的表达差异,来判断其在遗传过程中的稳定性。1利用乳酸菌清除DPPH自由基和超氧自由基的试验,从中筛选出具有较好抗氧化活性的乳酸菌。2通过传代培养,提取全菌体蛋白,利用SDSPAGE电泳的方法,找出全菌体蛋白在遗传过程中的表达差异,进一步研究乳酸菌的遗传稳定性。三、研究的方法与技术路线技术路线研究方法抗氧化活性乳酸菌的筛选乳酸菌无细胞提取物的制备乳酸菌培养采用液体MARS培养基,37摇床培养箱中培养24H。取培养液300ML,在5000R/MIN下离心20分钟,去上清液去菌体,加入30MLPBS磷酸缓冲液,在5000R/MIN下离心20分钟,去上清液去沉
4、淀,再加入30ML的PBS磷酸缓冲液,在5000R/MIN下离心20分钟,去上清液,取沉淀,加去离子水30ML,经冰浴超声破碎细胞后,在4,12000R/MIN离心20MIN,收集上清液,即为无细胞提取物。乳酸菌清除自由基DPPH的能力测定取不同样品20ML,加入40ML(浓度为01MMOL/L)的DPPH乙醇溶液和10ML(浓度为50)的乙醇溶液,混合均匀后,在暗处反应40分钟,并在10000R/MIN下离心20MIN,弃沉淀取上清液,在517NM下测定吸光度AI。空白组以等体积蒸馏水代替样品溶液,并且空白组空白调零。清除率(AIAJ)/AI乳酸菌清除超氧自由基的能力测定取不同样品10ML,
5、分别加入45ML(浓度为01MOL/L,PH为82)的TRISHCL溶液,10ML(浓度为1MMOL/L)的EDTA溶液,24ML的纯水和20ML(浓度为9MMOL/L)的邻苯三酚溶液,混合均匀,反应40MIN后,分别加入100L的HCL溶液(浓度为12MOL/L),并在10000R/MIN下离心20MIN,弃沉淀取上清液,在325NM下测定吸光度AI空白组以等体积蒸馏水代替样品溶液,并且空白组空白调零。清除率(AIAJ)/AI抗氧化活性乳酸菌的遗传稳定性传代培养在200ML灭菌过的三角瓶中加入150MLMRS培养基,接种筛选出的具有抗氧化活性的乳酸菌15ML,即接种量为1,置于37的恒温培养
6、箱中培养。培养24H后,取该发酵液15ML,接种到装有150MLMRS培养基的200ML灭菌过的三角瓶中(接种量为1),此为第1代,如此连续接种20天。菌体蛋白的制备抗氧化活性乳酸菌的筛选乳酸菌清除自由基DPPH能力的测定乳酸菌清除超氧自由基的能力测定抗氧化活性乳酸菌的遗传稳定性传代培养菌体蛋白的制备SDSPAGE电泳分别取第1代、第5代、第10代、第15代和第20代的乳酸菌菌液适量,在4000R/MIN下离心20MIN,弃上清液,加PBS磷酸缓冲液清洗,在4000R/MIN下离心20MIN,弃上清液,反复清洗2次,在菌体沉淀中加入无菌水,制成悬菌液,用超声波破碎乳酸菌(用作时间10S,间隔时
- 1.请仔细阅读文档,确保文档完整性,对于不预览、不比对内容而直接下载带来的问题本站不予受理。
- 2.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
- 3、该文档所得收入(下载+内容+预览)归上传者、原创作者;如果您是本文档原作者,请点此认领!既往收益都归您。
最后一页预览完了!喜欢就下载吧,查找使用更方便
6 文钱
下载 | 加入VIP,畅享折扣下载 |
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 氧化 活性 乳酸菌 筛选 及其 遗传 稳定性 研究 开题 报告
链接地址:https://www.wenke99.com/p-24949.html