1、毕业论文开题报告水产养殖条石鲷发育早期脂肪酸组成研究一、选题的背景与意义条石鲷OPLEGNATHUSFASCIATUS，TS，俗称日本鹦鹉鱼，隶属于鲈型目PERCIFORMES，石鲷科OPLEGNATHIDAE，石鲷属，主要分布于我国的黄海、东海，日本的北海道以南等海1。条石鲷体态优美、色泽艳丽、肉质细嫩、营养价值高，是一种具有较高经济价值的海产鱼类2。条石鲷皮下含有丰富的胶质，口感独特，深受消费者的青睐；其幼鱼体态优美、色泽鲜艳、条纹美丽，具有较高的观赏价值。在北方，可采用海上网箱、池塘与室内相结合的养殖模式，南方可以在海上进行网箱养殖3。随着其养殖规模的不断扩大，条石鲷在营养价值和经济价值
2、上的重要性也日益凸显。人体不能自身合成多不饱和脂肪酸，合理的脂肪酸摄入对身体健康极为重要。N3族多不饱和脂肪酸N3PUFA中，有代表性的物质包括二十碳五烯酸EPA和二十二碳六烯酸DHA等4。EPA和DHA主要来源于海洋生物或深海鱼类，是生理作用最重要的N3族脂肪酸5，对人体而言，具有降血压、抗血栓、预防心血管疾病及抗肿瘤等多种重要的生理功能，在降低血脂、降低心脑血管疾病发病率方面有显著作用6。研究证实DHA能直接影响人大脑功能,同时对多种疾病如动脉粥样化具有预防和治疗功能7。同样，EPA对体内合成前列腺素和凝血烷等激素具有重要作用8。在能够提供脂肪酸的营养源中，海洋生物和深海鱼类富含多不饱和脂
3、肪酸，尤其是EPA和DHA含量比淡水鱼高出许多9。通过研究比较海水鱼类各发育阶段的脂肪酸组成与变化,可以阐明该鱼在不同生长时期的脂肪酸需求,也可为人工饲料的科学配方提供理论支持。目前对各种海淡水鱼类的脂肪酸研究众多，但对条石鲷的脂肪酸组成研究方面少有人涉及。本课题拟通过分析条石鲷卵巢、受精卵、稚鱼、幼鱼以及成鱼体内的脂肪酸种类、组成以及含量变化规律，来探明条石鲷生长过程中脂肪酸的积累、转化和利用情况。这对评价条石鲷不同发育阶段的营养状况有重要参考价值，也可为养殖条石鲷仔鱼开口饵料的配制提供理论指导。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题（一）基本内容1条石鲷不同发育阶段总脂的测定；2条石鲷生长周
4、期中各阶段脂肪酸组成特色和规律分析；3综合分析不同发育阶段脂肪酸的组成以及变化规律与生长环境和营养需求的关系。（二）拟解决的主要问题1关注条石鲷的特定脂肪酸，是否有某类脂肪酸在每个阶段皆出现；2鉴别先天拥有和后天获得的脂肪酸种类。3早期发育时缺少的脂肪酸类型，幼鱼阶段缺少的种类及其与饵料的关系；三、研究的方法与技术路线（一）研究方法1BLIGHDYER法取1G鱼粉样品干样，加氯仿和甲醇各2ML，研磨后加入离心管10ML。用2ML氯仿冲洗研钵两次，冲洗液一并加入离心管。再加入35ML蒸馏水，摇动离心管使之充分混合，以2000R/MIN离心5MIN，分层后取氯仿层转入30ML带盖试管中，用氮气吹干
5、。2GC/MS分析GC条件进样口温度250，载气为纯度为99999的高纯氦，柱流速081ML/MIN,柱前压730KPA,柱起始温度150，保持35MIN，以20/MIN升至200，再以5/MIN升至280，保持37MIN。分流进样1L，分流比501；MS条件离子源选用电子轰击（ELECTRONIMPACT,EI）源，电子能量为70EV，离子源温度200，接口温度250，选取全程离子碎片扫描（SCAN）模式，质量扫描范围为40600，溶剂延迟35MIN。用化学电离（CHEMICALIONIZATION,CI）源分析时，反应气为甲烷。（二）技术路线样品匀浆，冷冻干燥总脂的提取总脂的皂化GC条件进
6、样口温度250，载气为纯度为99999的高纯氦，柱流速081ML/MIN,柱前压730KPA,柱起始温度150，保持35MIN，以20/MIN升至200，再以5/MIN升至280，保持37MIN。分流进样1L，分流比501脂肪酸甲脂化GC/MS分析测定结果定性分析CHCL3/CH3OH/H2O混合液抽提三次，调节比例，静置分层。上层液旋转蒸发得到总脂加入KOH甲醇水，60度水浴调节PH，氯仿/正己烷混合液抽提三次，上层液即为脂肪酸双蒸水抽提一次，旋转蒸发；加入BF3甲醇液，60度水浴加入饱和食盐水，分别以正己烷、氯仿/正己烷混合液抽提，提取上层液。加入无水硫酸钠后再提取上层液旋转蒸发，以1ML
7、正己烷定容。MS条件离子源选用电子轰击（ELECTRONIMPACT,EI）源，电子能量为70EV，离子源温度200，接口温度250，选取全程离子碎片扫描（SCAN）模式，质量扫描范围为40600，溶剂延迟35MIN。用化学电离源分析时，反应气为甲烷结合质谱图和NIST数据库定性分析四、研究的总体安排与进度2010120102毕业论文选题2010220103进行文献查阅和资料收集，制定具体研究计划和试验方案2010120104完成开题报告，修订实验方案2010420105文献综述与开题答辩20106201010进行实验，数据整理、结果分析20101220112完成2篇外文翻译，论文初稿撰写20
8、11320114按指导教师的意见，反复修改论文，提交并答辩五、主要参考文献1朱元鼎,福建鱼类志（下卷）M福州福建科学技术出版社,1985,2542552武云飞,门强,康斌两种珍稀鱼类的形态学和生态学的补充研究J青岛海洋大学学报,1999,2945815853刘朝阳,孙晓庆条石鲷的生物学特性及人工育苗技术J北京水产,2007,210114朱碧英,陈全震鱼油脂肪酸组成及其含量分析J东海海洋,1999,17261635刘洪祥食品保健精致鱼油开发J天然产物研究与开发,1993,5371786陈丽花,肖作兵,周培根中国对虾的脂肪酸分析及其营养价值评价J上海海洋大学学报,2010,1911251297YZ
9、EBED,LIEVREFISHOILSINTHECAREOFCORONARYHEARTDISEASEPATIENTSAMETAANALYSISOFRANDOMIZEDCONTROLLEDTRIALSJFUNDAMCLINPHARMACOL2004,185815928WUT,GEIGERMANC,LEEYS,ETALENRICHMENTOFLDLWITHEPAANDDHADECREASEDOXIDIZEDLDLINDUCEDAPOPTOSISINU937CELLSLIPIDSJ2002,377897969李淡秋二十种淡水鱼虾脂肪酸组成的分析研究J水产科技情报,1991,183737810BELL
10、MV,BATTYRS,DICKJRETALDIETARYDEFICIENCYOFDOCOSAHEXAENOICACIDIMPAIRSVISIONATLOWLIGHTINTENSITIESINJUVENILEHERRINGCLUPEAHARENGUSLJLIPIDS,1995A,3044344911沈同,王镜岩,赵邦悌生物化学,上册M北京高等教育出版社,1980353712谢小军,邓利饥饿对鱼类生理生态学影响的研究进展J水生生物学报,1998,22218118813刘镜恪,陈晓琳海水仔稚鱼的必需脂肪酸N3系列高度不饱和脂肪酸研究概况J青岛海洋大学学报,2002,32689790214刘镜恪,周利
11、,雷霁霖海水仔稚鱼脂类营养研究进展J海洋与湖沼,2002,33444645015RODRIGUEZC,PEREZJA,LORENZOAETALN3HUFAREQUIREMENTOFLARVALGILTHEADSEABREAMSAURATAWHENUSINGHIGHLEVELSOFEICOSAPENTAENOICACIDJCOMPBIOCHEMPHYSIOL,1994,107A69369816刘镜恪海鱼早期阶段必需脂肪酸和磷脂的研究现状与展望J海洋水产研究,2002,232586317RAINUZZOJR,REITANKI,OLSENYTHESIGNIFICANCEOFLIPIDSATEARLY
12、STAGESOFMARINEFISHAREVIEWJAQUACULTURE,1997,15510311518黄磊,詹勇,许梓荣饵料中高不饱和脂肪酸在海水鱼苗培育中的作用J齐鲁渔业,2003,2012101319童圣英,姜宏,陈炜不同培养条件下蒙古裸腹脂肪酸组成比较J中国水产科学,1998,53586320徐秀兰,蒋企洲,胡磊军,伊静卤虫中蛋白质和脂肪酸组成的研究J中国生化药物杂志,1997,18628929121王胜,刘永坚,田丽霞,等斜带石斑仔鱼不同饵料的营养分析及其对生长和鱼体脂肪酸组成的影响J中山大学学报自然科学版,2003,42221021322王大志,彭兴跃,李少菁,程兆第海水小球藻
13、脂肪酸组成研究J海洋科学,1999,4687023张利民,常建波,等N3多价不饱和脂肪酸营养强化轮虫技术研究J水产学报,1997,21441542124郑乐云不同饵料对点带石斑鱼幼鱼生长、存活的影响J台湾海峡,2004,23334134625龚小玲,苏锦祥,段晓英,姜秀凤不同饵料培养的轮虫对假睛东方仔鱼脂肪酸的影响J中国水产科学,1999,6311912226周光正饵料对培养轮虫BRACHIONUSPLICATILIS脂肪酸组成的影响J海洋科学,1996,5,272827邱小琮,等营养强化的轮虫、卤虫对牙鲆仔鱼的成活、生长及体脂肪酸组成的影响J水产科学,2004,2324828王丹丽,徐善良,
14、严小军,等大黄鱼仔、稚、幼鱼发育阶段的脂肪酸组成及其变化J水产学报,2006,30224124529薄海波,王霞碱催化法衍生化气相色谱/质谱法分析青海湖裸鲤鱼油中脂肪酸J色谱,2006,21218118430TOCHERDR,SARGENTJRANALYSESOFLIPIDSANDFATTYACIDSINRIPEROESOFSOMENORTHWESTEUROPEANFISHJLIPIDS,1984,1949249931周光正,王远隆,王淑君海水仔稚鱼对于N3高度不饱和脂肪酸需求量的研究现状J海洋湖沼通报,19963727532马爱军,雷霁霖,陈四清,张秀梅,陈大刚大菱鲆产卵季节对卵子的生物学及生化特征的影响J海洋与湖沼,2002,331,758033杨文鸽马面鲀卵巢中磷脂成分与脂肪酸的分析J宁波大学学报理工版,2000,131535634王维群营养学M北京高等教育出版社,200576258
