1、自体生物胶在临床应用研究进展,东莞市中心血站刘赴平,异体胶(纤维蛋白胶)（fibrin sealant）生物胶1、自体纤维蛋白胶自体胶2、自体血小板胶,一、自体纤维蛋白胶（Autologous fibrin sealant）,是种使用方便、可吸收的自体血浆衍生物制品，其主要成分是：纤维蛋白原和凝血酶。纤维蛋白胶是由凝血酶、纤维蛋白原及钙联合形成的纤维蛋白，是一种局部止血剂。它作为一个完全成熟的止血剂应用在心脏、肝脏以及在肾脏手术中，也应用在软组织切开后防止血肿形成，还应用于血管吻合、肠吻合和瘘管关闭，应用于血友病病人的手术、腹腔镜下胆囊切除和其它内镜手术。,（一）作用机理,纤维蛋白原,凝血酶,
2、可溶性单体,因子、钙,不溶性纤维,纤维蛋白溶酶,抗纤溶药,纤维蛋白降解产物,纤维蛋白原分子量为340000Da，在伸展的45nm结构中由两组多肽构成(A,B,r)2。增加凝血酶原，酶A、B裂解，留下可溶性纤维蛋白单体（,r)因子的出现，作为一个纤维蛋白稳定因子，纤维蛋白经过共价交联进而形成交联的纤维蛋白和纤维蛋白网。抗纤溶药物通常用来减少裂解率及降解产物。纤维蛋白单体的机械强度受下列因素影响：纤维蛋白原的相对浓度；凝血因子的含量；纤维蛋白胶粘附蛋白含量。纤维蛋白原浓度越高，构成的网状系统越强，而较高比例凝血酶形成网状系统更迅速（强度与纤维蛋白原相关，而速度与凝血酶相关）。,（二）制备方法,两种
3、方法：从血浆中制备冷沉淀，进一步加工成自体纤维蛋白胶。从血浆中分离纤维蛋白原，进一步加工成自体纤维蛋白胶。,1、冷沉淀法制备自体纤维蛋白胶,血浆单采法采集自体血浆500600ml，-30冷冻成块状，4溶化，离心后再次-30冷冻成块，4溶化，离心，去除上清血浆，余5060ml片状沉淀物，-30保存。应用时将其37水溶中溶化（纤维蛋白原浓度可达80mg/ml），与相同数量的凝血酶（500IU/ml）混合，在很多手术中都是一种成功的止血剂和组织粘合剂。,2、纤维蛋白原法制备自体纤维蛋白胶,硫酸铵、聚乙二醇化学沉淀采自身全血4050ml于枸橼酸抗凝血试管中，分离出血浆，在血浆中加入硫酸钡和硫酸镁吸收去
4、除血浆中的凝血酶原和凝血酶，加入30%聚乙二醇沉淀，离心后去除上清，余5ml左右片状沉淀，-30冷冻保存。使用时，37水溶溶化，与氯化钙和凝血酶（500 IU/ml）的混合物，等量用于手术部位。,乙醇化学法沉淀采集88ml枸橼酸钠抗凝全血，抗凝剂12ml。600g，10分钟离心，分离出血浆约5058ml，加入5ml 99%乙醇，0下孵育30分钟。600g，15分钟离心，去除上清液，余下56ml片状沉淀，-30冷冻保存。使用时，37水溶中溶化，与凝血酶（500 IU/ml）等量混合用于手术部位。腹腔、胸腔回收的血液因接触创伤组织引起了部分去纤维化，不能用于制备自体纤维蛋白胶。,（三）临床应用,1
5、、止血剂 自体纤维蛋白原同凝血酶分别装在不同的注射器中，同时应用在孤立的出血点，或喷射于广泛的渗血表面。2、组织粘合剂 自体纤维蛋白胶作为组织黏合剂使用在：鼓室成形术以及其他耳部的手术；颌面和骨科的移植骨片的准备；肌腱修复以及其他骨科修复手术；硬脑膜撕裂及脑脊髓液渗漏的封闭；,黏合肠管、血管、神经；皮瓣移植；肾盂切开取石术。黏合组织利于更早拔出引流，封闭瘘管以及减少积液形成；当纤维蛋白胶完全聚合后，能使组织层次靠近时限制组织粘连；作为生物学上的基质，允许血管内皮化，促进内皮细胞以及烧伤表面角质化细胞的生长。,（四）优点,1、止血及组织黏合作为黏合剂，自体纤维蛋白胶可以减少血液丢失并且有可能改善
6、手术效果。也可以作为组织密封剂阻止液体丢失，并且促进组织黏合，消除潜在腔隙。因此，它能够缩短手术时间和减少并发症，增加成本效益比。,2、过敏反应少在肝裂伤的患者中应用大剂量的异体纤维蛋白胶会引起严重的低血压，这是由于在敏感个体中，接解牛凝血酶或者血浆中的变态反应原造成的；致敏的IgA缺乏患者如果接解异体血浆产品也可能引发严重过敏反应。自体纤维蛋白胶很少有过敏反应发生。3、无传播疾病风险,（五）缺点,1、纤维蛋白原浓度低，纤维蛋白胶总量有限自体纤维蛋白胶的纤维蛋白原浓度较低，弹力强度较异体纤维蛋白胶低。而且由于从患者采集的预存自体全血数量有限，因此可以得到的自体纤维蛋白胶的总量有限。2、使用复杂
7、，价格昂贵在采血和加工处理过程中，需要大量的后勤协助，因此对很多输血技术人员和外科医师来讲，既难办到又昂贵。3、异体产品发展成熟，自体产品难以开展,二、自体血小板胶 (Autologous platelet get，APG),（一）自体血小板胶与血小板自体血小板胶始于20世纪90年代。将自体富含血小板血浆同凝血酶及氯化钙混合，即可得到自体血小板胶。其功能与血小板的生理特性及其激活后释放的多种生长因子密切相关，激活的血小板具有黏附、聚集及释放等生理特性，在止血及凝血过程中发挥着重要的作用。可用于手术中止血、封闭伤口与胸骨愈合，还可促进伤口部位软组织再生及组织修复。自体血小板胶可以释放出高浓度各类
8、生长因子及纤维蛋白原进而发挥作用。因此，自体血小板胶在欧美国家临床应用逐渐增多，并扩展至很多方面。,（二）止血机制,自体血小板胶是模拟人体凝血反应最后阶段，当各种成分混合后，凝血酶将纤维蛋白原水解成纤维蛋白单体，并在因子、Ca2+作用下，聚集形成稳定的纤维蛋白多聚体，从而在手术中发挥止血及封闭组织创面的功能，纤维蛋白网提供基质和间皮趋化活性物质，从而利于纤维母细胞长入、新生毛细血管形成及肉芽组织生成，以促进伤口愈合。,（三）制备方法,采集全血用3.8%枸橼酸钠抗凝，在室温下580g，8分钟离心，血浆的下三分之一为富含血小板血浆,富含血小板血浆,在使用自体血小板胶之前，自体富含血小板血浆需要与激
9、活剂（由牛凝血酶与10%氯化钙混合制成）按5:1比例混合、摇匀，经过1418秒后即制成具有黏性的胶状凝块的自体富含血小板血浆凝胶。APG配方见表。,自体血小板凝胶配方,制作程序,1、使用前准备（1）采集所需容量的富含血小板血浆，并置无菌干燥容器内备用。（2）按表配方将凝血酶和氯化钙混合物，至另一无菌干燥容器中备用。2、使用时（1）将富含血小板血浆和氯化钙/凝血酶混合物抽入双筒注射器的两个筒内。注射器针头略放平，使液体以喷雾状而非喷流状从注射器中排出。（2）使用时把注射器中内容物同时喷洒到手术部位。（3）12分钟后见一不透明胶膜。（4）可根据止血需要重复喷雾。,（四）临床应用,1、在心脏外科的应
10、用 心脏外科手术是自体血小板胶最早应用的领域之一。将自体富含血小板血浆、Ca2+及凝血酶喷洒在手术创面，能模拟人体自体凝血反应的最后阶段，将纤维蛋白原转化成纤维蛋白多聚体，从而产生止血、封闭手术伤口及促进胸骨愈合。,2、在骨科的应用 在骨折愈合过程中，自体血小板胶所含的各类生长因子起到至关重要的作用。转化生长因子-可增加细胞外骨基质，并且调节骨与软骨形成；血小板生长因子，在骨愈合的诱导阶段及传导阶段发挥重要作用。因此，自体血小板胶联合自体骨移植材料，可以促进骨骼生长、加速骨折愈合。,3、促进伤口愈合 伤口愈合过程极其复杂，生长因子作为一种信使可以调节整个过程。自体血小板胶中的血小板生长因子，能
11、刺激成纤维细胞和单核细胞增殖和趋化，而且在皮肤伤口中促进肉芽组织形成，在眼科中对人视网膜神经胶质细胞有促进有丝分裂和趋化性作用；而转化生长因子-参与多种细胞的趋化、增殖及分化，并对创伤后上皮再生、间质增生及血管形成起作用，有利于伤口愈合中细胞的增殖和移行。,4、抗炎、止痛 冠状动脉搭桥手术的患者，在血管桥处（乳内动脉和大隐静脉），由于局部血液循环障碍，可引起组织水肿、感染和疼痛等并发症。局部应用自体血小板胶后，可明显减轻患者疼痛、消除水肿及对抗感染。但自体血小板胶可导致移植血管痉挛，因此，应避免将自体血小板胶喷洒在移植血管上。,自体血小板胶制备方法简单、费用低而且临床效果明显，应用前景广阔。但也存在着操作不规范的不足，因此必须对自体血小板胶中血小板进行定量，使自体血小板胶产品标准化，同时保证制备过程中严格遵守无菌操作。,Thank you!,
