1、实验一 神经-肌肉标本的制备与肌肉收缩的观察,一、实验目的1.掌握解剖生理学实验常用手术器械的使用。2.学习蛙类动物单毁髓和双毁髓的实验方法。3.掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本。4.熟悉生物信号采集系统（MD3000）软件的操作。4、掌握描记骨骼肌单收缩及强直收缩曲线的方法,二、基本原理,蟾蜍的某些基本生命活动， 如神经的生物电活动、肌肉收缩 等与哺乳动物相似。其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。 肌肉受到一次阈上刺激产生的一次收缩为单收缩，其过程分为潜伏期、收缩期与舒张期。肌肉受到连续的阈上刺激时，若刺激间隔小于单收缩时程，相邻收缩会出现融合，表现为强直收缩。,三、实验材料,蟾蜍
2、、解剖盘、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊，毁髓针、玻璃分针、蛙板、蛙钉、锌铜弓、培养皿、胶头滴管、细棉线、任氏液、 MD3000生物信号采集系统、铁支架、生理肌槽、张力换能器,四、实验步骤,术前准备：配制任氏液任氏液： 离子比率与蟾蜍血浆相同，可以维持标本的正常兴奋性。,Na+、Ca 2+、K+、Cl- HCO3- 、H2PO3-,1、蟾蜍的单毁髓与双毁髓 一手握蟾蜍，食指按压头部前端，拇指压住躯干背部。 另一只手持毁髓针由两眼之间沿皮肤中线向后划触，至两耳后腺之间的凹陷处（枕骨大孔）将毁髓针垂直插入，然后将针尖向前刺入颅腔，捣毁脑组织，称单毁髓动物。再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊
3、柱平行刺入椎管捣毁脊髓，称双毁髓动物。,如毁髓针确实在颅腔内，实验者有针来回摆动无阻力及触及颅骨的感觉。,彻底捣毁脊髓时，可见蟾蜍两后肢突然蹬直，然后瘫软，并常有尿失禁的情况。 如动物仍有表现四肢肌肉紧张或活动自如情况，表明尚未毁坏脊髓，必须重新毁髓。,2、坐骨神经-腓肠肌标本制备 1）剥制后肢标本 左手提住蟾蜍脊柱，右手持剪刀在骶髂关节水平之上0.51.0cm处用粗剪刀横断脊柱。然后用左手握住蟾蜍的后肢并以拇指压住骶骨，使其头和后肢自然下垂，右手持粗剪刀，沿脊柱两侧剪掉蟾蜍的一切内脏及头、胸部。,2）剥皮 用蘸有任氏液的拇指和食指捏住断开的脊柱后端，另一手向后撕破皮肤并除去两后肢皮肤。将剥干
4、净的后肢放入任氏液中，清洗手及用过的器械。,3）分离两后肢 将去皮的两后肢纵向剪开脊柱，并在耻骨联合处剪开耻骨及相连的肌肉组织，使两后肢完全分离，放入任氏液中备用。,4）分离坐骨神经,腓肠肌,肱二头肌和半膜肌间的神经沟,梨状肌,5）游离腓肠肌 一手捏住趾端，另一手用手术镊在腓肠肌跟腱下面穿线，打结扎进，提起结线，游离腓肠肌。,6）分离股骨头或胫腓骨头 根据动物个体大小，可以选择分离股骨或胫腓骨。方法就是选择好骨头后，沿膝关节保留1cm左右长的骨头，刮干净骨头上的肌肉，然后剪去其它部位的肌肉和骨头，仅保留腓肠肌与股骨或胫腓骨的联系。,3、标本活性检查,检验标本,4、固定标本，连接仪器 将标本固定于生理肌槽，跟腱上的扎线与张力换能器相连。,5、用MD3000生物信号采集系统记录单收缩和强直收缩 先后进行单刺激和连续刺激（刺激频率由低到高），依次记录单收缩、不完全收缩和完全收缩曲线，并剪辑、打印。,刺激频率与肌肉收缩关系,五、注意事项,操作过程中不可将剥皮后的标本同皮肤、内脏等弃物放在一起。不要用力牵拉坐骨神经。 标本需经常用任氏液湿润标本。 完整的神经-腓肠肌标本应包括：连有坐骨神经的脊椎骨、坐骨神经、腓肠肌、股骨或胫腓骨四部分,
