1、尿液干化学检验结果的影响因素,尿液生成,血液流经肾脏时，经肾小球滤过入肾小囊形成原尿（180升），再经肾小管和集合管选择性重吸收，再流经输尿管，在膀胱内暂时贮存，最终排出体外。,尿液检验目的,1.协助诊断泌尿系统疾病和疗效观察：泌尿系统炎症、结核、结石、肿瘤、肾脏的移植排斥反应以及肾衰竭时，尿液成分会发生变化，治疗后好转。因此，尿液检验是泌尿系统疾病最常用的不可替代的首选项目。2.安全用药监护：某些药物如庆大霉素，卡那霉素，磺胺类药物等常可引起肾脏损害，用药前及用药过程中应经常观察尿液变化，以确保用药安全。3.协助其他系统疾病的诊断：如糖尿病时进行尿糖检查，急性胰腺炎的尿淀粉酶检查，黄疸时的尿
2、三胆（尿胆红素、尿胆原和尿胆素）检查，急性溶血性疾病的血红蛋白尿检查等。4.职业病辅助诊断：检验尿中重金属（如铅、汞、铋等）的排出量，对职业病的诊断、预防及开展劳动保护，具有实用的价值。,尿液标本采集种类,1.晨尿：即清晨起床后第一次排尿时收集的尿标本，即为首次晨尿。这种标本尿较为浓缩，可用于肾脏浓缩能力评价。首次晨尿常偏酸性，其中的血细胞、上皮细胞、病理细胞、管形或管形等有形成分，以及如人绒毛膜促性腺激素（HCG）等的浓度较高。但夜尿在膀胱内停留时间过长，硝酸盐及葡萄糖易被分解，不利于检出在酸性环境中易变的物质，因而推荐采集第2次晨尿代替首次晨尿。,2.随机尿：这种标本不受时间限制，但此尿标
3、本，仅反映某一时段的现象，且易受多种因素（如运动、饮食、用药、情绪、体位等）的影响，可致尿检成分浓度减低或增高。3.计时尿： （1）3h尿：一般是收集上午69时时段内的尿，多用于检查尿有形成分，如1h尿排泄率检查等。 （2）餐后尿：通常收集午餐后至下午2时的尿。这种尿标本，有利于检出病理性糖尿、蛋白尿或尿胆原。有助于肝胆疾病、肾脏疾病、糖尿病、溶血性疾病等的临床诊断。,（3）24h尿：患者上午8时排尿一次，将膀胱排空，弃去尿，此后收集各次排出的尿，直至次日上午8时最后一次排尿的全部尿。尿中某些成分24h不同时间内的排泄浓度不同，如肌酐、总蛋白质、电解质等，为了较准确地定量分析这些成分，必须采集
4、24h尿。 （4）特殊试验尿： 尿三杯试验：多用于男性下尿路及生殖系统疾病定位初步判断。 耐受性试验尿：如经前列腺按摩后排尿收集尿标本。 4.无菌尿：常用的方法有： （1）中段尿：留尿前先清洗外阴，在不间断排尿过程中，弃取前、后时段的尿，以无菌容器只接留中间时段的尿。 （2）导管尿、耻骨上穿刺尿：患者发生尿潴留或排尿困难时采用。,尿三杯试验,尿三杯试验是临床上遇到血尿、脓尿时，为了确定病变部位和揭示病因而进行的临床检验方法。尿三杯试验和病变部位的关系：第一杯尿，排尿开始出现血尿或脓尿，后两杯清晰，提示病变在前尿道，如尿道炎等。第一杯尿和第二杯尿清晰，第三杯尿出现红细胞和脓细胞，排尿终末出现的血
5、尿或脓尿，提示病变部位在膀胱底部、后尿道或前列腺部位，如前列腺炎、精囊炎等。三杯皆混浊或出现血尿，提示病变部位在膀胱或膀胱以上部位，如肾盂肾炎，肾小球炎等。,尿标本的保存,尿液标本应在采集后2小时内检查完毕，对不能及时检查的尿液标本，必须进行适当处理或保存，以降低因标本送检延时而引起的理化性状改变。1.冷藏冷藏是保存尿液标本最简便的方法，一般可保存6小时，但要避光加盖。冷藏保存在24小时内可抑制细菌生长，但有尿酸盐和磷酸盐沉淀可影响显微镜检查结果。因此，不推荐在2小时内可完成检测的尿液标本进行冷藏保存。冷藏保存主要用于电解质、肌酐、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、重金属、药物、激素类等检查。2.防腐,
6、尿标本防腐：,常用的防腐剂：（1）甲醛：对尿细胞、管型等有形成分的形态结构有较好的固定作用。（2）甲苯：阻止尿中化学成分与空气接触。常用于尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查。（3）麝香草酚：可抑制细菌生长，用于尿显微镜检查、尿浓缩结核杆菌检查，以及化学成分保存。（4）浓盐酸：用作定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺、Ca2+等标本防腐。（5）冰乙酸：用于尿5-羟色胺、醛固酮等的尿防腐。（6）戊二醛：用于尿沉淀物的固定和防腐。,尿液防腐剂注意事项,1.甲醛：100ml尿液中加入40%甲醛0.5ml。甲醛不适于尿液葡萄糖的检查（甲醛具有还原性）。2.甲苯100ml尿液中加入甲苯0.
7、5ml。3.麝香草酚：100ml尿液中加麝香草酚2500ml，儿童24小时尿量超过3L。2.少尿少尿指每小时尿量持续17ml或24小时尿量400ml。3.无尿无尿指12小时无尿或24小时尿量7.0时，造成结果偏低，应在干化学测定结果的基础上增加0.005作为由于碱性尿损失的补偿；尿液中蛋白或糖浓度增加使比密结果增加。,尿液葡萄糖检测原理：采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法。尿液葡萄糖被GOD氧化释放H2O2，H2O2与色素原在过氧化物酶的作用下，使色素原呈现不同的颜色变化。尿液葡萄糖检测的影响因素：对葡萄糖检测有特异性，只与葡萄糖发生反应；高维生素C（500mg/L）,使尿葡萄糖产生假阴性；尿液被
8、过氧化物、次氯酸盐、强氧化性清洁剂污染可使尿糖呈假阳性。,尿蛋白检测原理：采用pH指示剂蛋白误差法。在pH3.2时，溴酚蓝产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合发生颜色变化。颜色由黄色绿色蓝色的变化。尿蛋白检测的干扰因素：患者服用奎宁、嘧啶或尿液中含有聚乙烯、吡咯酮时，引起尿液呈强碱性，使尿蛋白呈假阳性；主要对清蛋白敏感，而对球蛋白、本周蛋白不敏感；肉眼血尿时，尿蛋白呈假阳性；,尿液酮体检测原理：采用亚硝基铁氰化钠法。在碱性条件下，亚硝基铁氰化钠与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应，试剂模块发生由黄色紫色的颜色变化。尿酮体检测的干扰因素：标本必须新鲜；尿液中细菌污染后，细菌繁殖使酮体消失等，导致假阴性；
9、试带受潮，可呈现假阴性结果；该试剂不与-羟丁酸反应。,尿胆红素检测原理：采用偶氮反应法。在强酸介质中，尿胆红素与二氯苯胺重氮盐耦联成红色化合物。试剂模块发生由黄色红色的颜色变化。尿胆红素检测干扰因素：当患者接受大剂量氯丙嗪治疗，或尿液中含有高浓度的维生素C、亚硝酸盐，或含有盐酸苯偶氮吡啶代谢产物时，使胆红素呈现假阴性；尿液中含有吩噻嗪或吩嗪类药物时，可使胆红素呈现假阳性；,尿胆原检测原理：采用醛反应法或重氮反应法。在强酸条件下，尿胆原与试带条中的对二甲氨基苯甲醛反应，试剂模块发生由黄色红色的颜色变化。尿胆原检测的影响因素：部分内源性物质（胆色素原，吲哚类）可与试剂反应，致假阳性；部分药物（磺胺
10、类，对氨基水杨酸类，对氨基苯磺酸）与试剂反应，形成黄色化合物，致假阳性；,不同类型黄疸的鉴别诊断,潜血检测原理：采用血红蛋白类过氧化物酶法。血红蛋白类过氧化物酶催化试剂模块中的过氧化氢烯钴和色素原，后者脱氢氧化而成色。颜色变化由黄色绿色深蓝色。尿液潜血检测的影响因素：维生素C100mg/L，可产生假阴性；尿液中含有肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或菌尿，可测定结果呈现假阳性。,尿液白细胞检测原理：采用白细胞酯酶法。粒细胞内的白细胞酯酶作用吲哚酚酯产生吲哚酚，后者与重氮盐产生紫色化合物，试剂模块发生由黄色紫色的变化。尿液白细胞检测的影响因素：干化学试带白细胞检测只对粒细胞敏感； 尿液含有大量维生素
11、C，引起尿白细胞假阴性； 尿白蛋白浓度5g/L时，引起尿白细胞假阴性； 尿中四环素、呋喃妥因、庆大霉素、头孢氨苄、草酸盐均对测定结果有干扰。,尿液亚硝酸盐测定原理：采用硝酸盐还原法。尿液中革兰氏阴性菌可使硝酸盐还原为亚硝酸盐，后者与氨苯砷酸重氮化形成重氮化合物，重氮物同N-萘基乙二胺偶联，使试剂模块发生由黄色红色的变化。尿液亚硝酸盐测定的干扰因素：硝酸盐浓度过低,可引起假阴性；尿液含有大量维生素C，引起尿亚硝酸盐假阴性；感染细菌无亚硝酸盐还原酶，可引起假阴性；尿液呈酸性及部分药物代谢物均可引起假阳性。,尿液干化学检测方法学评价,众多因素干扰尿液干化学检验结果，使得日常干化学尿液检验假阳性与假阴
12、性不可避免。因此尿液干化学检验只能作为尿液常规检验的过筛试验。,尿有形成分分析仪,检测原理：（1）影像式：与人工显微镜检查原理基本相似。必须经过严格的定时、定速离心，然后留取定量的尿沉渣，通过医学图像信息扫描技术应用于全自动相差显微镜镜检，机器视觉智能分析，识别并计数。（2）流式法：应用流式细胞术和电阻抗分析的原理，尿液有形成分被稀释及染色后，单个排列通过流动池中心轴线，染色细胞发出610nm橙红色荧光，荧光信号定量反应细胞特性（如细胞膜，核膜，核酸），前向散射光强度定量反应细胞大小和电阻抗大小。,尿干化学分析与显微镜检查结果的比较,尿液干化学分析仪与传统显微镜检查是两种不同原理的检验技术，在
13、临床中可能出现化学法分析结果与镜检结果不相符的情形。,（1）白细胞：分析仪法（+），镜检法（-）：可能的解释为尿液在膀胱贮存时间过长或其他原因致使白细胞破坏。分析仪法（-），镜检法（+）：多发生在尿液中以淋巴细胞或单核细胞为主时，应以显微镜检查结果为准。,（2）红细胞：分析仪法（+），镜检法（-）：由于尿液中红细胞常被破坏而释放出血红蛋白，或某些患者尿液中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿，引起红细胞干化学法测定结果的假阳性。分析仪法（-），镜检法（+）：可发生在尿液中含有大量维生素C或试带失效时。,中华医学会经过多次专家研讨会，制定了尿液干化学分析仪筛检标准。即：当尿液干化学试带质量合格、尿液分析仪运转正常情况下，试验结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐全部为阴性时，可以免去对红细胞和白细胞的显微镜检查，但如果其中有一项阳性结果，必须同时进行显微镜检查。这个筛选条件的基本原则是：能筛检出健康人标本，但不遗漏异常标本，避免出现假阴性。对出现假阳性的标本，则可以通过镜检进一步排除，已达到不误诊的目的。,
