1、血型和交叉配血,南华大学医学检验教研室谢海涛,一、ABO血型系统,二、ABO血型鉴定,三、Rh血型系统,四、交叉配血,报告内容,ABO血型和RH血型是红细胞的2大血型抗原抗体系统，在输血和血液遗传学研究有重大的意义。,一、ABO血型系统,1900年 美国免疫学家Karl landsteiner 发现RBC膜上A、B血型抗原，血清中有抗A、抗B抗体，将血型分为A、B、AB和O型。,（一） ABO血型系统抗原 1. ABO血型系统的组成和遗传 是存在于RBC膜上的一种糖蛋白，有多肽和糖链组成。A和B基因是显性基因，O基因是隐性基因，由A,B基因调控。 2. ABO血型系统抗原的分布 A、B、H抗原
2、存在于RBC膜上，也分布于WBC,PLT及其他组织细胞上。,血型物质：组织细胞合成并分泌的水溶性A,B,H血型抗原多为半抗原，主要存在于体液和分泌物中，以唾液中最为丰富。 分为分泌型和非分泌型。 血型物质具有和相应的抗体反应的性质可以协助鉴定ABO血型和预测胎儿的血型。,（二） ABO血型系统抗体 分为天然抗体和免疫性抗体。 天然抗体主要为IGM型抗体。 免疫性抗体主要为IGG型抗体。,（三）ABO血型系统亚型 A抗原主要亚型：A1和A2，中国以A1亚型为主。B亚型较少见，抗原性较弱。,二、ABO血型鉴定,输血安全是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。 检测原理：血型抗
3、原与相应的抗体在介质中形成RBC和相应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝集现象。,正向定型：用已知的特异性血清检查红细胞的未知血型抗原。 反向定型：用已知的标准红细胞检查标本中未知血型抗体。方法：盐水凝集法：检测IGM型抗体。2. 凝胶微柱法,方法学评价：1.盐水凝集法 分为玻片法和试管法。简单易行。2.凝胶微柱法 重复性好，特异性灵敏性高，全自动分析仪可以减少人为误差。缺点：成本高，需要特殊设备。,质量保证： 1.标准血清 ： 在有效期内使用，效价高，凝集力强，严防污染。常用的有： A 、人血清ABO血型抗体：特异性高，凝集效价：抗A不低于1128，抗B不低于164，亲和力在15秒出
4、现凝集，3分钟明显凝集，稳定性高，灭活补体。 B、人ABO单克隆抗体：特异性，亲和力，凝集效价，稳定性高。,2. 被检红细胞： A 、标本新鲜，严防污染。 B 、特殊病人标本，加做对照及正反定型，以及用洗涤红细胞做血型鉴定。3. 实验器材 ： 清洁干糙，应正反定型，时间温度离心时间均应该严格控制。 观察结果仔细，注意出现弱凝集现象，必要时在显微镜下观察结果。4. 综合分析实验结果。核实无误时方可以发出检查结果。,临床意义： 1.输血 2. 器官移植 3. 新生儿溶血病 4. 其他,三、Rh血型系统,1940年，Karl Landsteiner and Alexander Wiener 发现了R
5、h血型系统，是最复杂的红细胞血型系统之一。具有遗传多态性，导致血清学表现复杂，表型频率极不平衡。有3种命名方式。,（一） Rh血型系统的命名1 . Fisher-Race 命名法（CDE命名法）A、遗传基因位于1号染色体短臂上的连锁基因，每条有三个基因位点，依次排为CDE。 B、各基因位点由一对等位基因组成。C CDE以复合体的形式遗传 D 可有8种基因组合和36种遗传型。,2. ISBT命名法。3. Rh血型系统表型及基因型。根据红细胞上有无D抗原为Rh阳性和 Rh阴性。,（二） Rh血型系统抗原及抗体 1. Rh血型系统抗原 仅次于ABO血型系统的A、B抗原。与人类密切的是D、E、C、c、
6、e。 2. Rh血型系统抗体 天然抗体极少，由输血或妊娠刺激产生的IGG型免疫性抗体。以抗D最为常见。,（三）Rh血型鉴定 常用方法有酶介质法，低离子强度溶液试验，抗人球蛋白试验，凝集胺试验及人源盐水介质抗D试验。 检测原理 1.酶介质法 ：用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少排斥力，促进Rh抗原与抗体的结合而产生红细胞凝集。,2.聚凝胺试验：聚凝胺是带高价阳离子的季胺盐，有利于红细胞凝集。由Rh抗体致敏的红细胞产生凝集是特异性的不可逆凝集，非抗体致敏的凝集为可逆性凝集。3. 抗球蛋白试验 （Coombs Test）：是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利用抗球
7、蛋白抗体作为第二抗体，通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体，出现特异性凝集。,4.人源盐水介质抗D试验：利用免疫球蛋白变性剂处理，使IGG变为IGM类抗体，能在盐水介质中发生凝集现象，用于快速鉴定。5.低离子强度溶液试验,方法学评价,质量保证 1.检测前：标本新鲜，严防污染，被检红细胞用生理盐水洗涤。 试剂器材要在有效期内的合格试剂，器材清洁干燥。,2.检测中：A 、严格遵守操作规程 。B 、严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间温度以及离心条件等关键因素。C、每次均需阴性阳性和试剂对照。D、观察结果不可用力震摇，结果可疑用显微镜观察确认。3. 检测后：复查实验全过程，填写报告并于4度保存
8、标本一周以上。,临床意义1. Rh血型鉴定及交叉配血2.新生儿溶血病的诊断,四、交叉配血 交叉配血实验是在现象鉴定的基础上，进一步检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分。主侧：受血者血清与供血者红细胞；次侧：受血者红细胞与供血者血清。 检测原理 常用盐水配血试验。,方法学评价,质量保证1.检测前：A、建立标本签收制度。B、标本新鲜，无溶血，严防污染，有输血或妊娠史的应在48小时内留取。 C试剂器材要在有效期内的合格试剂。D、器材清洁干燥，严防溶血。,2.检测中：A、高度责任感。 B、器材标记清楚，吸管等均专用。 C、被检红细胞用生理盐水洗涤，浓度与标准血清的比例恰当。D、严格控制反应时间温度和离心条件。,E、配血试验阴性但有反复输血史和妊娠史的应用多种方法检测交叉配血。 F、48小时内用血量大，供血者间也要进行交叉配血。 G、同型配血出现溶血是交叉配血不合的表现。 H、仔细观察结果，注意区分。,检测后临床意义1.保证输血。 2.发现亚型和不规则抗体。 A、ABO血型的A亚型。B、ABO血型相同，其他血型不同。,
