1、1,病原微生物样本采集保存包装运输,山西省疾病预防控制中心张凡非,2,实验室的作用,突发事件的处理，不仅是对疾控机构，甚至是对一个城市医疗管理水平和政府行政管理水平的严峻挑战。疾控机构应在最短时间内采取规范、科学、符合标准要求的快速行动，以判断原因，采取有效对策。质量和速度是专业技术和管理水平等综合素质、反应能力的整体体现。,3,实验室的作用,传染病的诊断需要综合实验室检验结果。传染病的诊断应包括流行病资料、临床病史、体格检查以及实验室检验结果等。病原体的检出是确诊传染病的主要依据。应尽一切可能分离到病原体，特别是细菌、真菌等。病毒感染因病原不易被检出，培养需较长时间，一般实验室难以开展病毒分
2、离工作，因此在大多数情况下依赖免疫学试验而确立诊断。此外，还有分子生物学检测、影像检查、活体组织检查等。,4,实验室的作用,实验室在确认疫情性质、追踪传染病的来源、摸清潜在的传染源、为感染者寻找有效的治疗措施等方面发挥着重要的作用。 传染病的预防控制离不开实验室！,5,样本的重要性,科学合理地采集、保存、包装和运输样本，直接影响检验结果的准确性和可靠性。,6,样本采集决策,样本采集的质量是获得准确可靠的实验检测结果的重要因素。 样本采集的质量主要取决于样品采集的决策。,7,样本采集决策,对样本采集决策者的要求1.有广博的知识，最好是懂临床、流行病、实验室 2.对采样质量能够进行正确评价3.对实
3、验室进行评估4.微生物标本的特殊性,8,样本采集决策,采集什么样本，样本送检的目的是什么？在什么时间什么条件下采集？ 如何采集（方法和器材）？ 如何保存与运送？,在临床诊断和流行病学分析的基础上检验项目明确，不能包罗万象。,9,样本采集要求,采样人采样时间样本采集器材样本标识送检单保存运输条件防护用品,10,样本采集要求,采样人： 要有生物安全意识 掌握样本采集技术,11,采样时间： 一般在怀疑细菌感染时应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本，进行细菌的分离培养，否则这种标本在分离培养时要加药物拮抗剂。,样本采集要求,12,采样时间： 作病毒分离和病毒抗原检测的标本，应在发病初期和急性期采
4、样，因为此时病毒在体内大量繁殖，检出率高，病毒分类标本最好在发病13天内采取。,样本采集要求,13,抗体检测样本采样时间：血清：用于检测IgM的血清一般采于发病1个月内；用于检测IgG的血液应收集两次，第一次于发病初期（13天），越早越好，第二次血样一般在恢复期（第一次采血后34周）。双份血清同时检测，如抗体滴度有4倍以上升高才有意义。 脑脊液：一般于出现神经症状时采集，查IgM只需一份脑脊液，而查IgG则需收集两次，时间间隔同前所述。,样本采集要求,14,样本采集要求,样本采集器材：样本容器、记号笔、送检单、酒精灯、剪刀、酒精棉等采集标本应使用无菌容器，一个标本一个容器。对容器基本要求是选耐
5、用材料制成，容器包装好后可防渗漏。能承受空中地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。,15,样本采集要求,样本标识： 字迹清晰可辨 字迹不脱落 每个患者应用惟一的统一编号，它是实验室结果和标本及患者之间的联系，能够准确影响到进一步的调查及对疫情的控制措施。,16,样本采集要求,送检单： 编号与样本标识一致 信息全面，填写完整规范（ 至少包括：编号、姓名、性别、年龄、发病日期、采集日期、样本种类、样本量；最好提供：临床症状、采样前是否用抗生素、疫苗接种史、职业、接触史、住址、患者联系方式、采样人联系方式。） 在暴发调查中个案调查的信息应和标本同时收集，并且能够互相符合。,17,样本采集要求,保存
6、运输条件用于分离细菌的标本，应选择合适的培养基和推荐保存温度，这取决于运送时间的长短及不同病原微生物对干燥、温度、营养、pH值的耐受能力。用于分离培养细菌的标本应在运送培养基中运送并保存于合适的温度。能确保目标细菌的存活并抑制其他微生物的过度生长。,18,样本采集要求,保存运输条件用于分离细菌的标本，一般保存在48，但一些对低温敏感的细菌除外，如志贺氏菌、脑膜炎双球菌、肺炎球菌。总之应尽快分离。,19,样本采集要求,保存运输条件用于分离病毒的标本，一般应放在保温容器（0C4C）里，最好放置不超过2天，如不能立即分离病毒时，最好在70C或-70以下冻存。不应保存在-20。标本分装保存，尽量避免反
7、复冻融。如怀疑是寄生虫，所取粪便中加入10%福尔马林和PVA防腐剂（充分混合）。,20,样本采集要求,保存运输条件用于检测抗原或抗体的标本，可在4C8C保存2448h，在20C保存时间更长。检测抗体的血清，可在4C保存约一个星期，最长10天；超过一周必须在-20C下冷冻。,21,样本采集要求,防护用品采样中避免标本污染和人员感染和都是至关重要的，应采用防护措施，注意安全操作。采样应戴手套；根据生物危害程度，穿工作衣/防护服、使用口罩/N95口罩、护目镜。使用过的防护用品装入废弃物专用袋内。,22,粪便的采集方法,一份约450g的冷冻粪便样本送至实验室。样本量是否满足检验需求？合适吗？实验室如何
8、保存处理该样本？,该怎么办？,23,粪便的采集方法,自然排出粪便取样：选择有粘液、脓血部位。成形5g，稀便35ml。放入密封无菌容器送检。肠拭子：应用专用器材，如能立即接种时可用棉拭子插入肛门35cm，轻轻转动拭子，取出粪便。不能立即接种时，要放入保存液内送检。,24,尿液的采集方法,留中段尿法：先消毒外阴，再消毒尿道口，然后用生理盐水再冲洗，以免尿内混入消毒液，用无菌容器取中段尿1020ml，根据送检的项目处理，可离心后取沉淀物培养，也可以不离心直接计数无菌导尿,25,血液培养标本的采集方法,无菌操作采集静脉血液，将血液直接注入培养瓶内，最好是用细菌培养液，有不同的培养瓶可供选择，如厌氧、微
9、需氧、需氧等。如无密封培养瓶，可选用无菌三角烧瓶，严格无菌操作，以免污染无菌带有抗凝剂的小瓶，最好带罗帽，每项量最少5ml，根据培养项目确定采集量。,26,脑脊液标本的采集方法,由有经验医生在无菌条件下腰锥穿剌，最好是床边接种采样量35ml，也可取离心沉淀物培养,27,咽拭子标本的采集方法,根据不同病种，采集相应部位的分泌物。猩红热病人，采集咽部红肿、化脓性分泌物。白喉病人：在扁桃体两侧取伪膜，采集伪膜往往需用无菌镊子夹取。流脑病人：在鼻咽腔流感/人禽流感：双侧扁桃体及咽后壁。麻疹：鼻咽部和咽喉部,28,皮肤创伤标本的采集方法,多见于炭疽、结核病，腺鼠疫（淋巴结破损）。方法：先用盐水拭子擦表面
10、，如没破，可用无菌注射器抽取液体。如破溃，擦洗后，可取深部脓血液。注意：采集后同时涂片染色镜检。,29,样本的包装与运输,30,依 据,二五年十二月二十八日发布的卫生部第45号令可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定,二六年二月一日起执行。中华人民共和国传染病防治法病原微生物实验室生物安全管理条例人间传染的病原微生物分类名录,31,分 类,人间传染的病原微生物名录中规定的第一类、第二类病原微生物菌（毒）种或样本。 人间传染的病原微生物名录中第三类病原微生物运输包装分类为A类的病原微生物菌（毒）种或样本。疑似高致病性病原微生物菌（毒）种或样本 。,32,批 准,运输第三条规定
11、的菌（毒）种或样本（以下统称高致病性病原微生物菌（毒）种或样本），应当经省级以上卫生行政部门批准。未经批准，不得运输。,33,申请单位,从事疾病预防控制、医疗、教学、科研、菌（毒）种保藏以及生物制品生产的单位，因工作需要，可以申请运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本。,34,运输申请,申请单位在运输前应当向省级卫生行政部门提出申请，并提交以下申请材料（原件一份，复印件三份）：,35,申请材料,可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输申请表；法人资格证明材料（复印件）；接收高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的单位(以下简称接收单位)同意接收的证明文件； 第七条第（二）、（三）项所要求
12、的证明文件（复印件）；容器或包装材料的批准文号、合格证书（复印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输容器或包装材料承诺书；其它有关资料。,36,接收单位应具备的条件,具有法人资格；具备从事高致病性病原微生物实验活动资格的实验室；取得有关政府主管部门核发的从事高致病性病原微生物实验活动、菌（毒）种或样本保藏、生物制品生产等的批准文件。,37,多次运输申请,在固定的申请单位和接收单位之间多次运输相同品种高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，可以申请多次运输。多次运输的有效期为6个月；期满后需要继续运输的，应当重新提出申请。,38,申请在省、自治区、直辖市行政区域内运输,申请在省、自治区、直
13、辖市行政区域内运输的，由省、自治区、直辖市卫生行政部门审批。省级卫生行政部门应当在5个工作日内做出是否批准的决定；符合法定条件的，颁发可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书;不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。,39,申请跨省、自治区、直辖市运输,申请跨省、自治区、直辖市运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，应当将申请材料提交运输出发地省级卫生行政部门进行初审；对符合要求的，省级卫生行政部门应当在3个工作日内出具初审意见，并将初审意见和申报材料上报卫生部审批。,40,申请跨省、自治区、直辖市运输,卫生部应当自收到申报材料后3个工作日内做出是否批准的决定。符合
14、法定条件的，颁发可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书；不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。,41,突发事件运输申请,对于为控制传染病暴发、流行或者突发公共卫生事件应急处理的运输申请，省级卫生行政部门与卫生部之间可以通过传真的方式进行上报和审批；需要提交有关材料原件的，应当于事后尽快补齐。,42,向中国疾病预防控制中心运送申请,根据疾病控制工作的需要，应当向中国疾病预防控制中心运送高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，向中国疾病预防控制中心直接提出申请，由中国疾病预防控制中心审批；符合法定条件的，颁发可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书；不符合
15、法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由;中国疾病预防控制中心应当将审批情况于3日内报卫生部备案。,43,运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的容器或包装材料应当达到国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则（Doc9284包装说明PI602）规定的A类包装标准，符合防水、防破损、防外泄、耐高温、耐高压的要求，并应当印有卫生部规定的生物危险标签、标识、运输登记表、警告用语和提示用语。,包装要求,44,专人护送,运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本，应当有专人护送，护送人员不得少于两人；申请单位应当对护送人员进行相关的生物安全知识培训；在护送过程中采取相应的防护措施。,45,运输实施,陆路
16、运输：有关单位或者个人不得通过公共电（汽）车和城市铁路运输病原微生物菌（毒）种或者样本（条例第十二条）。水路运输民用航空运输：申请单位应当凭省级以上卫生行政部门或中国疾病预防控制中心核发的可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书到民航等相关部门办理手续。,承运单位凭批准文件运输！,46,运输实施,通过民航运输的，托运人应当按照中国民用航空危险品运输管理规定（CCAR276）和国际民航组织文件危险物品航空安全运输技术细则(Doc9284)的要求，正确进行分类、包装、加标记、贴标签并提交正确填写的危险品航空运输文件，交由民用航空主管部门批准的航空承运人和机场实施运输。如需由未经批准的
17、航空承运人和机场实施运输的，应当经民用航空主管部门批准。,47,生物安全注意事项,高致病性病原微生物菌（毒）种或样本在运输之前的包装以及送达后包装的开启，应当在符合生物安全规定的场所中进行。申请单位在运输前应当仔细检查容器和包装是否符合安全要求，所有容器和包装的标签以及标本登记表是否完整无误，容器放置方向是否正确。,48,运输后续工作,运输管理规定第十六条 在运输结束后，申请单位应当将运输情况向原批准部门书面报告。,49,处罚,对于违反本规定的行为，依照病原微生物实验室生物安全管理条例第六十二条、六十七条的有关规定予以处罚。,50,出入境管理,高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的出入境，按照卫
18、生部和国家质检总局关于加强医用特殊物品出入境管理卫生检疫的通知进行管理。,51,第十九条 本规定自2006年2月1日起施行。,52,样品的包装,感染性物质是那些已知或有理由认为含有致病原的物质。致病原是指能使人或动物感染疾病的微生物（包括病毒、细菌、支原体、衣原体、立克次体、放线菌、真菌和寄生虫等）和其他因子，如朊病毒。国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则中将感染性物质分为A、B 两类。,感染性物质,53,样品的包装,指在运输过程中与之接触能对健康人或动物造成永久性残疾或致命疾病的感染性物质。此处“接触”系指感染性物质离开保护性包装与人或动物的身体接触或经呼吸道吸入的情况。A类感染性物质使
19、人染病或使人和动物都染病者联合国编号为UN2814，其运输专用名称为危害人的感染性物质；仅使动物染病者联合国编号为UN2900，其运输专用名称为仅危害动物的感染性物质。,A类感染性物质,54,样品的包装,不符合列入A类标准的感染性物质。其联合国编号为UN3373。运输专用名称为生命物质B类。,B类感染性物质,55,实验室分级-危害程度分类-感染性物质包装分类,56,样品的包装,卫生部第45号令“可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定 ” 第十二条规定 运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的容器或包装材料应当达到国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则（Doc9284包装说
20、明PI602）规定的A类包装标准，符合防水、防破损、防外泄、耐高温、耐高压的要求，并应当印有卫生部规定的生物危险标签、标识、运输登记表、警告用语和提示用语。,57,样品的包装,这一包装系统可以应用于所有的感染性物质，由以下三层包装组成： 1.主容器：初级容器防水、防渗漏，内装标本。其外包裹有的吸收材料。 样品必须保存于大小合适、带胶垫的外螺旋盖的塑料管中， 拧紧盖、封好管口（如用封口膜或防水的塑料胶带袋）管外要用油性笔注明标本的编号、种类、姓名及采样日期、采集量。,58,样品的包装,2.次级包装：次级包装为第二层持久的、防水、防渗漏的包装，它封闭和保护初级容器。多个包有缓冲材料的初级容器可放于
21、同一个次级包装中，但是，这要求同时也放入足够的吸收材料以确保一旦发生泄漏后所有液体都可被吸收。 标本有关信息填写“送检单”，用一塑料袋密封，并粘在塑料容器外面。,59,样品的包装,3.外层包装：次级包装包裹有合适的缓冲材料后，即可被装入外层运输包装。外层运输包装保护其内容物免受外界影响，如运输过程中的物理损坏。样品的容器要使用能够承受不少于95Kpa压力的高质量的防水包装材料并且密封，以防止运输发生内容物的外泄。,60,样品的包装,感染性物质外包装件上必须做出如下的使用标记：1）托运人名称地址和收货人名称地址。2）运输专用名称：A类感染性物质为：感染性物质；B类感染性物质为：生命物质。3）联合
22、国编号（UN编号）4）运送A、B类感染性物质的净含量： A类感染性物质要标出； B类感染性物质可以不标出。5）标记负责人姓名和联系电话。6）如使用干冰作制冷剂，应标出Dry Ice(干冰)、UN1845 以及干冰的净重。7）生物危险标识。,61,样品的包装,冷冻剂的使用:1)在使用冰、干冰或其他冷冻剂进行冷藏运输时，冷冻剂必须放在辅助容器和外包装之间，内部要有支撑物固定，当冰或干冰消耗以后，仍可以把辅助容器固定在原位置上。如使用冰，外包装必须不透水。如果使用干冰，外包装必须能够排放二氧化碳气体，防止压力增加造成容器破裂。在使用冷冻剂的温度下，主容器和辅助容器必须能保持良好性能，在冷冻剂消耗完以
23、后，仍能承受运输中的温度和压力。,62,样品的包装,冷冻剂的使用:2)当使用液氮对样品进行冷藏时，必须保证主容器和辅助容器能适应极低的温度。此外，还必须符合其他有关液氮的运输要求。3)主容器和辅助容器须在使用制冷剂的温度下，以及在失去制冷后可能出现的温度和压力下保持完好无损。主容器和辅助容器必须在无泄漏的情况下能够承受95kPa的内压，并能保证在40到55的温度范围内不被损坏。,A类感染性物质的包装与标签,63,B类感染性物质的包装与标签,64,A类、B类感染性物质运送外包装的区别,主容器,外包装放置方向标识,高致病性病原微生物危险标签,高致病性病原微生物运输登记表,79,高致病性病原微生物
24、运输登记表,生物危险标识,省内运输审批流程图,运输申请单位,提交申请材料,运输单位省级卫生行政部门,颁发准运证或出具不予批准的决定及理由,5个工作日,核准申请的单位，在运输任务结束后，书面报告运输情况,审批,接到准运证或其传真件后运输,运输审批流程图,运输申请单位,卫生部科教司,中国CDC(实验室管理处),3日内报卫生部,提出申请,备案,运输单位省级卫生行政部门,颁发核发准运证或出具不予批准的决定及理由,核准申请的单位，在运输任务结束后，书面报告运输情况,初审（3个工作日）,审批,具有运输传染性危险品资质的机场,84,结束语合理的样本适宜的时机正确的方法足够的样本量妥善的保存运输是获得可靠实验室检测结果的重要保证,85,
