1、血液学检验,检验教研室马雪莲,2016-1-10,中西医结合学院,血液病离我们远吗,绪 论,概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论血液学（hematology）临床血液学（clinical hematology）临床血液学检验（hematologic laboratory science）,概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论一 血液学（hematology）： 研究对象：血液、造血组织 研究内容：,绪 论,概论二 临床血液学： 研究对象： 血液病（原发、继发）,病因、病机、临床表现、诊疗,绪 论,绪 论,临床科室-血液科,绪 论,概论 临床血液学检验：,手段,基础,对象,绪 论,概论 临床
2、血液学检验：临床血液学实验室,绪 论,发展史 # 血液探索史： 中国 西方 # 血液学研究史-显微镜发明： 一. 血细胞 二. 血栓与止血 三. 造血干细胞 四. 血液学检验发展史,概论,发展史,与检验关系,绪 论,血液探索史,概论,发展史,与检验关系,石器时代-砭石放血病,公元前400年内经-藏神主血脉， 刺络放血,“滴血认亲”,吸血强身,公元前400年希波克拉底,公元500-1500)理发师用柳叶刀放血,16世纪末期-荷兰人制作简易显微镜,1628年哈维提出了血液循环,1674年列文虎克观察血液,1799年开国总统华盛顿-死于放血疗法,1840年-维多利亚女王家族血友病,中国,西方,乔治华
3、盛顿-美国首任总统（17321799）,维多利亚女王（18191901）,哈维-英国科学家（1578-1657）,绪 论,血液探索史我国古代：石器时代-砭石放血治病 公元前400年内经-“藏神”和“主血脉” ,刺络放血 “滴血认亲”西方： 早期曾崇拜，神秘血液-吸血强身 古希腊医圣希波克拉底（公元前460年-前370年）-血在四种体液中占主导地位 中世纪（公元500-1500)理发师用柳叶刀放血 16世纪末期-荷兰人制作简易显微镜， 1628年哈维提出了血液循环 1674年荷兰亚麻商人安东尼凡列文虎克-血液由含有非常小的圆球状物的水晶体般雾状 的水组成，测量了它们的大小 1799年开国总统华盛
4、顿-死于放血疗法，20世纪逐渐淘汰 1840年-维多利亚女王的9子中，3/4男为血友病，5女为携带者-皇室遗传病,概论,发展史,与检验关系,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,16世纪末-简易显微镜-放大几十倍,19世纪-普通光学显微镜-分辨率1微米（放大率极限2000倍） 显微结构,2个世纪,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,电子显微镜-分辨率10nm （放大率上万倍） 超微结构（亚显微结构）,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,纳米显微镜（扫描探针显微镜） 分辨率0.1nm （放大率百万倍） 实现原子水平的观察
5、及操控-纳米生物学,扫描探针示意图,纳米显微镜照片,绪 论,血液研究发展史血细胞发展史16世纪到17世纪-显微镜-红细胞、白细胞及血小板。19世纪-计数法的改善，红细胞来源于骨髓及建立血细胞染色法-形态学阶段。1900年-ABO血型确立-开创输血领域。1945年-Coombs建立抗人球蛋白试验-对免疫血液学做出贡献。1949年-镰状贫血是Hb异常而提出“分子病”-分子水平。,概论,发展史,与检验关系,绪 论,1. 红细胞认识,概论,发展史,与检验关系,血细胞发展史,1871-1876年-发现了红细胞有携氧能力，且参与组织的呼吸作用。 20世纪20年代-红细胞体外保存需葡萄糖，30年代体外保存血
6、液，40年代建立血库 1946年-红细胞寿命120天左右，1959年以后对红细胞糖代谢全面了解。 20世纪80年代-A、B型转化为O型血成功，Rh阳性转换为Rh阴性。,绪 论,一.血细胞发展史2 白细胞认识1892-1930年-白细胞有趋化、吞噬和杀菌作用。1910年-单核细胞为“打扫战场的清道夫”，1976年之后称之为“单核吞噬细胞系统”。1959年-淋巴细胞转化为免疫母细胞并能分裂增殖，浆细胞是B淋巴细胞转化。B淋巴细胞产生抗体，T淋巴细胞产生细胞因子。,概论,发展史,与检验关系,白细胞,单核细胞,淋巴细胞分裂,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史-血细胞发展史 3 血小板认识1842
7、年发现血小板，40年后了解到止血和修复血管作用，1923年发现其粘附和聚集功能。血小板超微结构研究近年发现血小板颗粒,绪 论,概论,发展史,与检验关系,二 血栓与止血的发展史 2000年以前，犹太人记载了血友病20世纪50年代后对凝血机制有了深入了解60年代凝血机制的“瀑布学说”得到公认70年代发现新的凝血与纤溶相关因子80年代开展对纤维连接蛋白等粘附因子的研究90年代至今，完善并拓宽“瀑布学说”，拓宽血栓与止血的研究领域。分子水平研究：对内皮细胞、血小板、凝血和纤溶等在血栓中的作用从分子水平有了更深入的了解。,发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,1896年，Wilson在著作中用到“干
8、细胞”1981年Evans和Martin从小鼠胚囊内细胞团分离出胚胎干细胞,发展史 三 造血干细胞发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史三 造血干细胞发展史 20世纪提出造血干细胞概念， 60年代初，Tills等用致死量射线照射 小鼠进行骨髓移植，发现造血干细胞,1984年，Civin提出表达CD34抗原细胞即造血干细胞。1979年，体外成功培养人造血祖细胞。1990年，造血干细胞移植治疗遗传病、白血病和再障。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史三 造血干细胞发展史,干细胞(stem cell)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。 胚胎干
9、细胞 （ES细胞） 1 根据发育阶段 成体干细胞 存在于成熟个体各组织中的干细胞 2 根据发育潜能 全能干细胞（TSC细胞）：胚胎干细胞 多能干细胞：造血干细胞，神经干细胞 专能干细胞 ：肝脏干细胞，肠上皮干细胞,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史三 造血干细胞发展史,胚胎干细胞是早期胚胎中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,1 胚胎干细胞研究在美国颇具争议,发展史三 造血干细胞发展史,2 美国科学家从成体动物提取成体干细胞，并不能转化成各种器官组
10、织，不能取代胚胎干细胞。3 iPS细胞是将多能遗传基因导入皮肤等细胞中而成。让普通体细胞“初始 化”具备干细胞功能即iPS细胞iPS细胞和ES细胞除了不能生成胚胎以外，可以产生所有细胞，如用于医疗，那么理论上可以治愈所有疾病凡是不好的组织去除，替换为重新生长的正常组织。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,血细胞是造血干细胞增殖和分化的结果。不断生成新细胞替代衰老退变细胞，维持体内各类细胞恒定。,造血干细胞是由胚胎干细胞发展而来，具有高度自我更新和多向分化两个基本特征,发展史三 造血干细胞发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,四 血液学检验的发展史,发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,
11、发展史,四 血液学检验的发展史,1 无染色的血细胞形态学检验时期 （17世纪后期19世纪中期）,1852-1867年，血细胞显微镜计数（包括血细胞吸管、血细胞计数板）,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,2 染色的血细胞形态学检验时期（19世纪中期起),1856年，Erb用某些合成染料染血液1879年，Ehrlich(德国细菌学家欧立希）用纺织染料染色固定血涂片1898年，Ehrlich等报告三酸染色法（橘黄G、甲基绿及酸性品红组成的混合染色液）1891年，Romanowsky（罗曼若夫斯基）用改良的甲基蓝混合染色液鉴定疟原虫，并可区分不同的白细胞1902年, W
12、right,Giemsa改进染色剂Romanowsky型混合物染色剂具有良好的染色效果，直到现在其基本配方仍被广泛使用，这一混合染色剂由甲基蓝、伊红和天青组成，依据染色后细胞的大小、形状及色彩深浅进行鉴别,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,2 染色的血细胞形态学检验时期（19世纪中期起),绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,3 骨髓细胞形态学检验时期（20世纪20年代起）,1903年，Wolff首创骨髓穿刺术，用于动物实验。同年，Pianess应用于人体1929年，Arinkin用改进的简便胸骨穿刺吸引法，在住院病人身上获取胸骨骨髓
13、涂片，为骨髓检查奠定了基础,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,4 骨髓组织学检验时期（20世纪20年代-70年代进入快速发展时期）, 骨髓病理组织学研究与骨髓抽吸物涂片检查几乎同时起步 20世纪70年代起，骨髓活组织工具改良以及新技术应用，特别是不脱钙组织块塑料包埋半薄切片技术的应用，使骨髓病理组织学检查快速发展,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,5 细胞化学染色检验时期（20世纪初起,5070年代为鼎盛时期）,1867年，铁的普鲁士蓝染色法，后被应用于骨髓铁染色1909年，过氧化物酶染色,瑞士吉姆萨染色 铁染色 POX染色,绪
14、论,概论,发展史,与临床关系,发展史,5 细胞化学染色检验时期（20世纪初起,5070年代为鼎盛时期）,1939年，苏丹黑B染色1939年，1955年，中性粒细胞碱性磷酸酶染色1960年，过碘酸雪夫反应1953年1977年，各种酯酶染色,急性粒细胞白血病（M2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色,中性粒细胞碱性磷酸酶染色,正常血细胞PAS染色,1.原始粒细胞，呈弱阳性；2.幼稚粒细胞，呈强阳性；3.中性杆状核粒细胞，呈强阳性,绪 论,概论,发展史,与临床关系,发展史,四 血液学检验的发展史,6 细胞免疫学检验时期（20世纪50年代起，80年代进入快速发展时期）,20世纪40-70年代，免疫荧光标记技
15、术,免疫酶标技术,ELISA技术,20世纪80年代，统一命名白细胞分化抗原（CD）、白血病免疫表型分析,7 细胞遗传学检验时期（20世纪50年代起,80年代进入快速发展时期）,20世纪40年代，肿瘤细胞的染色体理论20世纪50年代，确认人类染色体46条，标志着人类细胞遗传学开始20世纪60年代，慢粒患者的白血病细胞中发现Ph染色体，第一次将染色体异常与特定肿瘤类型联系在一起，是肿瘤细胞遗传学史上里程碑20世纪7080年代，白血病细胞遗传学表型与形态学类型与临床治疗和预后，肿瘤的生物学有关,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,8 分子生物学及基因检验时期（20世纪8
16、0年代起，90年代进入快速发展期）,1983年，BCR-ABL融合基因20世纪90年代，分子血液学时代，应用分子生物学的思维，评估患者预后，个体化治疗等,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,1930年，卡尔兰德斯坦纳(KarlLandsteiner) （美籍奥地利人），发现ABO血型 为输血、器官移植、胎母不相容和亲子鉴定的理论基础。 兰德斯坦纳生日6月14日定 为 “世界献血者日”,The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1930,绪 论,概论,发展史,与检验关系,2. J.E.Murray默里（美国人）和E.D. Thomas托马斯（美国人
17、） -for their discoveries concerning organ and cell transplantation in the treatment of human disease,Joseph E. Murray,E. Donnall Thomas,The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1990,绪 论,概论,发展史,与检验关系,邓家栋 (19062004) 我国血液学创始人之一、著名血液学家、医学教育家；主持建立中国第一个输血及血液学研究所-天津输血及血液研究所；重视医学教育，参与恢复八年制的医学教育。主编邓家栋临床血液学、
18、内科学基础、诊断学基础、临床血液学等。,中国血液学领域内的著名专家,王振义（1924.11.30- ）内科血液学专家，中国工程院院士，法国科学院外籍院士，瑞金医院终身教授。国内血栓与止血专业的开创者之一，其主编的血栓与止血基础与临床在医学上的最主要贡献还有首次利用全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化。,概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论,发展史,与检验关系,陈竺（1953.8- ）1995年至2007年任上海第二医科大学附属瑞金医院上海血液学研究所所长1998年5月起任国家人类基因组南方研究中心主任2000年至2007年任中国科学院副院长2007年6月起任卫生部部长（至2013年3
19、月）2013年3月14日，当选全国人大常委会副委员长,概论,发展史,与检验关系,陈竺在血液学、分子生物学等领域有较高造诣，取得了突破性成果，曾获得法国抗癌联盟卢瓦兹奖、国家科技进步二等奖等多个奖项，是第三世界科学院院士、欧洲科学院外籍院士、美国科学院外籍院士、法国科学院院士 1.上世纪80年代，从分子水平上揭示了全反式维甲酸治疗早幼粒白血病的原理，在国际上填补了白血病研究的空白点 2.在世界上首次阐明三氧化二砷（砒霜）治疗白血病的分子机理,绪 论,概论,发展史,与检验关系,陈赛娟（1951.5.21- ） 遗传学专家。工程院院士，现任上海交大医国家重点实验室主任、瑞金医院血研所执行所长等。主要
20、从事白血病遗传学研究，发现一组新染色体易位的白血病，建成和发展了一整套白血病分子遗传学和分子生物学诊断体系；建立了移植性和转基因白血病动物模型，为从细胞和整体动物水平研究白血病发生的分子机制及白血病诱导分化的机制提供了良好的模型,概论,发展史,与检验关系,绪 论,临床血液学与检验的关系,(一) 血液学与临床,一 血液系统疾病的分类及特点,分类,原发血液病,继发血液病,原发于血液和造血组织的，并以血液学异常为主要表现的疾病，多有其独特的血液学发病机制和临床表现,他器官或组织的病变，通过某些机制累及血液和造血组织而出现血液异常，其转归常取决于原发疾患。,特点 血液病的代表性症状和体征往往缺乏特异性
21、 实验室检查在血液病的诊断中占有突出地位 非血液病可同时合并血液病 继发血液学异常相当多见 血液病常具有非血液病表现的临床特征,研究血液病起点是细胞学水平，因此血液病诊断更依赖实验室检查，从某种意义上说，实验室检查是血液病确诊的关键，所以形成了医学检验与临床血液学的交叉学科临床血液学检验,概论,发展史,与检验关系,绪 论,二 非血病合并血液异常 红细胞增高-氧交换困难的呼吸系统疾病，某些肿瘤，如小脑肿瘤、肾肿瘤 贫血-消化系统疾病、肾功衰竭、肝炎、自身免疫病、肿瘤 白细胞增高-感染，甚至出现类白血病反应 白细胞减少-伤寒杆菌，病毒感染，用化疗药或解热镇痛药 出血-肝疾病、肾功能衰竭,临床血液学
22、与检验的关系,(一)血液学与临床的关系,三 血液病具有非血液病的临床特征,巨幼细胞贫血-神经科、消化科血友病-口腔科、骨科骨髓瘤-肾内科、骨科巨球蛋白血症眼底检查,概论,发展史,与检验关系,绪 论,(二) 血液学检验,临床血液学与检验的关系,一 血检任务 利用血细胞检验技术，对血液疾病进行基础研究和临床诊治， 推动和促进血液学和临床血液学的发展。,二 检验医师责任 1 掌握血液病的诊断及病情监测的实验， 2 具有一定程度血液病的临床知识，对疾病作出诊断的能力 3 适应血液学的发展，建立有关新试验，能从事科研的能力。,概论,发展史,与检验关系,绪 论,本次课小结,血液学临床血液学临床血液学检验,一 血细胞发展史,二 血栓与止血的发展史,三 造血干细胞发展史,四 血液学检验发展史,血液学与临床,血液学检验,掌握,了解,了解,绪 论,小测验：一 选择题1 血液学的主要研究对象（） A 血液病 B 造血干细胞及造血细胞 C 血液及造血组织 D 造血器官 2 下列不属于临床血液学研究内容的是（） A 淋巴细胞的发育分化 B 白血病治疗 C 血管栓塞的病因 D外伤，手术造成的血液异常二 简述哪些非血液系统疾病可以出现血液系统的并发症？,THE END,
