仪器分析新.ppt

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资源描述

1、尿微量清蛋白(MAU) P205 2微球蛋白( 2 MG) P2091微球蛋白( 1 MG) P212 BJP P202 N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG) 溶菌酶 尿淀粉酶(AMY) HCG,目前常见的临床检查模式,参考值,尿流式沉渣检查 /L 尿红细胞数 U-RBC 0-25尿白细胞数 U-WBC 0-30 尿上皮细胞数 U-EC 0-15尿管型数 U-CAST 0-0.7尿细菌数 U-BACT 0-6000 病理管型 U-Path.CAST 0.0小圆上皮细胞 U-SRC 0.0 类酵母样菌 U-YLC 0.0 结晶U-XTAL 0.0红细胞信息 U-RBC info 非溶血红细胞数

2、量 U-Nlysed# 非溶血红细胞百分比 U-Nlysed%,尿干化学检查pH 4.68.0蛋白质 PRO 葡萄糖GLU 酮体KET 尿胆原UBG +胆红素BIL 亚硝酸盐NIT 红细胞ERY 白细胞LEU 比密SG 1.0151.025VitC 0.6mmol,镜检结果红细胞RBC:03/HP 白细胞WBC:05/HP 上皮细胞EC: 少 结晶CRYSTAL: 少管型CAST: 0偶见/LP,尿比重 尿酸碱度 尿白细胞 尿蛋白质 尿亚硝酸盐,尿葡萄糖尿酮体尿胆原尿胆红素尿红细胞,尿液干化学分析,尿液的酸度(PH)比密(SG)蛋白质(PRO)葡萄糖(GLU)酮体(KET)胆红素(BIL)尿胆

3、原(UBG)亚硝酸盐(NIT)白细胞(LEU)红细胞/隐血(Hb)维生素C(Vitc),反应模块,尼龙膜:防止大分子物质对反应的污染;绒制层:包括碘酸盐层和试剂层: 碘酸盐层可以破坏维生素C等干扰物质, 试剂层含有试剂成分,主要与尿液中测定物质发生化学反应,产生颜色变化;吸水层:可使尿液均匀快速的浸入,并能抑制尿液流到相邻的反应区;塑料底层:作支持体。,尼龙膜 碘酸盐层 试剂层 吸水层 塑料底层,空白块:用于消除尿自身颜色在试剂块上产生颜色的干扰。,尿液分析试纸,项目 缩写符号 反应原理酸碱度 pH pH指示剂蛋白质 PRO pH指示剂的蛋白质误差法葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶法隐血 BLD

4、Hb类过氧化物酶法胆红素 BIL 偶氮反应法尿胆原 URO 醛反应法酮体 KET 硝基铁氰化钠法亚硝酸 NIT 亚硝酸盐还原法白细胞 LEU 酯酶法比密 d(SG) 多聚电解质离子解离法抗坏血酸 ASG 吲哚酚法,尿干化学试纸按功能分组,模块组合1:比密、蛋白质、红细胞、 白细胞:与肾脏疾病相关模块组合2:白细胞、红细胞、亚硝酸盐: 与泌尿系感染性疾病有关模块组合3:比密、葡萄糖、酮体: 与内分泌系统疾病有关模块组合4:胆红素、尿胆原: 与肝胆系统疾病有关模块组合5:pH、比密、维生素C: 对干化学实验的影响监测。,按检测项目分 8项:pH、PRO、GLU、KET、 BIL、URO、BLD、N

5、IT9项: 8项 + LEU10项:9项 + SG11项:10项 + VitC12项:11项 + 颜色或透明度,组合型试带,肾病型四联试带:pH、蛋白、隐血、比密糖尿病型五联试带:pH、蛋白、葡萄糖、 酮体、比密肝脏病型二联试带:胆红素、尿胆原,浸渍试带条 将多联试带完全浸入尿液12s,然后立即取出。沥去多余尿液 沿试管壁将试带上多于尿液去尽。检测标本 将试带置于仪器检测槽内,直至仪器自动打印出报告。,尿干化学分析试带及结果判断,各种尿干化学分析仪,一、尿液分析仪仪器检测原理 仪器采用球面积分仪接受双波长反射光,测定试剂带上的颜色变化进行半定量测定。 试剂带上有数个含各种试剂的试剂垫,各自与尿

6、中相应成分进行独立反应,而显示不同颜色,颜色的深浅与尿液中某种成分的含量成比例关系。 试剂带中还有另一个“补偿垫”,作为尿液本底颜色,对有色尿液所产生的误差进行补偿。,测定波长:是被测试剂块的敏感特征波长;参考波长:是被测试剂块的不敏感的波长,用以消除背景光和其它杂散光的影响。 照射光波长的选择由检测项目决定。 亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原的测定波长为550nm;PH、葡萄糖、蛋白质、维生素C、潜血的测定波长为620nm; 参考波长为720nm。,计 算 原 理 R(%):反射率Tm:试剂垫对测定波长的反射强度Ts:试剂垫对参考波长的反射强度Cs:标准垫对参考波长的反射强度 Cm:标准垫对测

7、定波长的反射强度,尿液自动分析仪结构图,CPU,尿液分析仪由:机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。,(二) 光电系统结构图,四、尿液分析仪结构,返回本节目录,尿液试纸条urinary reagent strip,光源,接收器,(二)试带使用注意事项,1.严格按操作说明书要求进行操作;2.试带要在有效期内使用;3.试带从冷藏变成室温前不要打开瓶盖,用后盖紧瓶盖;开过盖的试带瓶不建议放在冷藏温度,可放阴凉、干燥、避光处。4.禁止用手触摸试剂区, 5.不同厂家的同类试纸,其原理、方法、结果不相同,不可混用。,尿干化学方法学评价,优点:操作简便、快速、同时获得多项结果。缺点:影响因素多,必须结合尿

8、理学检查、显微镜 检查,互相验证、综合分析目前国内采用方法: 干化学法LEU、BLD、PRO、NIT四项皆(-),可不镜检。其中任一项出现异常时,则必须镜检。注意事项: 以尿沉渣作为诊断依据或观察疗效时,不宜用干化学过筛(肾脏病、内分泌病、免疫病等) 临床医生要求的;,(三) 试纸分析的假阳性和假阴性,1.尿中含高浓度VC,可使试纸法葡萄糖和隐血结果呈假(一);2.尿蛋白试纸是利用PH指示剂的蛋白质误差原理,白蛋白的反应性最强,球蛋白的反应性弱。3.某些药物(如氯丙嗪、酚噻嗪、吩嗪类药物)可使尿BIL、URO等呈假(+);4.尿PH超过8.0以上,PRO呈假(+);,三、 干化学分析仪的局限性

9、,1.试剂条的因素 2.尿本身的因素:如标本采集不不合 格等 3.操作原因:如仪器的校准、维护、环境温度。 4.皆为定性分析,只能做过筛试验。其次是不能检测尿有形成分,因而不能代替尿沉渣检查。,尿液结果分析:,尿沉渣分析仪,尿沉渣分析仪,尿沉渣分析仪是用显微镜或专用设备对尿液有形成分检查的仪器,摆脱了繁琐和费时的操作程序,做到尿沉渣分析的标准化、自动化。目前使用的尿沉渣分析仪,主要有:图像识别法、流式细胞仪法,以及尿液分析工作站等几种类型。,运用流式细胞术及特殊荧光染色的原理,将尿标本染色后进入鞘液流动池时,每个有形成分单个纵列通过流动池中心轴线,每个粒子均被氩激光光束照射,并各自发出不同的荧

10、光强度(信号)。信号表达为3类:即前向散射光、荧光和电阻抗。,(一)流式细胞式尿沉渣分析仪,流式细胞式尿沉渣分析仪原理,激光束 (=488m),荧光强度fl:,前向散射光强度: 细胞大小,RND、DNA强度,前向散射光脉冲宽度:细胞长度,荧光脉冲宽度(F1w):细胞染色质长度,电阻抗:反映细胞体积,流式细胞式尿沉渣分析仪原理,前向散射光强度(Fsc):细胞大小 前向散射光脉冲宽度(Fscw):细胞长度荧光信号 荧光强度(Fl):细胞染色质(DNA/RNA)的强度 荧光脉冲宽度(Flw):细胞大小电阻抗:反映细胞体积,前向散射光信号,仪器将这种荧光,散射光和电阻抗的信号转变为电信号,综合分析这些

11、电信号,得出细胞大小、长度、染色强度和染色部分长度以及细胞的体积资料,并给出每类细胞的散射图和直方图,并计算出每微升尿中各种细胞的数量进行报告。,UF-100尿沉渣分析系统散点图,细胞大小,细胞长度,荧光脉冲宽度,前向散射光脉冲宽度,UF-100尿沉渣分析系统散点图,细胞大小,染色质强度,前向散射光强度,荧光强度,流式细胞术尿沉渣分析仪检测参数,红细胞(RBC) 均一性红细胞(Isomorphic RBC)% 非均一性红细胞(Dysmorphic RBC)% 非溶血性红细胞数量(Non-Lysed RBC#) 非溶血性红细胞百分比(Non-Lysed RBC%)白细胞(WBC)上皮细胞(EC)

12、、小圆上皮(SRC)管型(CAST),病理管型(Path.CAST)细菌(BACT)酵母细胞(YLC)精子细胞(SPERM)结晶(XTAL)尿液电导率(conductivity),RBCP70 70%红细胞位置 提示:以未溶解的RBC为100%时,70%红细胞的平均体积。NLRBC% 未溶解RBC百分比 提示:完整RBC的百分比(不包含影形RBC,RBC碎片,皱缩红细胞)。,RBC INF 红细胞信息 提示:RBC来源。,Microcytic (不均一小红细胞)? 提示红细胞源于肾小球Normocytic (正常均一红细胞)? 提示红细胞非来源于肾小球Non classified (未分类型)

13、? 提示混合型红细胞细胞 Negative 提示红细胞计数正常,病例1:男,29岁,,尿干化学检查pH 5.0蛋白质 PRO 葡萄糖GLU 酮体KET 尿胆原UBG 胆红素BIL 亚硝酸盐NIT 红细胞ERY +白细胞LEU 比密SG 1.015VitC 0.6mmol,尿流式沉渣检查U-RBC 1440.2 U-WBC 5.9U-EC 1.5 U-CAST 0.13U-BACT 132.6U-Path.CAST 0.0U-SRC 0.0 U-YLC 0.0U-XTAL 171.6 U-RBC info Isomorphic?U-Nlysed# 1431.3 /L U-Nlysed% 99.3

14、%,镜检结果WBC:03/HP RBC:满视野/HP,肾结石,病例2:男,81岁,,镜检结果WBC:满视野/HP RBC:1020/HP EC:28/HP,急性膀胱炎,尿干化学检查pH 7.0蛋白质 PRO +葡萄糖GLU 酮体KET 尿胆原UBG +胆红素BIL 亚硝酸盐NIT +红细胞ERY +白细胞LEU +比密SG 1.010VitC 0.6mmol,尿流式沉渣检查U-RBC 195.9 U-WBC 1509.8U-EC 74.3 U-CAST 1.15U-BACT 1025.0U-Path.CAST 0.2U-SRC 2.0 U-YLC 0.0U-XTAL 7.6 U-RBC inf

15、o Isomorphic?U-Nlysed# 177.9 /L U-Nlysed% 90.8%,病例3.男,25岁,,镜检结果WBC:510/HP RBC:1020/HP EC:满视野/HP 透明管型:满视野/LP 颗粒管型:满视野/LP,肾小球肾炎,尿干化学检查pH 6.5蛋白质 PRO +葡萄糖GLU 酮体KET 尿胆原UBG +胆红素BIL 亚硝酸盐NIT 红细胞ERY +白细胞LEU +比密SG 1.010VitC 8000 /uL WBC 10/uL尿细菌感染可能性大,尿培养阳性率高。ERY + 150/uL N-RBC 50/uL , ERY检测的是Hb,而UF-100检测的是完整

16、的细胞,可能溶血,RBCINF 为Microytic,提示红细胞源于肾小球。LEU + 250/uL N-WBC 50/uL ,LE尿白细胞检测的是粒细胞酯酶,而N-WBC检测的是完整的细胞,影响因素细菌、渗透压等。,颜色透明度SG 1.015PH 6.0LEU + 25/uLNIT neg PRO + 1.0g/LGLU normKET negBIL negUBG normERY + 10/uL,CONDCT 21.1 mS/cmPCASTF 0.3 /uLN-WBC 100/ uLBACT 6500 /uLCAST 0.5 /uLSRC 0.38/uLEC 0.3 /uLN-RBC 200/uLRBC70 78.6NLRBC% 58.4RBCINF MicroyticYLC 450 /uLXTAC,结果分析,ERY + 25/uL N-RBC 200/uL ERY检测的是Hb,而UF-100检测的是微粒(RBC体积大小),类酵母菌、结晶可干扰。LEU + 25/uL N-WBC 100/uL 化学法LE尿白细胞检测的仅仅是粒细胞,而N-WBC还包括淋巴、单核细胞。YLC 为450 /uL提示可能有真菌感染,再见,

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