1、日本神户牛肉（雪花牛肉）,日本神户牛，是当今世界公认的品质最优秀的良种肉牛，市场价格2000/公斤天价。,如何将这种优质的牛快速、大量繁殖呢？ 有哪些方法？,动物体细胞核移植技术进行克隆,体外受精和早期胚胎培养技术 进行试管动物繁殖,一、胚胎移植,1.胚胎移植 P74 将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。,一 胚胎移植,胚胎来源： 雌性动物早期胚胎或体外受精及其他方式得到的胚胎。供体： 提供胚胎的个体。受体： 接受胚胎的个体。,胚胎移植成功的标志：移植的胚胎在供体能正常发育并分娩胚胎移植成功的条件：
2、1）供体、受体为同种生物2）供体、受体的生理状态要相同,胚胎移植需考虑的问题：,1）胚胎移植任何动物子宫都能发育吗？2）为什么能收集到胚胎？3）移植的胚胎与受体会发生免疫排斥吗？ 4）胚胎移植与受体子宫能建立联系吗？供体胚 胎遗传性状会不会改变？,3.胚胎移植的生理学基础,1) 供体和受体需相同的生理环境2) 早期胚胎处于游离状态， 为胚胎收集提供了可能3) 受体对移入子宫的胚胎基本上 不发生免疫排斥4) 胚胎与受体能建立正常的联系, 遗传物质不变,思考与讨论: 1、胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境一致？如，供、受体的发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与在供
3、体内的位置相同或相似吗？,供体和受体进行同期发情处理，使生理条件一致。胚胎移入子宫的位置与供体相同或相似，受体子宫对应的卵巢须有黄体存在。,2、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确吗？,胚胎移植实质：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,3、胚胎移植的基本程序,阅读课文P77图19，思考问题：1:选择怎样性状的供体牛和受体牛？2:为什么要对供体牛和受体牛用激素进行同期 发情处理？3:用什么激素对供体母牛进行超数排卵处理？4:选择配种的公牛要具备什么性状？5:冲卵是指什么？6:产生的胚胎需要进行质量检查，这时胚胎一般 发育到什么阶段？,3、胚胎移
4、植的基本程序,（1）对供体、受体进行选择,供体： 遗传性能和生产性能优秀的个体受体： 健康和具正常繁殖能力的个体处理： 同期发情具体做法： 注射促性腺激素,（2）超数排卵处理具体做法： 注射促性腺激素,（3）配种或人工授精,精子来源： 同种优良的雄性动物,（4）胚胎的收集,配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来。 冲卵是把母牛的卵子冲出来吗？,（5）对胚胎进行质量检查,你知道检查的目的吗？此时胚胎处于什么时期？,检查胚胎的发育状况， 处于桑椹胚或囊胚,（6）胚胎的保存或移植,胚胎保存的条件是什么？,196的液氮中保存 或直接向受体移植,（7）胚胎的移植,方法一：手
5、术法引出子宫，将胚胎注入子宫角，缝合创口。方法二：非手术法将胚胎的移植管送入受体牛子宫，注入胚胎。,（8）对受体母牛进行 是否妊娠的检查,（9）受体母牛产下胚胎移植的犊牛,选择,供体母牛,受体母牛,同期发情处理,超数排卵,供体公牛,配种,冲卵,质量检查、培养,胚胎移植,妊娠检查,分娩（胚胎移植的犊牛）,总结：,【归纳总结】,该过程中两次使用促性腺激素，第一次对受、供体同期发情处理；第二次用于供体的超数排卵。该过程中的两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查；第二次对受体母牛是否妊娠进行检查。产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体牛，性别取决于公牛提供的精子，与受体牛没有关系。冲卵的含义是从子宫中冲出胚
6、胎，而非冲出卵子,课本P75、图3-17“胚胎移植的现状和意义”，思考讨论，总结出胚胎移植的意义。,4、胚胎移植的现状和意义,1) 加速育种工作和品种改良；2) 大量节省购买种畜的费用；3) 一胎多产；4) 保存品种资源和濒危物种；,充分发挥雌性优秀个体的繁殖潜能,D,二、胚胎分割 阅读课本，思考以下问题：（1）胚胎分割的概念（2）胚胎分割特点（3）胚胎分割的理论基础（4）胚胎分割操作过程,1.概念 采用显微手术（机械方法）方法将早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,经体内或体外培养后植入受体，以得到同卵双胎或同卵多胎的技术,2.特点： 后代遗传物质相同 胚胎分割是无性繁殖或克隆方法3、理论基
7、础 动物胚胎细胞的全能性。 胚胎分割的时期： 囊胚或桑椹胚。,4、选择的胚胎： 发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要仪器： 实体显微镜和显微操作仪。6、具体操作 用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。,胚胎分割移植的显微操作,7、操作注意事项： 对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。 原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不
8、能发育等问题。,胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低。早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的。分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低。,8、胚胎分割技术的缺陷（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。,9、胚胎分割技术的应用: 为转基因技术、性别控制技术提供活胚材料。,三.胚胎干细胞,阅读课本，思考以下问题：（1）什么是胚胎干
9、细胞？ 简称是什么？（2）胚胎干细胞的来源。（3）胚胎干细胞的特性。（4）胚胎干细胞的应用。,1.概念： 简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。,2.特点:（1）形态： 体积小.细胞核大,核仁明显；（2）功能： 具有发育的全能性.可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.体外培养可增殖不分化；（3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。,干细胞的分类： （1）全能干细胞 （2）多能干细胞 （3）专能干细胞,3.主要用途 阅读课本相关内容，说说胚胎干细胞有什么具体用途？,（1）治疗人类的某些顽症。 人类由于细胞坏死、退化
10、或功能异常引起的疾病，如帕金森综合症、少年糖尿病和老年痴呆症等，已成为医学上尚未攻克的顽症。利用ES细胞可以诱导分化形成新的组织 细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能。目前，在动物实验方面，用ES细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑难病症。,（2）培育出人造组织器官，用于器官移植 随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，还可以培育出人造组织器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。,（3）ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。 ES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不
11、分化的状态。,诱导因子：诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。,4.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的重要原因是（ ） A.细胞分裂 B.细胞特化 C.细胞分化 D.细胞增殖,C,体细胞核移植的过程,供体体细胞,细胞培养,体细胞,卵巢卵母细胞,MII期卵母细胞,去核,无核卵母细胞,注入,细胞融合,重组细胞,重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,生出与供体遗传物质相同的个体,发育,理论基础：动物细胞核的全能性,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛受精卵,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,良种牛体外受精胚胎,4、胚胎移
12、植的基本程序 阅读课本，说出胚胎移植的基本程序包括哪几个步骤？,供体、受体的选择和同期发情处理,配种或进行人工授精,胚胎的收集、检查、培养或保存,胚胎移植,移植后的检查,完成课本P81页探究1的流程图，并思考问题。,1.应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？在中，为什么用促性腺激素处理供体母牛？在此之前，需要对供体和受体母牛进行同期处理吗？,2.在流程图中，哪一步需要进行冲卵？冲卵是把母牛的卵子冲出来吗？为什么在第7天进行冲卵？,3.对胚胎进行质量检查的目的是什么？此时胚胎处于什么时期？,供体公、母牛：遗传性能优秀的个体；受体母牛：健康和正常繁殖能力的个体。超数排卵，获得较多胚胎。需要。,第步，冲卵是将供体母畜体内的受精卵冲出来。,检查胚胎的发育状况处于桑椹胚或囊胚,
