1、检验科 余素飞,血培养的规范化操作 降低污染，提高阳性率,一、血培养送检的临床重要性二、血培养样本的采集三、血培养样本的运送四、与临床的沟通、常见问题解答五、趣味题,一、血培养的临床重要性,诊断重要性：血培养阳性是评估或确认患者患有感染的重要依据为抗生素敏感试验提供了病原学依据，从而使得抗生素治疗达到优化,预后重要性从预后角度看，分离到具有重要临床意义病原菌的血培养意味着宿主的防御机制，和（或）以往的临床治疗手段不能将原发部位感染的病原菌清除。,二、血培养样本的采集,采集前总体要求血培养的采集程序,血培养的送检指征采集时机采集最佳方案,血液培养的送检指征,症状指征： 发热（38）、皮疹、肝脾肿
2、大、关节疼痛、神志不清、昏迷或休克。,疾病指征： 血液疾病、恶性肿瘤、呼吸道感染、呼吸衰竭、导管介入疾病、血液透析患者、糖尿病、艾滋病、肝脏疾病、长期输液、化脓性病灶或损害、粘膜损伤性疾病。,一般情况：患者出现寒战，体温升高之前。使用抗菌药物之前，应立即采集 血培养。 若病人已服药，应在第二次服药 前采血。,采集时机,采集时机,不明原因发热：例如：隐性脓肿、伤寒热和波浪热先从不同体位采集2-3次血标本间隔大于或等于1h，24-36h后估计体温升高之前再采集2份以上若24h培养结果阴性，应重新采集血标本,采集时机,沙门菌感染患者血培养采集： 根据不同的病程、病原体存在部位不同，发病早期（第1-2
3、周）采集血液标本可获得80%-90%的阳性率，之后血培养阳性率也将下降。,采集时机,急性心内膜炎或亚急性细菌性心内膜炎血培养采集： 怀疑急性心内膜炎时，应在抗生素治疗前 1-2h内分别从3个不同部位，间隔15min ，采集3份标本，分别进行培养。,怀疑亚急性细菌性心内膜炎时，应在抗生素治疗前1-2h内分别在3个不同部位采集血标本进行培养，间隔15min ，若24h培养阴性，重新采集2-3份或更多标本送检。,认清各种类型的血培养瓶,标准需气瓶和厌气瓶优良的品质经济 可加入 10 ml 血液或体液标本,FAN 需氧/厌氧中和抗生素瓶中和抗生素能力（活化碳粉）培养基营养成份更丰富最多可容纳10ml血
4、液/体液标本,小儿需氧瓶可中和抗生素可加入 4 ml 血液标本,血培养标本在接种前注意事项？,所有培养瓶必须检查有无变色或浑浊按一人一瓶一带原则，严禁多个患者同时采样，以防张冠李戴注意培养瓶的有效期，不能过期培养用75%酒精消毒瓶盖，不能用碘酒,采集最佳方案,“How many blood culture sets do I need to draw?”应该采几份血液标本?,采血份数 NUMBER OF SETS,Weinstein MP, Reller LB, Murphy JR, and Lichtenstein KA Rev Inf Dis 5:35, 1983,Cockerill, C
5、ID 2004,表皮葡萄球菌的临床意义分析,需要抽取多少份血培养样本？,答案:每位患者采血最少2份，每份包含需氧跟厌氧（小儿除外）注意：一次穿刺采血，算“一份”。,标本须间隔多久采集?,答案： 1. 每份标本应在5分钟内采集完成,因为体内巨细胞吞噬系统会在15 30分钟内清除掉进入人体内的细菌.2. 怀疑亚急性心内膜炎患者每间隔一个小时采集一份,共采集3份标本.,我们应该采集多少血液呢?,采血量与检出率的关系,Overall/Mayo,答案:1、采血量是影响灵敏度最关键因素。2、一份标本2个瓶子,最少要10ml,最好采20ml,分别注入2个瓶内。2份4个瓶子,最少20ml，最好40ml。3、婴
6、幼儿1-2ml，儿童3-5ml。,如何区分污染？ 感染？,体表定植的正常微生物群与临床检出的主要致病菌,1.翁心华等.现代感染病学.上海医科大学出版社.1998年第一版：23-292.汪复等. 中国感染与化疗杂志. 2010;10(5):325-334.,大多数临床检出的主要致病菌同时也是人体体表定植的正常菌群，因此，临床报告的细菌检出可能包含了人体定植的细菌！,检测非培养的感染性指标,WBC计数各种病原体的抗原或抗体检测CRP定量内毒素定量降钙素原（PCT）其他,血培养的采集程序,皮肤消毒培养瓶消毒静脉穿刺和接种,培养瓶消毒,75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞， 作用60s;用无菌纱布或无菌棉 签
7、清除橡皮塞子表面残余酒精； 注意不能用碘酒消毒。,皮肤消毒,75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上;1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，从穿刺点向外画圈消毒,区域直径3cm以上。75%酒精脱碘。对碘过敏的患者,用75%酒精消毒60s，待酒精挥发后采血,对酒精过敏者可用1%新洁尔灭消毒。,静脉穿刺和培养瓶接种,在穿刺前或穿刺 期间为防止静脉 滑动，可戴乳胶 手套固定静脉；用注射器无菌穿刺取血后， 直接注入血培养瓶 （勿换针头、先注入厌氧血瓶后 注入需氧血瓶）;血培养标本接种到血培养瓶后轻轻 颠倒混匀以防血液凝固，立即送检。,三、血培养样本的运送,注入标本后的血培养瓶应立即送检。常
8、规运送时间2小时。若天气寒冷应注意保暖。,血液标本采集后不能立即送检怎么办？,血液标本采集后的血培养瓶如果不能及时送检，需室温保存或置35-37孵箱中，切勿冷藏！因为有些苛养菌如肺炎双球菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等遇冷很容易死亡。,四、加强与临床的沟通,1、临床抗感染治疗与实验室结果不符可能原因,检测到的微生物为非病原菌细菌存在有隐性的耐药机制非常规培养能检测的感染性病原体,临床的抱怨（常见）的解答,临床问题（常见）的解答,2、如何解答临床医师提出的问题？ 能否给我加做一些抗菌物的药敏 检测？ 能否分析一下分离到的细菌是污 染菌还是致病菌？,1、能否给我加做一些抗菌药物的药敏检测？,如何回答
9、？视所要加的抗菌药物来定加的理由，不加的理由说明A、是否有CLSI的解释标准B、是否已有了指导性菌物在报告中C、是否有标准的药物纸片.,2、能否分析一下分离到的细菌是污染菌还是致病菌？,分析分离菌株的来源分析病人的状况：检测非培养的感染性指标 记住任何所谓的正常寄驻菌都有可能成为 病原菌！,如何突现血培养的临床价值？,三级报告一级报告： 阳性结果，立即口头报告，主要包括革兰 染色特性和形态.二级报告： 报告直接抗菌药物敏感试验结果和细菌种属的初步鉴定结果.三级报告最终结果（书面）报告 阳性培养结果（最终鉴定结果、最终药敏结果） 培养5日报告无菌生长,培养结果（48h阳性） ：表皮葡萄球菌,患者：男，15岁 临床诊断：肺炎 （T38.5） 标本：左侧静脉血液（单瓶）,趣味问题2,1.此检测结果可信吗？2.如果可信选用什么药物？如果不可信请说明理由！,Thank You !,检验前样本的正确操作,正确的样本处理程序提高微生物学的检验质量,细菌隐性的耐药机制及多元性,隐性耐药机制： 低水平表达的耐药基因存在等耐药机制的多元性： -内酰胺类 可能同时有ESBLs、AmpC、碳青霉烯类酶；膜通透、外排泵及靶位改变喹诺酮类与氨基糖苷类 膜通透、外排泵、靶位改变、钝化酶等,
