1、,Chapter 4,血液分析仪检验,黄 辉13594135402 ,血液分析仪,采用血液分析仪对某标本进行检测，得到如下结果：RBC 3.81012/L；WBC 10.8109/L，HB 102g/L，PLT 32109/L，GRAN 42%, LYM 25%, MID 33%，请问：,病例分析,1.该检验结果可以直接发出吗？ 2.如果不能发出，应对标本进行如何处理？,一、血液分析仪概述,1948年提出Coulter原理,1953年第一台血液分析仪,1975年血小板计数功能,1985年白细胞分类,一、血液分析仪概述,一、血液分析仪概述,一、血液分析仪概述,血液分析仪分类,三分群血液分析仪,五
2、分类血液分析仪,血液分析仪功能,一、血液分析仪概述,一、血液分析仪概述,血液分析仪功能,一、血液分析仪概述,检测参数增多多功能扩展检测速度提高应用更加方便,一、血液分析仪概述,血液分析仪发展趋势,库尔特原理：悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液为非导电颗粒，在通过计数小孔时可引起电阻的变化，从而实现对细胞计数和分群。分光光度原理：测定血红蛋白。,二、电阻抗型血液分析仪,principle of electrical impedance,Coulter principle,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,检测原理,Coulter principle,二、电阻抗型血液分析仪,检测原理,二
3、、三分群血液分析仪工作原理及应用,Coulter principle,二、电阻抗型血液分析仪,检测原理,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,如何设计血液分析仪工作流程，在设计过程中我们应该注意哪些问题？,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,血液标本,1:50000,1:500,RBC/PLT,WBCHb,PLT,330fl,30fl,RBC,PDWMPVPCT,RDWMCVHct,溶血剂,Hb,Hb量,MCH,MCHC,WBC,大细胞区,中间细胞区,小细胞区,脉冲,脉冲,这种工作流程设计还存在什么问题？,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,血细胞直方图,横坐标：细胞的相对体积 或者溶血素作用
4、后细胞的相对体积；纵坐标：细胞的相对数目。,白细胞直方图、红细胞直方图、血小板直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,小细胞区：淋巴细胞 大细胞区：中性粒细胞中间细胞区：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞,二、电阻抗型血液分析仪,正常白细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,小细胞区：淋巴细胞 大细胞区：中性粒细胞中间细胞区：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、幼稚细胞,二、电阻抗型血液分析仪,正常白细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,中间细胞区域出现异常的峰，可能是由于白血病细胞或者嗜酸性粒细胞引起，应加强镜检,二、电阻抗型血液分析仪,异常白细胞直方图,二、三分群
5、血液分析仪工作原理及应用,淋巴细胞减少，中性粒细胞增多,异常白细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,淋巴细胞增多，中性粒细胞减少,异常白细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,巨大血小板干扰白细胞直方图,异常白细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,正常红细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,红细胞体积增大且大小不均,异常红细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,此峰是由于治疗得当引起的,病人出现巨幼细胞性贫血时，MCV较大形成右移的RBC峰,二、电阻抗型血液分析仪,异常红细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,由PLT结果较高引起,由WBC
6、计数较高引起,二、电阻抗型血液分析仪,异常红细胞直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,病例分析,某战士，男，头昏乏力半年有余。体检：贫血貌、反甲症。检验：Hb 86g/L，红细胞直方图如下所示，粪便有钩虫卵。该战士最可能的诊断血常规中哪些参数对 诊断该疾病有重要意义需要进行的进一步实验 室检查,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,正常血小板直方图,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,异常血小板直方图,血小板体积增大,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,血红蛋白测定,分光光度法测定：Lambert-Beer定律仪器组成：单色光源、检测池、比色容器和光检测器常用的溶血剂：改良的氰化高铁血红蛋
7、白溶血剂、非氰化高铁血红蛋白溶血剂(SLS-月桂酰硫酸钠),二、三分群血液分析仪工作原理及应用,检测结果超出实验室设定的检测项目参考值、复检标准、临床疾病标本异常和患者人群变异报警意味着检测结果直接向临床报告的可靠性明显降低,血液分析仪报警,二、三分群血液分析仪工作原理及应用,白细胞,有核红细胞,网织红细胞,三、血液分析仪研究进展,白细胞检测研究进展,体积电导和光散射法流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法钨光源、激光散射法多角度偏振光散射法,三、血液分析仪研究进展,体积电导和光散射法,体积：Volume，应用电阻抗测定细胞体积；电导：Conductivity，高频电流能通过细胞膜，测定细胞
8、的导电性，提供细胞内部化学成分、核质比与颗粒的大小数量等特征；光散射：Scatter，应用光散射技术检测细胞内的颗粒性、核分叶性和细胞表面结构。,三、血液分析仪研究进展,射频电导检测技术,体积电导和光散射法,三、血液分析仪研究进展,光散射检测技术,体积电导和光散射法,三、血液分析仪研究进展,光散射检测技术,体积电导和光散射法,三、血液分析仪研究进展,体积电导和光散射法,三、血液分析仪研究进展,核酸荧光染料使细胞核着色；碱性溶血剂破坏其他细胞，保留嗜碱性粒细胞；用硫化氨基酸检测未成熟粒细胞信息。,流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法,三、血液分析仪研究进展,流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞
9、染色法,三、血液分析仪研究进展,过氧化物酶染色，嗜酸性粒细胞最强，淋巴细胞和嗜碱性粒细胞无过氧化物酶活性；含苯二酸和强酸性表面活性剂稀释液破坏红细胞与血小板，除嗜碱性粒细胞外，其他所有白细胞仅剩裸核。,钨光源、激光散射法,三、血液分析仪研究进展,POX散点图 1.噪声 2.有核红细胞 3.血小板 4.淋巴与嗜碱性粒细胞 5.大的为染色细胞 6.单核细胞 7.中性粒细胞 8.嗜酸性粒细胞,钨光源、激光散射法,三、血液分析仪研究进展,应用固体激光流式细胞荧光检测技术，多角度检测白细胞和分类；染料碘化丙啶破坏有核红细胞膜和细胞质，只留下细胞核，而对有活性的白细胞有极小渗透性或无渗透性，从而不出现细胞
10、核染色。,多角度偏振光散射法,三、血液分析仪研究进展,多角度偏振光散射法,0 细胞大小 和数量7 细胞内部结构、核染色质的复杂性90 细胞内部颗粒及分叶状况90D 嗜酸性粒细胞可去偏振光,三、血液分析仪研究进展,多角度偏振光散射法,三、血液分析仪研究进展,多角度偏振光散射法,三、血液分析仪研究进展,网织红细胞研究进展,非荧光染料染色法：新亚甲蓝、绿唑黑E。荧光染料染色法：非对称箐、噻唑橙、聚亚甲蓝等。,三、血液分析仪研究进展,网织红细胞研究进展,Ret%、Ret #MRV、MCVrHFR、MFR、LFR,三、血液分析仪研究进展,有核红细胞研究进展,VCS法流式激光/荧光染色法,三、血液分析仪研
11、究进展,精密度高、相对准确度好工作效率：快管理自动化程度：强质量管理即时化、信息处理自动化,五、血液分析仪的性能评价,血液分析仪优点,四、血液分析仪优缺点及性能评价,血液分析仪对白细胞分类是建立在体积大小和细胞表面或内部结构的光学性能上，与传统显微镜检查识别不同。血液分析仪只能主要用作健康筛检，尚不能完全代替显微镜检查！,血液分析仪缺点,四、血液分析仪优缺点及性能评价,性能评价,稀释效应：稀释度和变量之间的线性范围精密度：批内、批间精密度和总精密度携带污染率,四、血液分析仪优缺点及性能评价,可比性：仪器检测结果与使用常规程序检测结果达到一致性的能力准确性：测定值与真值之间的一致性仪器对异常标本和干扰物的灵敏度,性能评价,四、血液分析仪优缺点及性能评价,2002年，Berend Houwen发起研究关于血液分析仪全血细胞计数和白细胞分类的显微镜复检规则。2005年，国际血液学组织提出了显微镜复检的41条建议性标准。,五、血液分析仪显微镜复查规则,WBC PDW RBC PCT HGB HDWHCT RETMCV HFRMCH MFRMCHC LFRRDW MPV PLT,血液分析仪常用的检测指标,Thanks!,
