1、疑难血型浅析,佛山市第一人民医院输血科 蔡葵,主要内容,常见结果解析 吸收放散试验 疑难案例分析,2,常见血型检测疑难结果,血型结果与历史结果不符合ABO正反血型结果不吻合（常见）Rh血型反应弱混合视野,导致疑难的因素,技术因素不规则抗体疾病因素亚型其它,1.主观技术因素：,(1) 试剂贮存不当(2) 使用技术错误(3) 使用错误的试剂(4) 使用污染或失效的试剂(5) 离心速度不当,2.存在IgM性质的自家冷抗体,由于冷抗体而导致自身溶血的病人，在低于37时血细胞自发凝集，影响正反定型。可用DTT（二硫苏糖醇）或2-ME （二巯基乙醇 ）来处理细胞及血清来解除此种IgM抗体引起的干扰。血清的
2、反定型可在37进行，用O型红细胞作为对照。,3.抗原表达弱或缺失：,部分白血病引起A、B抗原表达太弱：由于A、B抗原表达太弱，与抗-A或抗-B不反应，但确实存在A或B抗原，因此血清中无相应的抗体；亚型。,4.高水平可溶性血型物质的病人：,极少数有卵巢囊肿的妇女，由于含高浓度的可溶性血型物质，使抗原减弱或消失，此血型物质分泌进入血液可以中和抗-A或抗-B。当使用未洗涤的RBC用于ABO 定型时，血型物质就会中和抗-A或抗-B，引起假阴性反应。,5.混合视野：,来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样 骨髓移植后不久 Tn或A3型红细胞,可引起血清学问题的一些临床疾病,表现 生理及疾病情况A/B抗
3、原表达减弱 部分白血病溶血 阵发性睡眠性血红蛋白尿、 红细胞酶缺乏温性自身抗体 癌症、低血糖脑病冷性自身抗体 冷凝集素疾病、淋巴瘤、 梅毒、病毒感染串钱状凝集 多发性骨髓瘤ABO同种抗体缺乏或减弱 低（无）丙种球蛋白血症免疫性ABO抗体 新生儿、妊娠ABO同种抗体的缺乏或减弱 新生儿，70岁老年人ABO异常* 分泌腺卵巢囊肿获得性B抗原* 细菌感染、结肠癌、肠梗阻,药物的使用与血型血清学疑难问题,表现 药物假凝集 血浆扩张剂串钱状凝集 右旋糖酐混合外观红细胞 输异型红细胞、骨髓移植获得额外抗原 同上DAT阳性 输注/注射免疫球蛋白意外的同种抗体 输注含同种抗体的血浆、 输注过免疫球蛋白 以往输
4、红细胞免疫意外的ABO同种抗体 输注冷沉淀、 因子浓缩剂、血小板,解决ABO正反血型不合的基本原则,12,重复试验、红细胞洗涤后再测检查技术或抄写、甚至抽血环节是否存在错误需要考虑弱反应检查抗体筛查的结果检查病人的年龄检查临床诊断（疾病和用药因素）,弱反应包括抗体减弱与抗原减弱,加大待检血清量与抗体减弱 Ac, Bc, Oc, 自身血球对照 4反应5分钟 抗原减弱 吸收放散试验,常见结果解析吸收放散试验疑难案例分析,15,吸收试验,放散试验,试 验 原 理试 剂操 作 步 骤注 意 事 项临 床 应 用,加热放散法（ABO血型系统）,乙醚放散法（Rh血型系统）,试 验 原 理操 作 步 骤注
5、意 事 项临 床 应 用,吸收放散实验,吸收试验原理,待检红细胞,抗A或抗B血清,4超过4小时,热放散试验实验原理,待检红细胞,经过吸收的红细胞,物理条件的改变（加热）,抗体,红细胞,试 剂红细胞,通过判定抗体性质鉴定待检红细胞上抗原的型别,放散,凝集或致敏,4生理盐水洗涤,试剂,抗A及抗B分型血清。2%A型及B型红细胞。受检红细胞。,操作步骤,1、吸收试验： 取受检红细胞用生理盐水洗涤3次，末次洗涤后将盐水倒尽，取压实红细胞1份，与等量抗A血清混合，另取1份与等量抗B血清混合，置4冰箱超过4小时，每30分钟摇动试管1次（红细胞充分吸收抗体。,离心去掉上清液，以4C冷盐水洗涤红细胞34次，倾去
6、洗涤液，留取压实红细胞。用1/2容积的生理盐水, 置56C水浴10分钟，每隔15秒振摇1次，使吸附在红细胞上的抗体充分放散。,2 、热放散试验,立刻以3000rpm离心，离心式套管内放温水，使温度尽量保持在56，分离得到的上清液即为放散液。将放散液用2%A型和B型试剂红细胞鉴定抗体，即可检出受检红细胞的血型。,结果判定,怀疑A抗原减弱 ：用标准A球与放散液反应，判定受检红细胞是否含有A抗原。怀疑B抗原减弱：用标准B球与放散液反应，判定受检红细胞是否含有B抗原。,1、为了获得最大量的抗体，应加大吸收血清量。2、放散时，应严格注意温度和时间。温度过高红细胞易溶解；温度过低，抗体从红细胞上放散不完全。,注意事项,3、放散液中抗体易变性，故应立即进行鉴定。若需保存，应将抗体放散于AB血清或牛白蛋白溶液中。,临床应用,热放散法常用于ABO血型正反定型不符，ABO亚型的鉴定，全凝集或多凝集红细胞的定型，以及新生儿溶血病的诊断等。,常见结果解析吸收放散试验疑难案例分析,27,血型检测疑难案例,28,谢 谢 ！,
