1、幽门螺杆菌与膜性肾病,潍坊市益都中心医院武文斌,,0536-3275625,一、幽门螺杆菌的发现,幽门螺杆菌（Helicobacter pylori Hp）于1893年由Bizzozero在狗的胃腺和壁细胞内发现。1982年被澳大利亚皇家朴茨医院的病理科医师Warton和当时的实习医师arshall在第37次培养时取得成功.,二、HP的微生物学特征,Hp形态为单极、末端钝圆、多鞭毛、革兰染色阴性的螺旋形弯曲细菌，菌体长 24um,宽0.5 1.0um，有12个微小弯曲。,Hp主要存在于胃粘膜上皮表面和胃黏液层，通常在膜上皮表面、黏液层下面、胃小凹内及腺腔内，呈不均匀的集团状分布，此时细菌形态为
2、典型的弧形或螺旋状存在于扁桃体中的Hp形态为球状，且不可培养.,三、幽门螺杆菌的致病机制,HP的尿素酶极为丰富，约含菌体蛋白的15%尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存。 Hp存在许多菌种变异，这些菌种变异决定了细菌的毒力和致病性有VacA基因和CagA基因，分别编码空泡毒素和细胞毒素相关蛋白。据基因的表达HP菌株分为型含有agA和VacA基因并表达两种蛋白，型不含CagA基因,不表达两种蛋白，尚有一些为中间表达型，即表达其中一种毒力因子。型与胃疾病关系较为密切 .,HP感染途径,使HP穿透粘液层在胃上皮细胞表面定居的因素对胃上皮细胞等起破坏作用的毒素因子各种炎症细胞及炎症介
3、质免疫反应物质,四、幽门螺杆菌感染的诊断,侵入性试验: 通过内窥镜获取胃黏膜组织作为试验材料,进行微生物学培养、组织学检测、 快速尿酶试验和基因诊断等; 非侵入性试验: 不需获得胃黏膜组织, 采用胃液、血清、 唾液、 粪便等标本, 方法有粪便幽门螺旋杆菌抗原检测、血清中幽门螺旋杆菌抗体检测、尿素呼气试验和粪便及其他标本中幽门螺旋杆菌基因的测定。,尿素呼吸试验,尿素呼吸试验是让患者口服同位素标记的尿素, 以观察胃中幽门螺旋杆菌分解尿素的能力, 籍此判断患者是否感染了幽门螺旋杆菌及其感染程度的一类试验。具有较高的敏感性和特异性，是对全胃Hp感染情况的检测，可克服细菌“灶性”分布的差异，检测阳性可确
4、认现证感染，亦可用于根除治疗后判断治疗效果,血清学检测,HP菌体表面存在的鞭毛以及分泌的多种抗原组分均可激发宿主的免疫应答诱导抗体产生, 检测血清中特异性抗体可反映病原体的感染情况。抗体主要为 IgG 和 IgA , 而 IgM极为少见。Hp感染约13个月后才能产生抗体，并且Hp感染根除后体内抗体也要持续一段时间才能消失。,五、消化系统的关系,HP感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织、淋巴瘤以及胃癌这四种胃肠道疾病的关系已经得到了确认 1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构（WHO/IARC） 将幽门螺杆菌定为类致癌原。,六、胃肠道外疾病,1994年Mendall首次报道与冠心病的
5、发生有关。1999年Vaillan报道特发性血小板减少性紫癜患者根除治疗后血小板水平增加到正常 。1997年Machet L报道过敏性紫癜的男子在治疗HP后痊愈的病例。1993年Figura报道干燥综合征在根除HP后,临床症状和实验室检查均消失。,七、与肾脏病的关系,1997年Nagashima对膜性肾病患者的肾穿刺活检标本是否存在幽门螺杆菌抗原进行了研究,多数膜性肾病标本沿肾小球毛细血管壁有多克隆抗HP抗体阳性反应.作者的结论是HP可能参与了膜性肾病的发生,该过程牵涉的抗原是HP类抗原还是HP循环抗原仍不清楚,16 例MN患者11例抗HP多克隆抗体阳性,沿肾小球毛细血管壁颗粒状沉积(胰蛋白酶
6、预处理) 3个单克隆抗体无阳性染色，其中两个是特异的20-kDa的（CP15）和80-kDa的（1G6）多糖类抗原决定簇组成部分。排除了非特异性抗原,3个发病机理。4. 11例肾小球抗HP多克隆抗体阳性的患者7例胃组织或血清抗体阳性。5.幽门螺杆菌感染可能涉及膜性肾病的发病机制,1999年Toshiro Sugimoto报告了一例特发性膜性肾病患者根除胃HP感染后蛋白尿显著降低的病例，且随访1年,其尿蛋白无明显升高。,八、课题的研究,根除幽门螺杆菌治疗对伴幽门螺杆菌感染的膜性肾病患者尿蛋白影响的研究 目的了解HP感染率在MN患者与健康者之间有无差异；了解产细胞毒素相关蛋白（Cag-A）的Hp菌
7、株感染率在MN患者与健康体检者之间有无差异；了解Hp感染的MN患者行Hp根除性治疗前及治疗后尿总蛋白/肌酐比值有无变化；对MN患者的肾脏病理组织进行免疫组织化学标记以了解Hp抗原在MN的病因学意义。,方法,选择86例MN患者作为肾病组，86例健康体检者作为对照组。 14C-尿素呼气试验（14C-UBT）分别检测两组Hp的阳性率。酶联免疫吸附法（ELISA）：分别检测两组血清Hp IgG抗体阳性率分别检测两组Hp IgG抗体阳性者的Cag-A-IgG抗体阳性率。,对肾病组14C-UBT 检测为Hp 感染阳性的患者行根除Hp治疗.治疗方法：口服雷贝拉唑 10mg 每日一次；替硝唑 1.0g 每日两
8、次；阿莫西林1.0g ,每日两次；14天为一疗程。根除Hp治疗4周后复查14C-UBT，观察治疗后转阴情况。,按14C-UBT 检测结果将肾病组患者分为 Hp（+）Cag-A IgG（+）组、Hp（+） Cag-A IgG（-）组和Hp（-）组，测定3组患者治疗前及2周后、6周后PCR。对肾病组肾活检病理组织行Hp多克隆抗体免疫组织化学标记,肾病组（86）,健康组（86）,HP+,HP-,HP+,HP-,Cag-A+,Cag-A-,Cag-A+,Cag-A-,结果,1.两组间基本资料比较（见表1） 表1 两组间基本资料比较与对照组相比ap0.05,2.两组Hp感染阳性率比较（见表2、表3）,表
9、2 14C-UBT两组Hp感染阳性率比较,与对照组比较ap0.05,表3 ELISA法两组Hp感染阳性率比较,与对照组比较，ap0.05,3.两组Hp 感染者中Cag-A IgG阳性率的比较（见表4）,与对照组比较，ap0.01,4.肾病组各组间治疗前后尿蛋白指标比较（见表5）,与治疗前比较，ap0.01; 与Hp(+)Cag-A IgG(+)组比较，bp0.05, cp0.01。,5. 肾病组肾组织Hp抗体免疫组织化学标记结果（见图1）,图1,肾病组肾组织Hp抗体免疫组织化学标记有 13例显示阳性，且均为 Cag-A IgG抗体阳 性的患者。Hp免疫组化可见上皮下和/或系膜区有Hp沉积。,结论,Hp感染可能与MN存在联系，且与产细胞毒相关蛋白的Hp关系更为密切在Hp感染阳性的MN患者，根除Hp的治疗可使尿蛋白排泄较治疗前减少Hp可能是部分MN的致病抗原在MN患者基底膜检测到的可能是Hp类抗原Hp与MN的关系还需大量试验进一步研究和证实,谢谢,
