1、 本科毕业论文 （ 20 届） 食品科学与工程 荷叶中不同提取物抑菌活性研究 i 摘 要 本文研究了荷叶不同提取物的抑菌作用。实验中对荷叶的乙醇提取物进行有机溶剂分级萃取得到石油醚相，乙酸乙酯相，正丁醇相及剩余相，分别对其进行抑菌试验，结果显示 抑菌效果从强到弱为：正丁醇相 乙酸乙醋相 提取相 石油醚相 剩余相。继而对正丁醇相做最低抑菌浓度（ MIC）的测定，结果显示为：金黄色葡萄球菌（ Staphylococcus aureus） 0.510-2g/ml， 大肠杆菌（ E. coli）0.2510-2g/ml， 枯草芽孢杆菌 （ Bacillus subtilis） 0.510-2g/ml。
2、 本文又对荷叶不同提取物中的化学成分进行了初步的分析，测定了其中的黄酮类化合物的含量。结果显示： 正丁醇相 0.032mg/ml，乙酸乙酯相 0.022mg/ml，提取相 0.018mg/ml，石油醚相 0.011mg/ml，剩余相 0.005mg/ml。 荷叶不同提取物的抑菌性能与其所含的黄酮类化合物的含量有一定的正相关性。黄酮类化合物的含量越高，抑菌性能越好。 关键词 : 荷叶；抑菌活性；分级萃取；微生物；黄酮；最低抑菌浓度 ii ABSTRACT The article studied the antibacterial activity of different lotus leaf
3、extracts. In the experiment, five fractions of the ethanol extract of the lotus leaf by petroleum ether, ethyl acetate, butanol and the remaining phases were investigated respectively.The antibacterial test results showed that inhibitory effects from strong to weak was butanol phase ethyl acetate ph
4、ase extraction and concentration phase petroleum ether remaining phase. The minimum inhibitory concentration (MIC) of butanol fraction was determined.The results showed as follow:（ Staphylococcus aureus） 0.510-3g/ml,（ E. coli） 0.2510-2g/ml,（ Bacillus subtilis） 0.510-2g/ml。 This article also studied
5、the chemical composition of different lotus leaf extracts, which determined the content of flavonoids. The results showed: butanol phase 0.032mg/ml, ethyl acetate 0.022mg/ml, extraction phase 0.018mg/ml, petroleum ether 0.011mg/ml, the remaining phase 0.005mg/ml. Lotus antibacterial activity had pos
6、itive correlation with flavonoids content in fractions. Key words: Lotus leaf;The antibacterial activity;Rating extraction;Microorganism;Flavonoids;Minimum inhibitory concentration i 目 录 1 前言 . 1 2 实验主要仪器与材料 . 2 2.1 仪器与材料 . 3 2.2 供试菌种 . 4 2.3 培养基 . 5 2.4 主要试剂 . 6 3 实验方法 . 7 3.1 待测样品的制备 . 8 3.1.1 荷叶提
7、取液的制备 . 9 3.1.2 萃取与 浓缩 . 10 3.2 抑菌活性试验 . 11 3.2.1 供试菌种的制备 . 12 3.2.2 菌悬液的制备 . 13 3.2.3 标准曲线 的制作 . 14 3.2.4 样品黄酮含量测定 . 15 3.2.5 抑菌活性研究 滤纸片扩散法 . 16 3.2.6 正丁醇相最低抑菌浓度 (MIC)的测定 . 17 4 结果与分析 . 18 4.1 抑菌效果图 . 19 4.2 抑菌圈直径 . 20 4.3 标准曲线 . 21 4.4 各提取物黄酮含量 . 22 4.5 最低抑菌浓度 (MIC) . 23 5 结论 . 24 参考文献 . 25 1 1 前言
8、 荷叶 (拼音 )Heye，（英） FOLIUM NELUMBINIS，睡莲科植物莲 Nelumbo nucifera Gaertn 的叶。夏、秋二季采收，晒至七、八成干时，除去叶柄，折成半圆形或折扇形，干燥。中国药典 2005 版 1指明荷叶性状：呈半圆形或折扇形，展开后呈类圆形，全缘或稍呈波状，直径 20 50cm。上表 面深绿色或黄绿色，较粗糙；下表面淡灰棕色，较光滑，有粗脉 21 22 条，自中心向四周射出 ，中心有突起的叶柄残基。质脆，易破碎。稍有清香气，味微苦。荷叶粉末灰绿色。上表皮细胞多角形，外壁乳头状或短绒毛状突起；气孔不定式，副卫细胞 5 8个。下表皮细胞垂周壁略波状弯曲，有
9、时可见连珠状增厚。草酸钙簇晶多见，直径约至 40m。性味与归经：苦，平。归肝、脾、胃经。 荷叶在中国分布极广，南起海南岛（北纬 19左右）北至黑龙江省的富锦（北纬 47.3），东临台湾省，西达新疆天山北麓，均可见其倩影。垂直分布亦达 2000米，而且 栽培历史也很悠久，有史料记载就达三千多年。主产于浙江、江苏、湖南和湖北等地，在我国的资源十分丰富。 1991 年 11 月中华人民共和国卫生部卫监发（ 1991）第 45 号文件中，荷叶被列为第二批 “ 既是食品又是药品 ” 的名单中。 据研究报道，荷叶中除了含有普通植物所共有的碳水化合物、脂质、蛋白质、单宁等常规化学成分外，还含有生物碱、黄酮、挥发油、有机酸以及皂类、植物固醇等生物活性成分，因此，具有多种生物活性功能。 国内外大量研究资料表明，荷叶中所含的黄酮、生物碱和挥发油等成分具有 较好的抑菌活性。此外，根据溶剂极性不同， 提取的植物中的化学成分也不同，得到的提取物的生物活性也有很大的差异。植物活性成分中，有的亲水基团多、极性大而表现出较强的亲水性，有的亲水基团少、极性小而表现出较强的亲脂性。常用溶剂的极性强弱顺序可大致表示如下：石油醚 乙酸乙醋相 提取相 石油醚相 剩余相。
