1、 国家自然科学基金项目 “ 阻断 Notch 信号通路调控 Atoh1 表达对老年性聋内耳结构及听功能修复作用及机制研究 ” 合作 申 请 协议 甲方： 中山大学 乙方 ： 中南大学 甲乙双方本着 优势互补、团结 协作的精神， 合作 申请 2017 年 度国家 自然科学 基金 青年基金 项目“ 阻断 Notch 信号通路调控 Atoh1表达对老年性聋内耳结构及听功能修复作用及机制研究 ” ， 经过协商达成如下协议 ： 一、 双方负责人 甲方 中山大学 为项目依托单位 ，项目负责人为 任红苗 乙 方 中南大学 为项目合作单位，合作方 负责 人为 刘伟 二、 研究 任务 分工 甲方： 完成课题体外
2、实验第 二 部分 (建立庆大霉素损伤基底膜毛细胞模型， DAPT/Ad-Atoh1-EGFP 转染损伤基底膜，明确 DAPT 通过阻断 Notch 信号通路上调 Atoh1 表达促进庆大霉素损伤的基底膜支持细胞转分化为毛细胞 ) 和体内实验部分(DAPT/Ad-Atoh1-EGFP 导入老年性聋 C57BL/6J 小鼠内耳，明确DAPT 通过阻断 Notch 信号通路上调 Atoh1 表达进而促进老年性聋 C57BL/6J 小鼠内耳毛细胞再生及听功能恢复，并从分子生物学水平进一步探讨 DAPT /Ad-Atoh1-EGFP 促进老年性聋小鼠听功能恢复的机制 )。 乙方： 完成课题体外实验第一部
3、分 : DAPT/Ad-Atoh1-EGFP 转染体外培养的室管膜细胞，明确 DAPT 通过阻断 Notch 信号通路上调Atoh1 表达促进室管膜细胞诱导为毛细胞样细胞。 三、 研究成果归属 1 共同所有， 2 各自所有， 3 归甲方所有， 4 其他约定。 经双方协议 ,研究成果归甲方所有。 四、资助 经费分配 该项目申 请 经费 29.04 万元 （直接费用 24.2 万元、间接费用 4.84 万元） ，若项目按 此 经费 获得 资助 ，则甲方拨付乙方经费 万元 （ 直接费用 万元、间接费用 万元 ） （详细科目及用途见附表） ；若 实际资助 经费有 变化 ，则甲乙双方在填报项目 资助 计
4、划书时再 签订补充协议重新约定合作经费金额、 具体科目预算 、拨款时间 及其他 未尽事宜。 五、 监督管理 合作双方的科研 、 财务 等 管理部门将严格按照国家自然科学基金项目 、经费 管理 规定，对项目研究执行、经费使用情况进行监督管理。 本协议一式两份 ，双方各执一份，共同 遵守 执行 。 甲方 : 乙方 : 中南大学 法人代表 /委托代理人： 项目负责人： 联系电话 :13710246540 年 月 日 法人代表 /委托代理人： 项目负责人： 刘伟 联系电话 :13875837130 年 月 日 合作单位项目资金预算表 科目名称 金额 (万元 ) 合作单位总经费 (一 ) 直接费用： 1
5、、 设备费： (1)设备购置费： (2)设备试制费： (3)设备改造与租赁费： 2、 材料费： 3、 测试化验加工费： 4、 燃料动力费： 5、 差旅费： 6、 会议费： 7、 国际合作与交流费： 8、 出版 /文献 /信息传播 /知识产权事务费： 9、 劳务费： 10、 专家咨询费： 11、 其他支出： (二 ) 间接费用： 其中：绩效支出： 合作单位项目资金预算说明表 请对各项支出的主要用途和测算理由及合作研究外拨资金等内容进行详细说明，可根据需要另加附页。（限 2000 字以内） (一 ) 直接费用 1) 材料费： 2.65 万元 实验动物费： 0.35 万元 利用准确出生天数的新生小鼠
6、培养室管膜细胞， 需 购 买 SPF 级 C57BL/6J孕鼠后将其饲养于实验动物中心 。 名称 单价（万元） 数量 小计（万元） C57BL/6J 孕鼠 0.0350 10 0.3500 细胞培养试剂 : 1.2 万元 室管膜细胞分离机纯化所需 Neurobasal 培养基（ 5 瓶）、无血清培养液添加剂 N2（ 5 支）、无血清培养液添加剂 B27（ 5 支）、生长因子 IGF-1（ 2 支）、生长因子 EGF（ 2 支）、生长因子 bFGF（ 4 支）。 抗体购买： 1.1 万元 干预前后再生毛细胞及纤毛特异性标志物鉴定 （ anti-Brdu， Myosin7a，Phalloidine
7、）， SGN（ -tubulin III） 与毛细胞样细胞共培养建立的突触结构的鉴定（ Synapse-1， Glutamine， CTBP2, FM1-43）。相对应上述一抗的二抗，鼠来源、兔来源及羊来源的 488 和 568 波长的二抗。染细胞核所需 DAPI。培养细胞所需耗材（各型移液枪头、细胞冻存管、二甲基亚砜、液氮、培养皿、无菌手套、帽子、口罩）。体内及体外试验中检测 Notch 信号通路中相关分子 RT-PCR试剂盒、 Western Blot 膜， Western Blot 二抗（ 3 种）。 2) 测试化验加工费： 0.35 万元 3） 劳务费： 0.3 万元 用于直接参加项目研究的非在职研究生劳务费用。 合作单位有 1 位直接参与本项目的研究生 。 (二 ) 间接费用 4.8400 万元 合作单位科研部门、财务部门审核意见 合作单位科研部门意见： 签章 年 月 日 合作单位财务部门意见： 签章 年 月 日
