1、毕业论文 文客久久 本科 毕业论文 (设计 ) 题 目： 木质纤维素脱除鱿鱼酶解液中重金属研究 学 院： 学生姓名： 专 业： 药学 班 级： 指导教师： 起 止 日期： 毕业论文 文客久久 目录 目录 . 1 木质纤维素脱除鱿鱼酶解液中重金属研究 . 4 1 前言 . 6 2 实验材料、主要仪器与试剂 . 6 2.1 材料 . 6 2.2 仪器 . 7 2.3 试剂 . 7 3 实验方法 . 7 3.1 样品预处理 . 7 3.2 空白组的处理 . 7 3.3 不同因素对鱿鱼水解液的影响 . 8 3.4 最佳制备工艺条件 正交试验 . 9 4 实验结果与讨论 . 9 4.1 多糖含量的测定
2、. 9 4.2 木质纤维素吸附重金属测定 . 11 4.3 鱿鱼水解液中蛋白质的含量测定 . 14 4.4 最佳制备工艺条件正交试验 . 16 4.5 正交试验结果 . 16 5 结论 . 17 致谢 . 19 毕业论文 2 木质纤维素脱除鱿鱼酶解液中重金属研究 摘 要 目前很多水产品制成一些用品，其中会 夹杂一些重金属，导致重金属超标，本实验用木质纤维素吸附重金属来研究，而吸附时间，温度，固液比和重金属起始浓度会影响吸附效果，对此我们对其几个因素进行研究。 确定鱿鱼中的蛋白质含量 在 凯氏定氮法中 的最佳提取工艺 ，以及用木质纤维在鱿鱼中加入重金属后糖的测定和利用其测定的重金属含量得出脱除率
3、。在单因素实验的基础上，确定对实验影响较大的四个因素为固液比、吸附时间、温度和重金属的起始浓度，在这四个条件下木质纤维素对重金属的吸附效果都是不同的，本实验确定旗最佳，最后通过四因素三水平的正交试验，最后得出正交实验的最优条件为： 固液比为 1:30；吸附时间 60min；温度为 30；重金属起始浓度为 0.25ug/ml。 关键词 鱿鱼；重金属；蛋白质；葡萄糖 毕业论文 3 Kieldahl method extracting squid of protein content in technology research Abstract At present a lot of aquati
4、c products made some things, of which will be mingled with some heavy metal, lead to heavy metal exceeds bid, this experiment with woodiness cellulose adsorption to heavy metal, and adsorption time, temperature, solid-liquid ratio and heavy metal of initial concentration will affect adsorption effec
5、t, which we have several factors of the research。 Determine the squid protein content in the best of the kieldahl method extracting process。 And the use of wood fibers of the squid to join after the determination of sugar heavy metal and Use the heavy metal content determination that the desulphuriz
6、ation rateOn the basis of single factor experiment, to determine the four factors influencing the for solid-liquid ratio, adsorption time, temperature and the initial concentration of the heavy metal.In the four conditions of lignocellulose heavy metal adsorption effect is different, this is determi
7、ned by the flag is the best.Using the orthogonal experimental design, the optimal conditions obtained for the extraction for the polysaccharides from Palmaria palmata were:Solid-liquid ratio is 1:30; Adsorption time 60 min; Temperature for 30 ; Heavy metal of initial concentration of 0.25 ug/ml. Key
8、words Kieldahl; Heavy metal; Sugar; Orthogonal test 毕业论文 4 1 前言 鱿鱼的营养价值较高，属于高蛋白、低脂肪、低热量食物，其蛋白质含量为 16%至 20%，脂肪含量不足 1%。鱿鱼中含有丰富的钙、磷、铁元素，对骨骼发育和造 血十分有益，可预防贫血 ， 所含的多肽和硒等微量元素有抗病毒、抗射线作用 ， 除了富含蛋白质及人体所需的氨基酸外，还是含有大量牛黄酸 ， 可预缓解疲劳，恢复视力，改善肝脏功能的一种低热量食品。 目前， 测定蛋白质的方法可分为两大类：一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算，如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等；另一类是利用
9、化学方法来计算，如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等。主要测定方法有：双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法。目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮 法，是通过测总氮量来确定蛋白质含量的方法。通常以硫酸铜作催化剂 ，这种方法具有 样品质量及试剂用量较少 的优点， 且有一套微量凯氏定氮器。 重金属一般指密度大于 4.5g/cm3的金属 ,如铅 (P b),砷 (As),镉 (Cd),铬 (Cr),汞 (Hg),铜 (Cu),金 (Au),银 (Ag)等。有些重金属通过食物进入人体，干扰人体正常生理功能，危害人体健康，被称为有毒重金属。
10、现代社会中主要检测重金属的方法有紫外分光光度法（ UV）、原子吸收发（ AAS）、原子荧光法（ AFS）、电感耦合等离子体法（ ICP）、电感耦合等离子质谱 法（ ICP-MS）、 X 射线荧光光谱法（ XRF）等。 本实验的吸附材料木质纤维素是天然可再生木材经过化学处理、机械法加工得到的有机絮状纤维物质，无毒、无味、无污染、无放射性。广泛用于混凝土砂浆、石膏制品、木浆海棉、沥青道路等领域，对防止涂层开裂、提高保水性、提高生产的稳定性和施工的合宜性、增加强度、增强对表面的附着力等有良好的效果。其技术作用主要是：触变、防护、吸收、载体和填充剂 。 木质纤维易分散在保温材料中形成三维空间结果，并能
11、吸附自重 6-8倍的水分。这种结和特点提高了材料的和易性能，操作性能，抗滑坠性能， 加快了施工速度 ;木质纤维尺寸稳定性和热稳定性在保温材料中起到了很好的保温抗裂作用；木质纤维的传输水分功能使得浆料表面与基层界面水化反应充足，从而提高了保温材料的表面强度、与基层的粘结强度和材料强度的均匀性。 吸附能力的木质纤维金属离子称为吸附。主要优点是它有效吸附重金属离子的浓度降低到非常低的水平和使用廉价的生物吸附材料。吸附的传统治疗方法包括：低成本，效率高，最小的化学吸附剂再生，没有而额外的营养需求， 吸附属于一种传质过程，物质内部的分子和周围分子有互相吸引的引力，但物质表面的分子，其中相对物质外部的作用
12、力 没有充分发挥，所以液体或固体物质的表面可以吸附其他的液体或气体，尤其是表面面积很大的情况下，这种吸附力能产生很大的作用，所以工业上经常利用大面积的物质进行吸附，如 ,活性炭 、 水膜等。 此实验是用木质纤维素。 2 实验材料、主要仪器与试剂 2.1 材料 鱿鱼， 购于市场；先用水清洗外壳上的泥浆、杂草等，按肉水比 1： 6 用组织捣碎机绞碎，毕业论文 5 得到肉浆，再分装冷藏备用。 2.2 仪器 仪器名 型号 厂家 恒温水浴锅 紫外可见分光光度计 精密天平 离心机 恒温培养摇床 真空干燥箱 凯氏定氮蒸馏装置 HH-S 型 UV-1100 BS323S TDL-40B THZ-100 DZF
13、-6020 巩义市予华仪器有限公司 上海美谱达仪器有限公司 赛多利斯科学仪器北京有限公司 上海安亭科学仪器厂 上海 -恒科有限公司 宁波江南仪器厂 2.3 试剂 试剂 名 厂家 硫酸铜 硫酸钾 浓硫酸 氢氧化钠 硼酸 盐酸 指示剂 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 国药集团化学试剂有限公司 所有试剂均为分析纯，水 为蒸馏水。 3 实验方法 3.1样品预处理 取材料鱿鱼 637g，洗净，搅碎，以 1:6的蒸馏水稀释，加 5%氢氧化钠溶液调节 pH=7.00，加中性蛋白酶 12
14、.8g，放在 45的水浴锅中放置 3个小时，再加入木瓜蛋白酶 6.4g，再放入 45的水浴锅中 3个小时，取出，倒入瓶中放入冰箱备用。 3.2空白组的处理 3.2.1消化 去鱿鱼水解液 10ml，加 0.5gCuSO4， 10gK2SO4和 20ml浓 H2SO4，置于定氮瓶中，摇匀进行消化。小火至炭化后大火，蓝绿色为终点，冷却后用蒸馏水定容至 100ml。 3.2.2 吸收和蒸馏 去消化液 5ml 与试管内，经漏斗再加入 5ml40%氢氧化钠溶液至强碱，加少量蒸馏水，夹好漏斗夹，蒸馏水冷凝管预先插入盛有 10ml4%硼酸吸收液中，蒸馏至混合液变绿色。 毕业论文 6 3.2.3 滴定 用 0.
15、0100mol/LHCl 滴定至微红色为终点，测得滴定量为 6.3ml、 3.3 不同因素对鱿鱼水解液的影响 3.3.1 多糖的测定 葡萄糖标准溶液 1mL、 2mL、 3mL、 4mL、 5mL 分别置于 50mL 容量瓶中定容 ，摇匀，浓度分别为 20、 40、 60、 80、 100g/mL 。 取上述标准葡萄糖溶液 1mL,加入 20mL试管中 ,加入 5苯酚溶液 1mL充分混合 ,加入浓硫酸 5mL 并立即摇匀。室温下放置 20min,在 490nm 波长处测定吸光值 ,以葡萄糖含量为横坐标 ,吸光值为纵坐标 ,绘制标准曲线。 准确吸取滤液 1mL,加入 20mL 试管中 ,以下按
16、上述 步骤操作。同时做空白试验 。 3.3.2 重金属的测定 3.3.2.1 固液比对木质纤维素的影响 以固液比 1:10； 1:20； 1:30； 1:40； 1:50 时间为 120min 温度为 30重金属起始浓度0.25g/mL 在摇床中摇匀 后取上清液于 15ml 试 管中， 静置，等分层后，倒入安瓿瓶约 5， 6ml，加入一滴 HNO3，送到宁波检测。 3.3.2.2 吸附时间对木质纤维素的影响 以时间为 60min； 80min； 100min； 120min； 140min 固液比为 1:30 温度为 30重金属起始浓度 0.25g/mL 在摇床中摇匀 后取上清液于 15ml
17、试管中， 静置，等分层后，倒入安瓿瓶约 5， 6ml，加入一滴 HNO3，送到宁波检测。 3.3.2.3 温度对木质纤维素的影响 以温度为 25； 30； 35； 40； 45固液比为 1:30 重金属起始 浓度 0.25g/mL 在摇床中摇匀 后取上清液于 15ml 试管中， 静置，等分层后，倒入安瓿瓶约 5， 6ml，加入一滴 HNO3，送到宁波检测。 3.3.2.4 重金属浓度对木质纤维素的影响 以重金属浓度为 0.1； 0.15； 0.2； 0.25； 0.3g/mL 温度为 30固液比为 1:30 时间为120min 分别在摇床中摇匀，取出，倒入试管中，静置，等分层后，倒入安瓿瓶约
18、5， 6ml，加入一滴 HNO3，送到宁波检测。 3.3.3 蛋白质的测定 取制备好的鱿鱼水解液和木质纤维素，以时间为 60min； 80min； 100min； 120min； 140min固液比为 1:30，倒入锥形瓶中，加入重金属浓度 30ml，放入摇床中，以温度为 30的条件摇匀，取出，倒入试管中，静置，等分层后取 10ml 加入定氮瓶中，然后消化，吸收蒸馏，滴定测出消耗 HCl 的量。 取制备好的鱿鱼水解液和木质纤维素，以固液比 1:10； 1:20； 1:30； 1:40； 1:50 的比例配制，倒入锥形瓶中，加入重金属浓度 30ml，放入摇床中，以 120min,30的条件摇匀，
19、取出，倒入试管中，静置，等分层后取 10ml 加入定氮瓶中，然后消化，吸收蒸馏 ，滴定测出消耗 HCl 的量。 取制备好的鱿鱼水解液和木质纤维素，以温度为 25； 30； 35； 40； 45，固液比毕业论文 7 为 1:30，倒入锥形瓶中，加入重金属浓度 30ml，放入摇床中，以时间为 120min 的条件摇匀，取出，倒入试管中，静置，等分层后取 10ml 加入定氮瓶中，然后消化，吸收蒸馏，滴定测出消耗 HCl 的量。 取制备好的鱿鱼水解液和木质纤维素， 以重金属浓度为 0.1； 0.15； 0.2； 0.25； 0.3g/mL ,固液比为 1:30，倒入锥形瓶中，放入摇床中，以时间为 12
20、0min 温度为 30的条件摇匀，取出，倒入试管中，静置，等分层后取 10ml 加入定氮瓶中，然后消化，吸收蒸馏，滴定测出消耗 HCl 的量。 3.4 最佳制备工艺条件正交试验 经过了重金属的测定，作图得到 最佳制备正交试验工艺条件为： 固液比为 1:30；吸附时间 60min；温度为 30；重金属起始浓度为 0.25ug/ml。 4 实验结果与讨论 4.1 多糖含量的测定 4.1.1 葡萄糖标准曲线 y = 8.2 568 x + 0.2 369R2= 0.9 990.00.51.01.52.02.53.00 0.1 0.2 0.3 0.4浓度/ug .ml-1吸光度错误 !未指定书签。 图
21、 1 葡萄糖吸光值标准曲线 Fig.1 Standard curve of OD value of Glucose 4.1.2 固液比对鱿鱼水解液中多糖的影响 毕业论文 8 1.401.421.441.461.481.500: 57 1: 12 1: 26 1: 40 1: 55固液比/g. mL-1吸光度图 1 不同 固液 比对 多糖 的影响 Fig.1 The influence on polysaccharide of different solid-to- liquid ratio 图一可以看出在固液比为 1:10 条件下其吸光度最小，而吸光度与吸附能力成反比，所以其吸收多糖的能力高，
22、鱿鱼水解液中的糖含量最少，在固液比为 1:30 条件下，其鱿鱼水解液中糖 的含量最高。因此 在固液比为 1:10 条件下其吸附能力是最好的。 4.1.3 吸附时间对多糖含量测定的影响 0.60.81.01.21.41.61.82.040 90 140 190时间/mi n吸光度错误 !未指定书签。 错误 !未找到引用源。 图 2 不同时间对 多糖 的影响 Fig.2 The influence on polysaccharide of different time 图二中我们可以看出在吸附时间为 60min 的条件下，其吸光度最低，而吸光度与吸附能力成反比，所以其吸收多糖的能力高，鱿鱼水解液中
23、的糖含量最少，同样的，在吸附时间为 140min的条件下其鱿鱼水解液中的糖含量最高。因此在吸附时间为 60min 的条件下其吸附能力是最好的。 4.1.4 温度对多糖含量测定的影响 毕业论文 9 0.40.60.81.01.21.41.620 30 40 50温度/吸光度错误 !未指定书签。 图 3 温度 对 多糖 的影响 Fig.3 The influence on polysaccharide of different Temperature 图三中我们可以看出当温度为 45的条件下，其吸光度最小，而吸光度与吸附能力成反比，所以其吸收多糖的能力高，鱿鱼水解液中的糖含量最少，同样的，在温度为
24、 30的条件下其鱿鱼水解液中 的糖含量最高。因此在温度是 45的条件下其吸附能力是最好的 . 4.1.5 重金属起始浓度对多糖含量测定的影响 0.00.51.01.52.02.53.00 0.1 0.2 0.3 0.4重金属起始浓度/ug .ml-1吸光度错误 !未指定书签。 图 4 重金属起始浓度 对 多糖 的影响 Fig.4 The influence on polysaccharide of different heavy metal 图 四中我们可以看出在重金属起始浓度为 0.3ug/ml 的 条件下 其吸光度为最小， 而吸光度与吸附能力成反比，所以其吸收多糖的能力高，鱿鱼水解液中的糖含量最少，在重金属起始浓度为 0.1ug/ml 的条件下其鱿鱼水解液中的糖含量最高。因此在重金属其实浓度为 0.3ug/ml 的条件下其吸附能力是最好的。 4.2 木质纤维素吸附重金属测定 4.2.1 固液比对木质纤维素吸附率的影响
