1、 本科毕业论文 （ 20 届） 复合酶解制备海蜇多肽抗氧化活性的 研究 所在学院 专业班级 药学 学生姓名 学号 指导教师 职称 完成日期 年 月 - 2 - 目录 摘 要 . 1 Abstract. 2 1 前言 . 3 2 材料与试剂 . 4 2.1 材料 . 4 2.2 试剂 . 4 2.3 主要设备与仪器 . 4 3 试验方法 . 4 3.1 海蜇活性肽的制备 . 4 3.1.1 样品预处理 . 4 3.1.2 制备海蜇活性肽 . 5 3.2 分离、纯化海蜇抗氧化活性肽 . 5 3.2.1 酶解液的活性分离（超滤） . 5 3.2.2 SephadexG-15凝胶层析 . 5 3.3
2、抗氧化实验 . 5 3.3.1 DPPH 自由基清除能力的检测 . 5 3.3.2还原力的检测 . 5 3.3.3清除羟自由基能力的测定 . 6 4 试验结果与讨论 . 6 4.1 分离纯化 . 6 4.2 海蜇初酶解液的抗氧化活性测定 . 6 4.3 海蜇复合酶解液的抗氧化活性测定 . 8 5 小结 . 9 参考文献 . 10 致 谢 . 13 附录 英文翻译 . 14 附录 英文原文 . 19 - 3 - 【摘要】 目的：研究复合酶解海蜇中海蜇多肽的抗氧化活性。方法：海蜇经碱性蛋白酶初酶解、胰蛋白酶二次酶解后得复合酶解液，将酶解液离心，收集上清 液得海蜇活性肽粗品。粗品经超滤、 Sepha
3、dexG-15 凝胶层析、冷冻干燥纯化得海蜇抗氧化活性肽， 利用 DPPH 法、清除羟自由基法和 还原 力 测定 法进行抗氧化实验。 结果：测得 (3K 5K) (5K 10K) ( 10K)空白 。而且在 分子量 (3K 5K) (5K 10K) ( 10K)。 - 10 - 0102030405060701 5 10 15酶解液浓度（m g / m l ）羟自由基清除率（%）1 0 k5k10k3k5k3 k图 4 不同分子量海蜇多肽羟自由基清除率 由图 4 可以看出， 各组分对羟自由基的清除能力与浓度呈明显的量效关系，即随着浓度的增加而增加，对羟自由基的清除率越高，且增加幅度较大，当分子
4、量 (3K 5K) (5K 10K) ( 10K)空白 。 4.3 海蜇复合酶解液的抗氧化活性测定 0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.001 5 10 15浓度（m g / m l ）DPPH自由基清除率（%）1 0 k5k10k3k5k3 k图 5 复合酶解不同分子量海蜇多肽 DPPH 自由基清除率 由图 5 可以看出， 经碱性蛋白酶初酶解、胰蛋白酶二次酶解所获得的海蜇多肽液 DPPH自由基清除率随着分子量的减小而增加，随着酶解浓度的增加而增加。对于 3K 5K、 5K10K、 10K 这几个分子量的海蜇多肽来说，随着酶解浓度的增加，自由基清除率增加的比较缓慢 。而 3K 在浓度大于 5mg/ml 时，自由基清除率增加明显。当分子量 3K 浓度为15mg/ml 时，清除率为最大值 73.62%。
