1、胰岛 细胞过氧化氢损伤模型建立的数据分析摘要：糖尿病是一组由于胰岛素分泌缺陷和或胰岛素作用障碍所致的以高血糖为特征的代谢性疾病，近 30 年来，我国糖尿病患病率显著增加。细胞内氧化应激是与糖尿病形成有关的重要因素。过氧化氢是常用的细胞氧化损伤试剂。本试验以不同浓度的过氧化氢处理胰岛 细胞株 MIN6 4h，用 MTT 法检测细胞相对活力，确定能使细胞损伤达到 50%左右的最佳过氧化氢作用浓度，并依此建立胰岛 细胞过氧化氢损伤模型，为后续相关研究奠定基础。关键词：胰岛 细胞 过氧化氢 氧化损伤模型 统计分析1、试验设计与原始数据通过查阅 H2O2 损伤 MIN6 细胞的有关实验、研究，并在参考实
2、验室已有实验结果的基础上，选择 H2O2 损伤时间为 4，损伤浓度分别为50、100、150、200、250 、300、400、500M，摸索使细胞达到 50%损伤的最佳损伤浓度，以建立损伤模型。MTT 能检测细胞的相对活力，细胞受到氧化损伤，MTT 测得值会下降，故以 MTT 实验结果作为损伤模型建立的依据。测得的试验数据如下图所示：过氧化氢浓度（M）OD570 组号C（ 0）50 100 150 200 250 300 400 5001 0.4468 0.4583 0.4756 0.4562 0.4306 0.3728 0.3914 0.256 0.21912 0.4695 0.4699
3、0.4611 0.4392 0.4304 0.3673 0.3883 0.2348 0.22763 0.4615 0.4452 0.4613 0.4562 0.4364 0.3682 0.3791 0.247 0.23654 0.4436 0.4412 0.4716 0.3935 0.4249 0.356 0.3875 0.2562 0.21055 0.452 0.4395 0.4564 0.4378 0.4421 0.3702 0.3926 0.2234 0.20862、数据分析2.1 计算每个浓度测得的 OD570 平均值和标准差，并绘制直方图，结果如下：表 1 不同浓度过氧化氢处理 MI
4、N6 细胞测得 OD570 均值和标准差过氧化氢浓度（M）C（ 0）50 100 150 200 250 300 400 500OD570 均值 x0.4547 0.4508 0.4652 0.4366 0.4329 0.3669 0.3878 0.2435 0.2205OD570 标准差 S 0.0107 0.0130 0.0080 0.0257 0.0066 0.0064 0.0053 0.0142 0.0117图 1 不同浓度过氧化氢对 MIN6 细胞细胞活力的影响2.2 参数估计与假设检验I 参数估计以对照组样本 OD570 均值作为对照组总体 OD570 均值的估计=0.4547x要
5、使细胞损伤达到 50%，即所测得的过氧化氢损伤组 OD570 均值为对照组的一半1/2 =0.2274从均值表和直方图可以看出，400M 和 500M 两个组测得的均值和 0.2274较为接近，接着，我们来检验这两组的均值和 0.2274 差异是否显著。II 400M 过氧化氢处理组（1） 提出假设：H0：=0.2274 HA： 0.2274 （2） 计算 t 值：样本平均数： =0.2435x样本标准差：S=0.0142样本标准误： =0.0064=2.516（3）查表、推断：df=n-1=5-1=4 t0.05,4= 2.776 t0.01,4=4.604|t|=2.5160.05 差异不
6、显著故接受原假设，400M 过氧化氢处理组的 OD570 和 0.2274 差异不显著，400M 可以作为损伤模型的过氧化氢浓度。III 500M 过氧化氢处理组（1） 提出假设：H0：=0.2274 HA： 0.2274 （2） 计算 t 值：样本平均数： =0.2205x样本标准差：S=0.0117样本标准误： =0.0052=1.327（3）查表、推断：df=n-1=5-1=4 t0.05,4= 2.776 t0.01,4=4.604nSx50.142xSt0.64723nSx50.17xSt0.24|t|=1.3270.05 差异不显著故接受原假设，500M 过氧化氢处理组的 OD570 和 0.2274 差异不显著，500M 可以作为损伤模型的过氧化氢浓度。通过上面的统计分析，可以得到结论：在胰岛 细胞过氧化氢氧化损伤模型中，过氧化氢浓度选择 400M 和 500M 都可以。
