1、1LI-6400 便携式光合仪的使用说明1. 仪器使用功能LI-6400 并非单一用于研究植物光合作用，他同时包括光合、呼吸（分为植物呼吸和土壤呼吸）、蒸腾、荧光等多项测量功能，多项功能的完全集成使得 LI-6400 成为生态学研究领域上重要的必不可少的基础研究设备。其测量参数包括：净光合速率（Pn）、气孔导度（ Gs）、蒸腾速率（Ts）、细胞间隙 CO2 浓度（Ci）、大气 CO2 浓度（Ca）、光量子通量密度（PFD ）、叶温（TL）、相对空气湿度（RH）。如果配备6400-40 叶绿素荧光叶室，可测试以下参数：最大荧光（Fm）、初始荧光（Fo）、可变荧光（Fv）、光化学猝灭（qP ）、非
2、化学猝灭（qN）。此外，进行自动测量的基础上还可以进一步计算饱和点、补偿点等多项重要生理生态指标。表 1 LI-6400 参数表（主机显示屏测量菜单显示的参数说明， A-L 是行号）CO2R_ml 参比室 CO2 浓度 (mol CO2 mol-1) Prss_kPa 大气压力 (kPa)CO2S_ml 样本室 CO2 浓度 (mol CO2 mol-1) ParIn_m 叶室内光合作用有效辐射 (mol m-2 s-1)H2OR_mml 参比室 H2O 浓度 (mmol H2O mol-1) ParOutm 外界光合作用有效辐射 (mol m-2 s-1)AH2OS_mml 样本室 H2O
3、浓度 (mmol H2O mol-1)GBLC_mol 总叶片边缘层导度 (mol m-2 s-1)CO2_ml CO2 变化量 (样本-参比) (mol CO2 mol-1)TblockC 冷却器温度 ()H2O_mml H2O 变化量 (样本-参比) (mmol H2O mol-1)TairC 样本室温度 ()Flow_ml 样本室内气流速率 (mol s-1) TleafC 叶片温度 ()BRH_S_% 样本室内相对湿度 (%)HPhoto 光合作用速率 (mol CO2 m-2 s-1) HH:MM:SS 实时时钟Cond 气孔导度 (mol H2O m-2 s-1) Program
4、自动测量程序状态Ci 胞间 CO2 浓度 (mol CO2 mol-1) CHPWMF Status word (summary of line J)CTrmmol 蒸腾速率 (mmol H2O m-2 s-1)IBattery 电池电压 (V)Ci/Ca 胞间 CO2 / 环境 CO2 CO2 CO2 IRGAs 状态VpdL 叶温下蒸气压亏缺 (kPa) H2O IRGAs 状态VpdA 气温下蒸气压亏缺 (kPa) Pump 泵状态Flow 流速控制器状态Mixr CO2 混合器状态D JFan 叶室风扇状态totalCV% .CO2CV_%, . CV_%, 及 Flow_CV%总变异
5、系数Program 显示自动测量程序状态CO2CV_% CO2_ml (%) 变异系数 ProgPrgs AutoProgram step counterH2OCV_% H2O_mml (%) 变异系数 FwMxCrLp Numerical summary of the four stability flagsEFlow_CV% Flow_ml (%) 变异系数KtotalCV% See totalCV% under E aboveRH_R_% 参比室相对湿度 (%) CRagc_mv Reference CO2 AGC (automatic gain control) signal, in
6、mVRH_S_% 样本室相对湿度 (%) CSagc_mv Sample CO2 AGC signalTd_R_% 参比室露点温度 (C) HRagc_mv Reference H2O AGC signalFTd_S_% 样本室露点温度 (C)LHSagc_mv Sample H2O AGC signal22. 硬件组成与存放正确的硬件连接与存放对于使用和维护来说是至关重要的。关于仪器的连接请与培训人员联系学习。图 1 仪器在主机箱内的安放位置与名称（请注意安放的方式）关闭叶室，确定叶室关闭紧密，接上电池插头，开主机3. 仪器使用流程3.1 仪器安装连接，并连接好进气管缓冲瓶。3.2 打开位于
7、主机右侧的电源开关。3.3 仪器在启动后将显示“Is the IRGA connected?(Y/N)” 选择 Y3.4 叶室配置选择：选择目前安装的叶室配置，如已经安装了标准叶室，请选择 Factory default，然后回车。如果安装了荧光叶室，请选择 6400-40 Default Flurometer，然后回车。如果安装了土壤叶室，请选择 6400-09 soil Chamber，然后回车。其他叶室方法相同，只需要选择不同的叶室就可以了。6400-02B红蓝光源6400-03充电电池主机分析仪与叶室主机与分析仪的连线CO2 注入系统野外支架（4 根）33.5 调零向 SCRUB 方向
8、拧紧碱石灰管 和干燥管上端的螺母。关闭叶室，即压下黑色手柄，并旋紧固定螺丝即可。在主菜单按 F3 按钮选“Calib Menu”项选“Flow Meter Zero”项（调气流量为零），回车等待流速的电压读数基本稳定，用 F1、F 2 上下调节，至读数基本稳定，且在-0.50.5 范围内，按 EXIT 按钮退出。选“IRGA Zero”（红外线气体分析仪探头调零），回车等待 CO2 浓度和 H2O 浓度的下降，至读数基本稳定（一般在 20 分钟左右），按 F3“Auto All ”进行自动调节，结束后“Exit ”退出。选“View Store Zeros Spans”，回车后按 F1“Sto
9、re”来保存，按“Y ”来确定后按 F5“Exit ”退出。按“escape”，回到主菜单。3.6 手动测量按 F4“New Measurements”菜单进入测量菜单。设定文件：按 F1“Open Logfile”建立新文件。回车后输入自己设定的文件名。当显示屏出现提示“Enter Remark”时，输入需要的标记（英文，用于标记样地、植物种类、样品号等）。继续回车，文件设置结束。在夹入叶片之前如果光合值大于 0.5 或小于-0.5，那么应该按 F5“Match”进行匹配。测量：选取需要测量的植物叶片（3-5 次重复）。测量时间请尽量选择晴朗的天气条件，上午 10：00-11：30 左右最好
10、，如果您的植物叶片是处于温室内、室内或生长箱内，由于其叶片气孔没有完全开放，需要先用饱和光强来进行气孔诱导，方法可以是采用大瓦数的灯泡来照射（大致需要 20 分钟的时间），或者在室外有光条件下活化（会小于 20 分钟），也可采用 6400-02B 或 6400-40 荧光叶室来进行气孔的诱导开放（这种方法有其缺点，因为我们往往需要很多次重复和样地，这样会多花很多时间。）。向 Bypass 方向拧紧碱石灰管 和干燥管上端的螺母。夹上叶片（尽量让叶片充满整个叶室空间，此时测量的植物叶片面积为 6cm2，如果无法充满，需要用叶面积仪来确定叶面积，并在测量菜单状态下按数字“3”并按 F1 来修改叶片面
11、积），关闭叶室（即压下黑色手柄），并旋紧固定螺丝即可（切记不要过紧）。等待 C 行 PHOTO 读数稳定后即可记录（大约在 30 秒-1 分钟左右，判断标准是小数点后最后一位数字的波动在 0.2 左右，注意，如果是室内测量，波动会大一些）。记录方法是按 F1“LOG”按钮或者按分析仪手柄上的黑色按钮 2 秒即可记录一组数据。换叶片进行下一次测量。重复。43.7 自动测量与环境条件控制LI-6400 可以控制的环境条件包括温度、CO2 浓度、光强等。一般而言，需要控制环境条件的实验有两种情况。一种是环境变化剧烈，无法准确进行同等环境条件的测量。另一种情况是进行光曲线和 ACI 曲线测量。第一、
12、简单环境控制。只需要在手动测量时，按数字来切换菜单。具体各菜单情况如下图所示。图 2 测量菜单下功能键分布图温度控制：按数字 2，按 F4 菜单控制温度（输入需要的温度回车即可，注意温度控制范围是环境温度的上下 6 度）。光强控制：本功能在标准叶室配置下无法完成，此时需要连接 6400-02B 红蓝光源。并重新启动机器选择 6400-02B CHAMBER 配置。启动后其他同标准叶室。在测量菜单下按数字“2”，按 F5 按钮选择“Quantum Flux”回车，输入您需要的光强值即可。CO2 控制：需要连接上 CO2 注入系统，并在主菜单下选择 F3“Calib” 按钮进入校准菜单。此时应该把
13、叶室关闭拧紧，把 CO2 过滤管的螺丝拧到“SCRUB”状态。利用上下箭头选择“CO2 Mixer Calibrate”，回车后，等待系统自动进行校准后，回到测量菜单，按数字 2，按 F3 设置 REF CO2 浓度即可进行测量。测定完成后，关闭气流、温度、光强控制，退到主菜单。第二、 自动测量。光曲线：夹上叶片气孔开放后的叶片，建立新文件后，匹配。测量菜单下按数字 5，按 F1，选择 LIGHT CURVE，回车，并输入光强梯度（例如 2000 1500 1200 1000 800 600 400 200 100 50 20 0）。进一步输入最小等待时间（例如 120 秒）和最大等待时间（
14、240 秒）。输入匹配值（例如 20PPM），回车，5机器即进入自动测量，测量后关闭文件。退出。（注意此测量要求 CO2 浓度变化不大，否则应该控制其浓度）。ACI 曲线：同于光曲线，不同点是选择“ACI CURVE”，设置浓度梯度举例（ 380 300 200 100 50 380 380 400 600 800）。其他相同。3.8.数据输出将计算机与仪器连接，把仪器状态调整（主菜单下按 F5“UTILITY”进入应用菜单，选择“FILE EXCHANGE”，回车即可。）取出随机带的软件光盘，在计算机上安装 WINFX 软件。安装完毕后启动此软件。并选择 CONNECT。后把LI-6400
15、内的“USER”文件夹下的数据文件拖到计算机中的某个文件夹下即可。使用此文件时只需要打开EXCEL 软件，文件扩展名选择所有文件，选择分隔符为逗号，并打开文件，即可使用数据。3.9 关闭仪器按“ESCAPE”按钮退回到主菜单下，叶室留一点缝隙，关闭主机。取出电池充电（注：如使用中电不足，仪器会出现声音提示和文字提示，需更换电池。更换电池时，应先将一只电池换好，然后再换另一只电池。）注意事项1. 一旦部分干燥剂颜色发红需要立即更换；3. 阳光下需将荧光屏遮盖，否则会影响其寿命；4. 注意仪器保养，轻拿轻放，信号线尽量保持伸展，勿扭曲，否则易使接口不牢，线头从接口处滑出；5. 测量时显示 “IRGA not ready”，此时需检查探头各处是否接牢；
