植物分析实验.doc

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1、 植物分析 安徽农业大学 资环学院 2008 年 6 月 植物样品分析实验目录 实验一 植物样品采集、制备和保存 (一 )植物组织样品的采集、制备和保存 (二 )瓜果样品的采集、制备和保存 (三 )籽粒样品的采集、制备和保存 实验二 植物样品的水分测定 (一 )风干植物等含水较少试样的水分测定(常压直接烘干法) (二 )幼嫩和新鲜植株等含水较多试样的水分测定(常压二步烘干法) 实验三 直接灰化法测定植物样品的粗灰分 实验四 植物样品消化 (一 )H2S04 H202法 (二 )混合加速剂消煮法 实验五 植物样品中氮的测定 (一 )奈氏比色法 (二 )半微量蒸馏法 实验六 植物样品中全磷测定 (

2、钒钼黄比色法 ) 实验七 植物样品中全钾测定 (火焰光度法 ) 实验八 植物钙镁的测定 (EDTA 络合滴定法 ) 实验九 土壤和植物中硼的测定 (一 )姜黄素比色法 (二 )甲亚胺 H比色法 (三 )植物样品干灰化及硼测定 实验十 土壤和植物锰的测定 (KMn04比色法 ) (一 )土壤有效锰测定 (二 )植物中锰的测定 实验十一 土 壤和植物中铜、锌的测定 (原子吸收分光光度法 ) (一 )土壤中有效铜、锌测定 (二 )植物中铜、锌测定 实验十二 硫氰酸盐比色法测定土壤和植物中的钼 实验十三 土壤和植物中铁的测定 (邻菲罗啉比色法 ) (一 )土壤有效铁测定 (二 )植物中铁的测定 实验十

3、四 纯蛋白质的测定 (一 )沉淀分离后消化测定 (二 )染料结合法 实验十五 氨基酸总量的测定 (茚三酮比色法 ) 实验十六 水溶性糖的测定 (蒽酮法 ) 实验十七 淀粉的测定 (HCl 水解一菲啉碘量法 ) 实验十八 粗脂肪的测定 (残余法 ) 实验十九 果蔬总酸度的测定 实验二十 维生素 C的测定 (一 )2, 6 二氯靛酚滴定法 (二 )荧光测定法 实验二十一 氮肥的测定 (一 )甲醛法 (铵态氮肥中氮的测定 ) (二 )蒸馏法 (尿素含氮量测定 ) 实验二十二 磷肥的测定 (一 )喹啉钼酸重量法 (过磷酸钙有效磷测定 ) (二 )喹啉钼酸容量法 (三 )过磷酸钙中游离酸测定 (四 )钒

4、钼黄法 (磷矿粉中有效磷测定 ) 实验二十三 钾肥测定 (一 )火焰光度法 (二 )四苯硼钠重量法 实验 一 植物样品采集、制备和保存 (一 )植物组织样品的采集、制备和保存 植物组织样品的采集首先是选定有代表性的株样。如同土壤样品的采集方法,在田间按照一定的路线多点采取组成平均样品。株样数目应视植物的种类 、 株间变异程度 、 种植密度 、株样大小或生育期以及所要求的准确度而定,一般为 10-50 株。从大田或实验区采样要注意群体的密度 、 长势 、 生育期的一致。如果为了某一特定的目的,例如缺素诊断采样时,则应注意株样的典型性,并且要同时在附近地块选取有对比意义的正常典型株样,使分析结果能

5、通过比较说明问题。用于营养诊断测定样品还 要特别注意植株的采集部位的组织器官及采样的时间。 采样的植株如需要分不同的器官测定,需要立即将其剪开,以免养分运转。剪碎的样品太多时,可在混匀后用四分法缩分至所需要量。用于营养诊断分析的样品还应尽可能立即称量鲜重。 采集的植株样品是否需要洗涤应视样品的清洁程度和分析要求而定。一般微量元素的分析和肉眼明显看得见或明知受到施肥污染的样品需要洗涤。植物样品应在刚采集的新鲜状态冲洗,否则一些易溶性养分很容易从已经死亡的组织中洗出。一般可以用湿棉布(必要时可沾一些很稀的如 1mg/L 的有机洗涤剂)擦净表面的污染物,然后 用蒸馏水或去离子水淋洗1-2 次即可。

6、一般测定不容易起变化的组分用干燥样品较方便。新鲜样品应该立即干燥,减少体内呼吸作用和霉菌活动引起的生化变化。植株样品的干燥通常分两部分:先将鲜样在 80-90 烘箱中鼓风烘 15-30min(松软组织 15min,致密组织烘 30min),然后降温到 60-70 ,逐尽水分。 干样品可用研钵或带柄刀片或齿状(用于种子样品)的磨碎机粉碎,并过筛。分析样品的细度应视称量的多少而定,通常可用圆孔直径为 0.5-1mm 筛,称量少于 1g 的样品最好过0.25mm 甚至 0.1mm 筛。过筛后应充分混 匀,保存于磨口的广口瓶中,内外各贴一样的标签。样品瓶应置于洁净、干燥处。若样品可能需要保存很常时间,

7、应进行灭菌(如 射线),然后置于聚乙烯或袋中封口保存。 样品在粉碎和储藏过程中,又会吸收空气中的水分。所以,在精密分析称样前,还必须将粉碎的样品在 65 ( 12-24h)或 90 ( 2h)再次烘干,一般常规分析则不必。称样时应充分混匀后多点采样,这在称样量少而样品相对较粗时更应特别注意。 用于微量元素分析的样本采集与制备应特别注意要防止可能引起的污染。例如在干燥箱中烘干时,应该防止金属粉末的污染。用于样品采集和粉 碎样品的研钵设备应该采用不锈钢器具和塑料网筛。如要准确分析铁,最好在玛瑙研钵上研磨。 (二 )瓜果样品的采集、制备和保存 瓜果是泛指果实、果浆和块茎、块根等。瓜果的成熟期很长,一

8、般主要在成熟期采样,必要时在此期采 2-3次。每次应在实验区或地块中随机采取 10 株以上位相同、成熟度一致的瓜果组成平均样品。平均样品的果实数,较小的如青椒不少于 40 个,番茄、洋葱等不少于 20个;黄瓜、茄子不少于 15 个;较大的如西瓜、大白菜等不少于 10个。数量多时,则可以切取果实的 1/4组成平均样品,总重以 1Kg 左右为宜。 果树的 果实采样特别要注意选择品种特征典型的样株才能比较各品种的品质。样株要注意挑选树龄、株型、生长势、载果量一致的正常株,老、幼和旺盛生长的果实都缺乏代表性。在同一果园同一样品的果树中选 3-10 株作为代表株,从每株的全部收获物中选取大小的向阳和背阴

9、的果实共 10-15 个组成平均样品。一般总重不少于 1.5Kg。 采回的瓜果样品应该冲洗、擦干。瓜果蔬菜的分析一般都要新鲜的样品。随分析的目的要求不同,有的要全部样品,有的只要可食部分。大的样品或数量多时,可均匀地切其中一部分,但所取部分中各种组织的比例应与全部的相当。 样品经切碎后用高速组织粉碎机或研钵打碎成浆状。从混匀的浆液中取样。多汁的瓜果也可在切碎后用纱布或直接用手挤出大部分汁液,将残渣粉碎后在与汁液一起混匀、称样。 新鲜瓜果的短时间内保存可以采用冷藏或酒精浸泡处理,将已经称量的新鲜样品加入足够量的沸热中性 950ml/L 乙醇,使其最后浓度达 800ml/L,再在水浴回馏 0.5h

10、。如欲制成干样则立即干燥,尽量使样品成分不发生变化。可以采用类似幼嫩或新鲜植株等含水较多试样的水分测定,即先短时间 110-120 高温,然后降到 60-70 的二步烘干法的类似步骤快速干燥样品 ,但总的烘干时间不宜长,一般为 5-10h。最好用真空烘箱。 (三 )籽粒样品的采集、制备和保存 籽粒样品一般也多用于品质分析。从个别植株上如谷类或豆类作物上采取种子样品时,应考虑栽培条件的一致性。种子脱粒后,去杂、混匀,按四分法缩分为平均样品,重量不少于 25g。若从实验小区或大田采集可按植株组织样品的采集方法,选定株样后脱粒、混匀,四分法后取得约 250 g 样品。大粒种子如花生、大豆、蓖麻等可取

11、 500g左右。采样时应选择完全成熟的种子,因为不成熟的其化学成分有明显的差异。若从成批收获物中取样,则应在保证样品有 代表性的原则下,在散装堆中设点随机取样,或从包装袋中随机取原样品,再用四分法或分样器缩分至 500g 左右。 将采取的籽粒样品风干,去杂的挑去不完整粒,用磨样机或研钵磨碎,使其全部通过0.5-1mm 筛,处于瓶或袋中,内外贴上和放置标签备用。油料作物中的大粒种子,如花生、向日葵、等,应去掉厚的果壳或种皮,只分析种仁。但棉籽种皮不容易剥掉,可用水浸泡4-6h,在用刀将种子切成两半,取出种仁。 为了防止油料作物种子在磨碎过程中损失油分,可以从采取的样品中用四分法缩分出少量样品,在

12、 70-80 干燥箱内干燥 15-18h, 取出,在瓷研钵中用研棒击碎,不能研磨。大豆和其他含油相对较少的种子则可以直接用植物搅拌机。 实验二 植物样品的水分测定 (一 )风干植物等含水较少试样的水分测定(常压直接烘干法) 一 、 方法原理 样品在 100-105情况下烘干一定时间至“恒重”,即失去的重量,被认为是水分重量,所以这是一种间接的测定水分方法。样品在高温烘烤时可能有部分易焦化 、 分解或挥发成分损失而产生水分测定的正误差,也可能因为水分未完全逐尽(特别是胶体和半胶体的试样,其结合水难以完全排除)或在样品冷却 、 称量时吸湿,或有部分油脂等被氧化增 重而造成的负误差。但在严格控制操作

13、条件下,对大多数试样而言,烘干法仍然是测定水分的简易标准法。 二 、 实验仪器 ( 1)电热烘干箱 ( 2)称量铝盒 ( 3)干燥器。宜使用经 135干燥 2-3h 的变色硅胶作干燥剂,对油脂类样品宜用吸湿力强的五氧化二磷等作干燥剂。 ( 4)分析天平 三 、 操作步骤 1. 取洁净的铝盒,打开盒盖,放入 100-105烘箱中烘 30min,取出,移至干燥器中 平衡后称重,继续烘干至“恒重”。 2. 将粉碎 、 混匀的风干样品 3-5.000g 平铺在铝盒中盖好盖,尽快地称量铝盒和内容物质量。 3. 将盖横放在盒旁,置于已经预热至 115的烘箱中,调整温度至 100-105,烘干3-4h,取出

14、盖好,移入干燥器冷却后称量,如此反复,直至“恒重”。 四 、 结果计算 水分( %) 风干基 =( m1-m2) x 100/( m1-m0) 干物重( %) 风干基 =( m2-m0) x 100/( m1-m0) 式中: m0 空铝盒的质量( g) m1 (空铝盒 +样品)的质量 m2 (空铝盒 +烘干样品)的质量 五 、 注意事项 1. 本法适用于风干植物 、 谷物种子类及其加工品 、 干茶叶 、 咖啡 、坚果、肉、海 带等绝大部分含水较少的试样。 2. 应注意样品的采集 、 储藏和粉碎时水分的变化。一般情况下,粮食样品颗粒过分干燥不好,粉碎时可造成样品的水分变化。 3. 粮油种子类样品

15、经粉碎后也可以采用 130烘干 20-60min 的快速烘干法,其结果与常规法相近。 4. 烘干法测水分时尤以大气湿度影响最大,因此实验室内相对湿度不应高于 70。称重烘干样品的速度要快。 5. 在植物样品或农产品分析中,为易于理解和接受,水分的计算习惯都以分析样品(风干后新鲜样品)为基础。如某一含水 %(鲜湿基) 为 85%的新鲜植物样品,如以干样计算 ,它的含水将为 556%,前者易于理解,后者则难理解。 (二 )幼嫩和新鲜植株等含水较多试样的水分测定(常压二步烘干法) 一 、 方法原理 对于新鲜的植株或高水分种子及新鲜果实 、蔬菜、其他液态、糊状及加热易溶解、油水分离的样品,如直接在 1

16、00烘烤其外部组织可能形成干壳,反而障碍内部水分向外扩散逸出,而且干燥后的样品常在称量容器底部形成脱落的焦状干壳,加上样品含水多,要求蒸发时面积大。因此可以采用二步烘干法,即将新鲜样置于口径较大的称量容器中,添加硅砂或硅藻土作为干燥辅助剂,先在低温( 50-55)鼓风 3-4h至 烘脆,或在沸水浴上加热 20-40min以除去大部分水,大致干燥后再在 100-105烘干至“恒重”。 二、实验仪器 ( 1)水浴锅 ( 2)称量容器 ( 3)硅砂。 40-60 目,新售的应先用 1: 1 的盐酸加热煮沸清洗,再用水洗成中性后经 135干燥,装于瓶中密封保存。 ( 4)其余同常压直接干燥法 三、操作

17、步骤 1. 取一洁净称样瓶,加 15-25g 干净硅砂,插入一根短玻棒,放入 100-105烘箱中烘 30分钟,取出,移至干燥器中平衡后称重,继续烘干至恒重。 2. 向瓶中加入剪碎、混匀的多汁新鲜样约 5g,用玻璃棒将 样品与硅砂充分混匀后再称量。将瓶和内容物先放在 50-55的烘箱中鼓风烘 3-4h,每隔 0.5h 搅拌一次,样品烘烤后用玻璃棒轻轻压碎(或者将瓶和内容物先放在沸水浴上加热 20-40min,每隔 3-5min 搅拌一次,使物料大致干燥或变成 稠厚 )。 3. 最后置于温度为 100烘箱中鼓风烘 1-2h 至恒重。 四 、 结果计算 水分 %( 鲜湿基 ) =( m1-m2)

18、x 100/( m1-m0) 干物质 %( 鲜湿基 ) =( m2-m0) x 100/( m1-m0) 式中: m0 (称样瓶 +短玻棒 +硅砂)的质量( g) m1 (称样瓶 +短玻棒 +硅砂 +鲜样)的质量 m2 (称样瓶 +短玻棒 +硅砂 +烘干样)的质量 五、注意事项 1. 铝制称样瓶放在铜水浴锅预干燥,可使其腐蚀,所以最好是放在玻璃称量瓶中加热预干燥。 2. 样品预干燥最好采用减压加热干燥法,压力 50X133.3224Pa,温度 60-70。 3. 烘干的硅砂和样品易吸湿,称量要快速。 实验三 直接灰化法测定植物样品的粗灰分 一、方法原理 总灰分常用简单 、快速、节约的干灰化法测

19、定。即将样品小心加热炭化和灼烧,除尽有机质,剩下的无机矿物冷却后称量,即可计算样品总灰分含量。由于燃烧时生成 的碳粒不容易完全烧尽,样品上可能粘附有少量的尘土或加工时混入的泥沙等,而且样品灼烧后无机盐组成有所改变,如:碳酸盐增加,氯化物和硝酸盐的挥发损失,有机磷、硫转变为磷酸盐和硫酸盐,质量均有改变。所以实际测定的总灰分只能是“粗灰分”。 二、实验仪器 ( 1)灰化器皿: 15-25ml 的瓷或白金、石英坩埚 ( 2)高温电炉:在 525-600能自动控制恒温 ( 3)干燥器:内置干燥剂为 135下烘干几小时的变色硅胶 ( 4)分析天平 ( 5)水浴锅或高温鼓风烘箱 三、实验试剂 1. 硝酸(

20、 1: 1)溶液 2. 双氧水 ( H2O2) =30% 3. 100g/LNH4NO3溶液 四、操作步骤 1. 样品预处理可以采用测定水分或脂肪后的残留物作为样品: 需要预干燥的试样。含水较多的果汁,可以先在水浴上蒸干;含水较多的果蔬,可以先用烘箱干燥(先在 60-70吹干,然后在 105下烘),测得它们的水分损失量,富含脂肪的样品,可以先提取脂肪,然后分析其残留物。谷物、豆类等干燥试样一般先粉碎均匀,磨细过 1mm 筛即可,不宜太细,以免燃烧时飞失。 2. 灰分测定:将洗净的坩埚置于 550高温电炉内灼烧 15min 以上,取出,置于干燥器平衡后称重,必要时再次灼烧,冷却后称重量直至恒重为

21、止。准确称取待测样品 2-5g(水分多的样品可以称取 10g 左右),疏松地装于坩埚中。 3. 碳化:将装有样品的坩埚置于可调电炉上,在通风橱里缓缓加热,烧至无烟,对于特别容易膨胀的试样(如蛋白质、含糖和淀粉多的试样),可以添加几滴纯 椰榄油 再同上预碳化。 4. 高温灰化:将坩埚移到已烧至暗红色的高温电电炉门口,片刻后在放进高温电炉内膛深处,关闭炉门,加热至约 525(坩埚呈暗红色),或其他规定的温度,烧至灰分近于白色为止,大约 1-2h,如果灰化不彻底(黑色碳粒较多) ,可以取出 放冷 ,滴加几滴蒸馏水或稀硝酸或双氧水或 100g/LNH4NO3溶液等,使包裹的盐膜溶解,碳粒暴露,在水浴上

22、蒸干,再移入高温电炉中,同上继续灰化。灰化完全后,待炉温降至约 200时,再移入干燥器中,冷却至室温后称重,必要时再次灼烧,直至恒重。 五、结果计算 粗灰分( %) =( m2-m1) /( m3-m1) x 100 式中: m1 空坩埚重( g) m2 灰化后(坩埚 +灰分)质量( g) m3 (空坩埚 +样品)质量( g) 六、注意事项 1. 该方法一般适用于大多数植物 茎 、叶、根、蔬菜、水果、饲料、茶叶、咖啡、坚果及其制品,牛乳、提取脂肪后的油脂类、糖及糖制品,鱼类及其制品,海带等试样。 2. 灰化容器一般使用瓷坩埚。如果测定灰分后还测其它成分,可以根据测定目的使用白金、石英等坩埚。也

23、可以用一般家用铝箔杯来代替,因其质地轻,能在 525-600的一般灰化温度范围内稳定地使用,特别是用于灰分量少、试样采取量多、需要使用大的灰化容器的样品,如淀粉、砂糖、果蔬及其它们的制成品,效果会更好。 3. 各种试样因灰分量与样品性质相差较大,其灰分测定时称样量与灰化温度不完全一样。 4. 新的瓷坩埚及盖可以用 FeCl3 和黑墨水的混合液编写号码,灼烧后即遗有不易脱落的红色 Fe2O3痕迹的号码。 5. 由于灰化条件是将试样放入达到规定温度的电炉内,如不经碳化而直接将试样加入,因急剧灼烧,一部分残灰将飞散。特别是谷类、豆类、干燥食品等灰化时易膨胀飞散的试样,以及灰化时因膨胀可能逸出容器的食

24、品,如蜂蜜、砂糖及含有大量淀粉、鱼类、贝类的样品一定要进行预灰化。 6. 对于一般样品并不规定灰化时间,要求灼烧至灰分呈全白色或浅灰色并达到恒重为止。也有例外,如对谷类饲料和茎秆饲料灰分的测定,则有规定为 600灼烧 2h。 7. 即使完全灼烧的残灰有时也不一定全部呈白色,内部仍然残留有炭块,所以应充分注意观察残灰。 8. 有时灰分量按占干物质的质量分数表示,如谷类、豆类及其制品的国际标准( ISO)及谷类产品的国际谷化协会( ICC)标准灰分测定均按此表示。 实验四 植物样品消化 (一 )(H2S04 H202法 ) 一、方法原理 先用浓 H2S04消煮植物样品,然后加入 H2O2加速氧化过

25、程,使有机态氮转化为 NH4+ N,各种形态的磷、钾也释放出来,制得的待测液 ,可供 N、 P、 K 等元素的测定。 二 、 实验试剂 1浓 H2S04 2 H202(30 ) 三、实验仪器 电炉、开氏瓶 四、操作步骤 1用 1万天平称取植物干样 0.30.4g,小心倒入开氏瓶底部,勿使沾在颈部。 2. 加入浓 H2S04 5ml轻摇开氏瓶,使植物样全部为 H2S04浸润 (可放置过夜 )。 3. 在电炉上加热,至冒白烟 (通风橱中加热,约 1520min)。 4取下开氏瓶置于开氏瓶架上,稍冷却,然后边摇边滴加 H202 10 滴。 5置于电炉上加热,至冒白烟 (25min)。 6再取下开氏瓶

26、,稍冷却,加 H202 68 滴,摇动,置电炉上加热,如 此进行几次,每次随消化溶液颜色变浅而渐渐少加 H202,直至消化液五色透明后,再微沸 5min,去尽 CO2。 7取下开氏瓶,冷却,小心加入 1020ml 蒸馏水,冷却,转移人 100ml 容量瓶中。 8用少量水洗开氏瓶 34次,洗液均移入容量瓶中,冷却后,用水定容,澄清或过滤后供N、 P、 K 测定用。 同时做空白,除不加植物样外,同样进行。 五、注意事项 1植物干样应磨细烘干。植物干样容易吸湿,称量时难以稳定,称量操作要快,最好用称量瓶称或用称量纸包起来称。如用鲜样分析,样品应剪碎,称取 35g,称样也要迅速。 2开氏瓶颈必须干燥无

27、水,以免样品沾在瓶颈部。样品倒入瓶内时,可将称量纸卷成筒状,伸入瓶内加样。如有样品沾在瓶颈上端,必须用少量水或 H2S04将其冲下,否则会造成损失。 3加人浓 H2S04的量,应视样品量多少而异,一般 1g样加 10ml 浓 H2S04。 4为了使样品能与 H2S04充分混匀,先将样品在瓶底散开,再加 H2S04轻轻摇动,注意不要将样品摇动到颈部。如样品不散开,加 H2SO4后容易结块,内部不被 H2S04浸润,会加长消煮时间。也可以先加水浸湿样品,再加 H2SO4,但不可多加水,否则由于稀释 H2S04使消煮时间大大延长。 5开始加热时应小心控制温度,以免产生过多泡沫,尤其是含蛋白质多的样品

28、。如有大量泡沫上溢,应停止,否则泡沫冲出会导致实验失败,甚至损坏电炉等。为减少泡沫生成,可加入少量消泡剂如异辛醇等;也可加 H2S04后放置过夜,然后消煮。 6. 加 H202时间不要过早,应该用 H2S04消煮 20min 以上,再加 H202。 H2O2反应后生成 H20,冲稀 H2S04使其氧化作用减弱,消煮温度降低,有时反而会延长消煮时间。 7加 H202应直接滴加在溶液中,应待开氏瓶稍冷却后加,以免局部反应过剧烈,造成氮损失,如果有样品或浓 H2S04沾在瓶颈部,可用 H202滴冲下去。 8加 H202的量应逐步减少,每次加入后加热微沸即可,使氧化和还原作用平衡进行。加入H202的次

29、数和量应视消煮液的颜色决定,消化液颜色由棕黑色呻棕红色啼棕黄色一无色,色深时可多加,色浅时应少加。消煮至五色时,再加热 5min,去除多余的 H202,否则会影响 N、P的比色测定。 9. 消煮过程中,经常摇动开氏瓶,使沾在瓶壁上的样品和 H2S04流入瓶底反应。 10. 消化完毕后,待冷却后再加水稀释,防止热 H2S04遇水过激作用,水应沿瓶壁慢慢加入,边加 边摇,冷却后再转入容量瓶,为加速开氏瓶冷却,可用冷水在瓶外冷却。 11. 方法不包括 N03- N 转化,如果包括 N03- N 在内,应先用锌粉或 Na2S203还原 N03- N。 六、思考题 1消煮过程中, H2S04, H202

30、的作用是什么 ? 2用 H2S04 H202消煮,应注意些什么 ?理由是什么 ?如果样品只测 P 和 K,是否可以多加,快加 H202以加快消化速度 ? 3开氏瓶颈如沾有少量样品,对测定会有什么影响 ?如何纠正 ? 4称样时间过长,加 H202后煮沸温度过高,加 H202时开氏瓶未冷却,所用 H202纯度低 ,这些因素对样品中 N、 P、 K 的测定有什么影响 ? (二 )混合加速剂消煮法 一、方法原理 植物样品在催化剂的参与下,用浓硫酸消煮分解,使其中的氮转化为 NH4+,制得待测溶液,可用于测定氮含量。 二、实验试剂 1浓 H2SO4 2混合加速剂: K2S04: CuS04: Se=100: 10: l 按此比例取试剂混合研磨,过 80目筛,混匀。消煮时每毫升 H2S04加 0.37g 混合加速剂。 三、实验仪器 开氏瓶、电炉、天平 (1万 ) 四、操作步骤 1准确称取干植物样品 0.2 0.3g,小心倒入开氏瓶内,注意勿 使沽在瓶颈上。 2加入混合加速剂约 1.8g,滴加几滴水使样品湿润。

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