1、1干旱胁迫对 4 种沙棘 SOD 和 POD 活性的影响摘要:以辽宁地区 4 个品种的沙棘为研究对象,通过 SOD 和 POD 指标的变化来测定了 4 个品种的抗旱性。研究结果表明:4 个沙棘品种随着干旱程度的加剧,它们的 SOD 和 POD 活性呈先增加后下降趋势;4 个品种中以太阳品种耐旱性最好,中黄果耐旱性最弱。 关键词:沙棘;SOD 指标;POD 指标 中图分类号:S791 文献标识码:B 文章编号:16749944(2016)03003802 1 引言 沙棘是落叶灌木,其对土壤和气候的适应性很强,具有耐盐碱、耐湿、耐旱等特点。它是三北防护林的一个重要树种,能减少水土流失、改善生态,其
2、高营养价值的果实也能带来可观经济效益。本试验采用干旱胁迫的方法,来研究在缺水状态下 SOD 和 POD 两个指标的变化,为沙棘的耐旱性研究提供理论指导。 2 材料与方法 2.1 试验材料与地点 试验选用 4 种长势一致的扦插沙棘苗为研究对象,品种分别为太阳、向阳、中红果和中黄果。 试验地点选在辽宁省朝阳县一林场内进行。 22.2 试验设计 2015 年 5 月选用 4 种沙棘扦插苗栽植在辽宁省朝阳县一林场内。选大小长势一致的苗木,扦插在 25 cm20 cm 规格的塑料盆中,每盆装入 3 kg 的沙质土壤作为基质。在统一管理一个月后(每隔 3 d 灌一次水,水量相同) ,于 2015 年 6
3、月 1 日当天灌水后进行水分胁迫处理,当天记为(CK) ,之后停止灌水保持干旱 5 d、10 d、15 d 和 20 d 处理,共计5 个处理,重复 3 次。每个处理的取样时间在上午的 10:00 左右,将叶片取回后置于自封袋保存,带回测定。 2.3 项目测定 (1)超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。取 05g 叶片加入的 pH 值为78 的磷酸缓冲液(PBS)00625M 冰浴研磨定容至 5 mL,12000 r/min 离心 20 min,上清液为酶提取液。酶反应体系依次加入 00625 M,pH 值为78 的 PBS 23 mL,006 mM 核黄素液 02 mL, 30 mM 蛋氨酸
4、02 mL,0003 mM EDTA 液 01mL,适量酶液,1125 mM 氯化硝基四氮唑蓝(NBT)02 mL。以不加酶液(以缓冲液代替)的试管为最大光化还原管,用缓冲液作空自管(用缓冲液代替 NBT) 。然后将各管在 4 000 Lux 下反应 25 min 进行光化还原。测定反应液的 OD500 值,根据 SOD 抑制 NBT 光化学还原的量计算酶活性。 (2)过氧化物酶(POD)活性。 称取 2 g 枣果果肉,置于研钵中,加入 6 mL 01 mol/L pH 值 78 的磷酸缓冲液(含 05 %PVP) ,在冰浴条件下研磨成匀浆,于 4 条件下,12 000 r/min 冷冻离心
5、30 min,取上清液为酶提取液测定酶活。 3POD 酶促反应体系包括:02 mL+05 mL 15 %愈创木酚(溶剂为 50 %乙醇)+21 mL 005 mol/L pH 值 65 的磷酸缓冲液+02 mL 05 %H2O2。迅速混合启动反应,同时立即开始计时,用紫外可见分光光度计于波长 470 nm 处测定其吸光值,样品重复测定三次,并以蒸馏水为参比对照,酶活力以每克每分钟吸光度变化 001 为一个活力单位。 2.4 数据处理 数据采用用 Excel 和 Spss17.0 统计软件处理。 3 结果与分析 BT(23.1ZK(干旱胁迫对沙棘超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响ZK)BT) 植
6、物在逆境中会产生超氧化物歧化酶(SOD) ,它能消除植物体内有害的潮阳阴离子,使植物免受伤害。有研究表明,SOD 活性与植物抗旱性关系显著,抗旱性强的植物体内的 SOD 活性越强。 由图 1 可知,4 个沙棘品种的 SOD 活性随着干旱程度的增加,呈先增加后下降的趋势。在第 5 d 处理处,四个品种 SOD 活性增加幅度小,在第 10 d 处理时增加幅度达到最大,都达到峰值,说明沙棘的抗逆性能力也达到了最大极限。在第 15 d 和 20 d 处理时,SOD 活性逐渐下降,说明干旱加剧超越了植物对逆境的抵抗能力,植物受到了伤害。在下降阶段,太阳品种的下降幅度最小,保持较高的活性,在第 20 d
7、处理 SOD 活性保持在 1197.34 U/gFW。而其他 3 个品种下降幅度较大,其中以中黄果 SOD 活性最低,为 698.23 U/gFW。所以 4 个沙棘品种中以太阳品种抗旱性较强,中黄果品种抗旱性较弱。 43.2 干旱胁迫对沙棘过氧化物酶(POD)活性的影响 氧化物酶(POD)是植物体内一种重要的保护酶,在植物遇到逆境时会产生过氧化物来保护植物免受伤害。有研究表明,抗旱品种强的植物体内的 POD 活性也高,但是也有研究显示抗旱品种弱的植物体内的 POD活性也有大幅增加的。 由图 2 可知,4 个沙棘品种的 POD 活性随着干旱程度的增加,呈先增加后下降的趋势。在第 15 d 处理时
8、,向阳品种 POD 活性达到峰值,为588.13 U?g-1FW,其余三个品种在第 10 d 处理时 POD 活性达到峰值,以太阳品种活性最高为 798.43 U?g-1FW,此时沙棘抗逆性达到最大极限。在之后的处理中,POD 活性随着干旱加剧活性逐渐降低。在第 10 d 处理后虽然向阳品种活性峰值出现较晚,但是太阳品种活性始终高于向阳及其他两个品种,所以 4 个品种的沙棘中,以太阳抗旱性最好,中黄果最弱。 4 结语 有研究表明植物体内酶的活性与植物在逆境的抗性有关,在一定逆境中,它能使植物增加酶的活性,来调整植物对环境的适应性。在不同的试验中酶活性出现逐渐增加或者先增加后降低的变化趋势。本试
9、验表明,4 种沙棘体内 SOD 和 POD 活性变化呈先增加后降低的趋势,后期下降趋势表明沙棘通过增加 SOD 和 POD 活性来提高抗旱性的能力是有限的。4个品种中以太阳品种耐旱性最好,中黄国品种耐旱性最弱。 参考文献: 1 5邹琦,李德全,郑国生,等.作物抗旱生理生态研究M.济南:山东科学技术出版社,1994:2429. 2 彭立新,束怀瑞,李德全.水分胁迫对苹果属植物抗氧化酶活性的影响研究J.中国生态农业学报,2004,12(3):4446. 3 闫成仕.水分胁迫下植物叶片抗氧化系统的响应研究进展J.烟台师范学院学报,2002,18(3):220225. 4 杜秀敏,殷文璇,赵彦修,等.植物中活性氧的产生及清除机制J.生物工程学报,2001,17(2):121125. 5 李丽霞,赵吉强,韩蕊莲。干旱胁迫对沙棘抗氧化酶的影响J.烟台大学学报,2006,19(1):3035.