1、分类号： 学校代号：10512学 号 ： 秘密 年湖北大学硕士学位论文（论文题名和副题名）作者姓名：朱丽娜 指导教师姓名、职称：居超明 副教授申请学位类别：硕士学位 学科专业名称：遗传学研究方向：植物遗传学论文提交日期： 年 月 日 论文答辩日期： 年 月 日学位授予单位：湖北大学 学位授予日期： 年 月 日答辩委员会主席： 直接填写相应的密级和保密期限，字体为四号黑体。公开论文此处为空。Application of the Wavelet Analysis inthe Fault Diagnosis of Rotating MachinesA Thesis Submitted for the
2、 Degree of MasterCandidate：Zhu LinaSupervisor：Prof. Ju ChaomingHubei University Wuhan, China“硕士学位论文”字 样作者姓名、指导教师姓名论文题目湖北大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。论文作者签名： 日期： 年 月 日学位论文
3、使用授权说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以允许采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存学位论文；在不以赢利为目的的前提下，学校可以公开学位论文的部分或全部内容。 （保密论文在解密后遵守此规定）作者签名： 日期：指导教师签名： 日期：2摘 要光温敏核不育水稻是一种珍贵的种质资源，为了能更好的利用该资源，必须对光温敏核不育水稻的不育基因的遗传机理及分子生物学方面进行广泛深入的研究。目前知道光温敏核不育基因的分布非常广泛，在不同的光温
4、敏核不育系中表现出较大的差异。实验室前期的研究结果显示：该不育系 HD9802S 的育性受一对主效隐性基因控制，且将该不育基因定位位于水稻第二号连锁群上的 SSR 分子标记 RM5897 和 RMAN8 之间，进一步精细定位于第二号连锁群上的 SSR 分子标记 RM12729 和 RM12732 之间。将 RM5897 和 RMAN8 之间的约 50K 的物理距离称作光温敏核不育系水稻 HD9802S候选不育基因 HDtms。在 BGI Rise Genome Database 数据库中检索到位于 RM5897 和RMAN8 之间的序列（编号为 Scaffold002359） ，运用 Fgen
5、esh 软件预测 Scaffold002359之间的可能存在的基因，并成功预测了 3 个基因 7 个编码区，对 7 个编码区分别运用amiRAN 靶的设计原则设计了 21 个干扰的靶位点。本研究中 amiRAN 双元表达载体的构建是分两步来进行的。首先是供体载体的构建：光温敏核不育系水稻 HD9802S 的候选不育基因 HDtms 的 7 个编码区 21 个靶位点的序列，利用 PCR 技术将该 7 个编码区的 21 个靶位点分别替换 miR528 的靶位点，而侧翼及环的结构与 miR528 保持一致，使其转录后 RNA 结构类似于 miR528 结构。其次是 amiRAN 双元表达载体的构建：将测序正确的中间载体通过结合转移 mating-assisted genetically integrated cloning（MAGIC）将目标表达单元转移到双元表达载体，并通过电转法转入农杆菌 EHA105 中。为了能够进一步探索候选不育基因 HDtms 的精确位置和功能，我们将构建好的双元 amiRNA 表达载体通过农杆菌介导的方法转入模式籼稻 9311 中，目前带有抗性的水稻小苗已经分化出了，对其相关性状的研究有待进一步的验证。关键词：水稻 amiRAN 表达载体 转基因 PCR 光温敏核不育基因AbstrackKey Words：
