1、Waters UPLC-QTOF 高分辨液质联用仪操作规程一、 仪器操作1. 准备工作1) 检查管道氮气、高纯氩气气路与压力是否正常。如不合适请调整气路与气源。2) 检查应急供电 UPS 是否工作正常。如不合适请联系相关维修人员。3) 检查实验室环境，包括温度、湿度等是否正常。温度保持在 21-25 oC，一天内温度变化波动不超过 5 oC；湿度保持在 70%以下。如不合适请联系相关维修人员4) 确认各流动相瓶内溶液体积大于瓶体积 50%；有机流动相使用 HPLC级与 HPLC 级以上的乙腈与甲醇；离子对添加剂使用 HPLC 级与 HPLC级以上的甲酸、甲酸铵、乙酸铵等；高纯水存放时间不超过一
2、周。5) 流动相中仅能加入 5 mM 浓度以下的挥发性缓冲盐，如甲酸铵、乙酸铵等。6) 所有新配置的流动相均充分混匀后在超声 10 分钟，排除气泡。2. 开机过程：1) 打开电脑，输入密码: waters 进入 windows 的桌面。2) 打开液相各个模块的电源（没有顺序） 。3) 打开氮气发生器的电源（或液氮瓶的开关） ，确证压力指示在 100psi；打开氩气减压阀确证压力指示在 7psi。4) 打开 MS tune 窗口，点击右下角 operate 图标，右侧方块变绿色后仪器可以使用。5) 在 Inlet Method 窗口中编辑液相方法并保存。6) 在 Inlet Method 窗口中
3、，使用 Start up System 功能平衡液相系统。7) 在 MS tune 窗口中设置质谱的参数。 （主要是 MS tune/ESI 界面中各种电压，气体和温度）8) 在 MS ConsoleXevo QTOFIntellistart 窗口中完成 :Creat calibration 和Lockspray Setup 两项内容，结果均应为 Pass。9) 在 MS method 窗口中编辑质谱方法，确保调用最新的 Lockspray 方法和Enable MS event。10) 在 Masslynx 的主界面上编辑进样序列（确保 Sample name，ms method, inlet
4、 method, bottle position and Injection volume 都选择相应的参数） 。11) 点击进样按钮开始进样。3. 待机过程：1) 待机前，将色谱流动相流路切换至 90%乙腈水溶液，以 0.3 mL/min 流速冲洗色谱柱 20 分钟。2) 在 5 分钟内将色谱流速从 0.3 mL/min 缓慢降至 0 mL/min。3) 打开 MS Tune 窗口，将质谱流路均切换至“Wash”模式，充分清洗质谱流路。4) 点击“Stand by” 按钮，仪器进入待机模式4. 长假关机过程：1) 打开 MS tune 窗口，点击 Vacuum/Vent，在弹出的对话框中选择
5、 yes。2) 等待约 5 分钟。 （在这个过程中应该能听到分子泵降速的声音，也可以观察 MS tuneViewvacuum, 三个 Turbo speed 的转速会逐渐下降，直至三个分子泵的转速均降至 5 以下，表明真空已经关闭） 。3) 关闭所有软件和电脑。4) 关闭液相所有模块的电源。5) 关闭质谱前面板的电源。6) 关闭氮气发生器的电源（或是液氮罐的开关） 。7) 关闭氩气减压阀。8) 关机结束。二、 仪器维护1. 做完实验：将 sample spray 和 lockspray 用 50:50=MeOH：H20 冲洗防止毛细管的堵塞；2. 平时放在 source standby; 周末放在 instrument standby；3. 偶尔检查真空泵油的液面位置；4. 废气排放空间通畅；5. 更换密封垫（建议一年一次）,三、 质谱可能存在的问题与排查方法1. 可能存在的问题1) 灵敏度突然间降低2) 空白溶液背景很高吗2. 排查方法1) 检查喷雾是否稳定2) 检查各个温度，气体流速，电压3) 检查进样系统是否正常工作4) 检查 LE 溶液浓度是否正确，长时间放置则需要重新配制5) 检查 Lockspray 毛细管是否堵塞，是否漏液，喷针位置是否正常6) 准备好仪器序列号，拨打 800-820-2676 获取维修支持。
