1、可溶性糖含量测定（蒽酮法）材料仪器：分光光度计、天平、水浴锅、大试管、三角瓶、容量瓶 100ml、量筒 25ml、移液管 5ml 一支、1ml 一支、小漏斗药品：标准葡萄糖溶液、准确城区无水葡萄糖 200mg，放入 200ml 容量瓶中，加入蒸馏水定容 ，使用时稀释 10 倍（100ug/ml）蒽酮试剂：称取 0.1g 蒽酮溶于 100ml 稀硫酸中（76ml 浓硫酸稀释成 100ml） ，贮于棕色瓶内，冰箱保存，可用数日。方法1、葡萄糖标曲管号项目空白 1 2 3 4 5标准葡萄糖液/ml 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1蒸馏水 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0蒽酮试剂 5 5
2、5 5 5 5将各管摇匀，在沸水浴中煮沸 10 分钟，取出冷却，在 620nm 波长处比色，以空白调零点，记录光密度值，绘制标准曲线。2、样品中可溶性糖的提取 称取减碎新鲜样品 0.51g，放入三角瓶 50ml 中，再加入 25ml蒸馏水，放入沸水浴中煮沸 20min，取出冷却，过滤入 100ml 容量瓶中，用热水冲洗残渣数次，定容至刻度。3、测定管号项目空白 1 2 3 4 5样品提取液 0 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5蒸馏水 1 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5蒽酮试剂 5 5 5 5 5 5在分光光度计上比色，测出光密度值，在标曲上查出相应含糖量（ug）4、结果计算可溶性
3、糖含量%=【（糖含量（ug）稀释倍数）/ （样品质量 106） 】100有机酸测定仪器：天平、刀、研钵、漏斗、玻璃棒、水浴锅、滴定管、滤纸、移液管 10ml 一支，容量瓶 50ml、三角瓶 50ml，量筒 25ml1 个药品：0.1mol/L 氢氧化钠，1%酚酞，石英砂步骤1、城区 5g 番茄果肉，放入研钵中，加少许石英砂研磨成匀浆，用蒸馏水洗入 50ml 三角瓶中，加水约 30ml，放在 80水浴锅中浸提 30 分钟，每隔 5 分钟搅拌一次。取出冷却，过滤入 50ml 容量瓶中，并用蒸馏水洗残渣数次，定容至刻度，充分摇匀作测定用。2、两区 10ml 样液放入 50ml 三角瓶中，加三滴酚酞指
4、示剂，用 0.1mol/L氢氧化钠滴定至微红色，摇 1min 不褪色为终点，取 3 次平均值计算结果有机酸含量=(A0.1KC)(WD)100A 滴定时消耗的氢氧化钠量，0.1=410 -3 g/mlK=0.67C 稀释总量W 样品质量D 测定时所取样液量 ml抗坏血酸测定（2,6-二氯酚靛酚法）仪器 研钵、漏斗、玻璃棒、定量滤纸、滴定管、移液管、容量瓶、三角瓶药品 2%草酸溶液：溶解 20g 草酸结晶与 200ml 水中，然后稀释至 1000ml。200ml0.01% 2,6-二氯靛酚钠溶液：称区 2,6-二氯靛酚钠 60mg，放入容量瓶中，加热的蒸馏水 100-150ml，滴加 0.01m
5、ol/L 的氢氧化钠 4-5 滴，强烈震动 10 分钟，冷却后加水至刻度，摇匀后用精密滤纸过滤于棕色瓶内，贮于冰箱中备用。有效期一周。抗坏血酸标准溶液：准确称取 20mg 抗坏血酸，溶于 2%草酸溶液中，定容至 200ml，混匀，吸取比液 10ml，再以 2%草酸溶液稀释定容至 200 毫升。方法样品处理和提取城区适量 5g 样品置研钵中，加 4 毫升 2%草酸，研磨成匀浆，用玻璃棒将样品提取液转移到 50 毫升容量瓶中，残渣用草酸洗 2-3 次和提取液一并转入容量瓶中，最后用 2%草酸定容至刻度，摇匀过滤，滤液备用。空白的测定吸取 10ml2%草酸，放入 50 毫升三角瓶中，用 2,6-二氯
6、靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15 秒内部褪色为止，记录所用滴定液体积（重复三次，取平均值） 。2,6-二氯靛酚钠溶液滴标定吸取标准抗坏血酸溶液 10ml，放入 50ml 三角瓶中，立即用所要标定的 2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于 15 秒内不褪色，记录用滴定液体积（重复三次，取平均值） 。按下式计算 K 值，K= 20G1vK 为 1ml2,6-二氯靛酚钠所能氧化抗坏血酸的质量，G 为称取抗坏血酸的质量 V 滴定 10 毫升抗坏血酸溶液所用去 2,6-二氯靛酚钠的体积与丁丁空白所用体积的差值。样品测定 吸取滤液 10 毫升，放入 50 毫升三角瓶中，立即用要标定的 2,6-二氯靛
7、酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于 15 秒内不褪色，记录用滴定液体积（重复三次，取平均值） 。结果与分析X= 100滤空样 ）（ WVKx 为 100g 样品中所含维生素含量（mg/100g）w 为称取样品的质量（ g） ；v 样为滴定样品所用的 2,6-二氯靛酚钠溶液的体积（ml） ，v 滤为样品测定测定时所用滤液体积（ml） ；V为样品提取液稀释之总体积，K 为上 k 值。可溶性总糖的测定仪器：分光光度计；20ml 刻度试管；刻度吸管（5ml ，1ml） ；记号笔；吸水纸适量试剂 1、蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮 1g，溶于 50ml 乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶
8、析出，可微热溶解。2 浓硫酸（比重 1.84）材料与方法1 标准曲线的制作葡萄糖标准曲线的制作取 6 支 20ml 试管，编号，按下表数据配置一些列不同浓度的标准葡萄糖溶液。在每管中均加入 0.5ml 蒽酮试剂，再缓慢加入 5ml 浓硫酸，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸 10 分钟，取出冷却至室温，在 620nm 波长下比色，测各管溶液的光密度值，以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。管号 1 2 3 4 5 6标准葡萄糖原液(ug)200ug/ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1蒸馏水 0 1.8 1.6 1.4 1.2 1葡萄糖含量（ug） 0 40 80
9、 120 160 2002 样品中可溶性糖的提取称取 1 克样品，研磨成匀浆，然后转入 20ml 刻度试管中，用 10ml 蒸馏水分次洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中，置沸水浴中加盖煮沸 10 分钟，冷却后过滤，滤液收集于100ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀备用。3 糖含量测定用移液管吸收 1ml 提取液于 20ml 具塞刻度试管中，加 1ml 水合 0.5ml 蒽酮试剂，再缓慢加入 5ml 浓硫酸（注意：浓硫酸遇水会产生大量的热） ，盖上试管塞后，轻轻摇匀，再置沸水浴中 10 分钟（比色空白用 2 毫升蒸馏水与 0.5 毫升蒽酮试剂混合，并一同于沸水浴保温 10 分钟） 。冷却至室
10、温后，在波长 620nm 下比色，记录光密度值。查标准曲线上得知对应的葡萄含量（ug） 。结果计算样品含糖量（g/100g 鲜重） =考马斯亮蓝 G-250 染色法测定蛋白含量标准蛋白质溶液（100ug/ml 牛血清蛋白）：称取牛血清蛋白 25mg，加水溶解并定容至100ml，吸取上述溶液 40ml，用蒸馏水稀释至 100ml 即可。 4下保存备用。考马斯亮蓝 G250 溶液：称取 100mg 考马斯亮蓝 G250，溶于 50 毫升 90%乙醇中，加入100ml85%（W/V）的磷酸，再用蒸馏水定容到 1000 毫升，贮于棕色瓶中。常温下可保存一个月。材料与方法标准曲线的绘制：取 6 支试管，
11、编号后，按下表加入试剂，混合均匀后，向各管中加入5ml 考马斯亮蓝 G250 溶液，摇匀，并放置 2min 后，以 0 号试管为空白管凋零，在595nm 下比色测定吸光度（比色应在 1h 内完成） 。以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。管号试剂0 1 2 3 4 5标准蛋白质 ml 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1蒸馏水量 ml 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0蛋白质含量 ml 0 20 40 60 80 100样品测定1）样品提取：称取鲜样 0.25g0.5g，用 5ml 蒸馏水研磨成匀浆后，3000r/min 离心 10 分钟，上清液备用。2）吸取样品提取液 1ml（视蛋白质含量是当稀释） ，放入试管中（每个样品重复 2 次） ，加入 5 毫升考马斯亮蓝 G250 溶液，摇匀，放置 2 分钟后，在 595nm 波长下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。样品中蛋白质含量（mg/g）=CV T/(VSWF1000)式中 C-查标准曲线值 ugVT-提取液总体积 mlWF-样品鲜重 gVS-测定时加样量 ml
