1、1实验一 葡萄糖的一般杂质检查一、目的要求1、熟悉药物中一般杂质限量检查的方法及限量计算方法。2、熟悉药物中一般杂质检查的目的和意义。3、掌握氯化物、硫酸盐、铁盐的检查原理。二、实验原理(一)葡萄糖的生产工艺葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液，再经脱色、浓缩结晶制得。国内生产方法如下：1、酸水解法 以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。2、双酶水解法 以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。3、酸酶水解法 以盐酸为液化剂，糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖。根据葡萄糖生产工艺特点，应进行氯化物、硫酸盐、铁盐等一般杂质检查，进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检查。2(二 )各种杂质检查原
2、理l、氯化物检查法氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下处理生成的氯化银浑浊相比较，测定供试品中氯化物的限量。2、硫酸盐检查法药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。3、铁盐检查法三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。进行葡萄糖的铁盐检查时，需在显色前加硝酸 3 滴，煮沸 5min，使 Fe2+氧化为 Fe3+。由于硝酸中可能含有亚硝酸，亚
3、硝酸也能与硫氰酸根离子反应生成红色的亚硝酰硫氰化物，影响比色，因此加入显色剂之前加热煮沸有助于除去氧化氮，以消除氧化氮生产的亚硝酸干扰。三、试剂与器材1、材料葡萄糖(药用) 。32、试剂(1)酚酞指示液：取酚酞 l g，加乙醇 100ml 使溶解，即得。(2)氢氧化钠滴定液 (0.02molL) ：取氢氧化钠 4.000g，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液 5.6ml，加新沸过的冷水使成 1000ml，摇匀，精密量取溶液 2 m1，置 10ml 容量瓶中加水稀释至刻度，即得。(3)标准氯化钠溶液：称取氯化钠 0.165g，置 1
4、000ml 容量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。(4)稀硝酸：取硝酸 105ml 加水稀释至 1000ml，即得。(5)硝酸银试液(0.1 molL)：取硝酸银 17.5g，加水适量使溶解成 1000ml，摇匀，置玻璃塞的棕色玻瓶中，密闭保存。(6)标准硫酸钾溶液：称取硫酸钾 0.181 g，置 1000ml 容量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每 1ml 相当于 100 g 的 SO4)。(7)稀盐酸：取盐酸 234 ml，加水稀释至 1000ml，即得。(8)25氯化钡溶液：取氯化钡 6.10g，加水适量使溶解成 10 ml，即得。(9)标准铁溶液：称取硫
5、酸铁铵FeNH 4(SO4)212H2O 0.863g，置 1000 ml容量瓶中，加水溶解后，加硫酸 2.5 ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。(10)碘试液 (0.05 molL) ：取碘 13.0g，加碘化钾 36g 与水 50 ml 溶解后，加盐酸 3 滴与水适量使成 1000 ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过，置玻璃塞的棕色玻瓶中，密闭，在凉处保存。(11)磺基水杨酸溶液：取磺基水杨酸 lg，加水适量使溶解成 5ml，即得。(12)硫氰酸铵溶液：取硫氰酸铵 30g，加水适量使溶解成 100 ml，即得。(13)其它：乙醇、石蕊试纸。3、器材量筒(100ml 1 个、500 ml
6、2 个、1000ml 1 个)；刻度吸管(1ml 1 支、5ml 1 支、10ml 1 支、20ml 1 支)；容量瓶(10ml 1 个、100ml 2 个、1000 ml 2 个)：移液管(2ml 1 支)；聚乙烯塑料瓶(500ml 2 个)；4玻璃塞的棕色玻瓶(1000ml 2 个)；无色广口瓶(1000ml 2 个)；纳氏比色管(50ml 6 支)；烧杯(50ml 6 只、100ml 4 只)；试管(50ml 4 支)；垂熔玻璃滤器 1 个，加热回流装置，电子天平，水浴锅，电炉。四、实验步骤l、酸度取本品 2.0g，加水 20 ml 溶解后，加酚酞指示液 3 滴与氢氧化钠滴定液(0.02
7、molL)0.20ml，应显粉红色。2、乙醇溶液的澄清度取本品 1.0g，加 90乙醇 30ml，置水浴上加热回流约 10min，溶液应澄清。3、氯化物(1)标准氯化钠溶液的制备精密量氯化钠贮备液 10ml，置 100ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每 lml 相当于 10 g 的 Cl)。(2)供试溶液的配制取本品 0.60g，加水溶解使成 25 ml (溶液如显碱性，可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应)，再加稀硝酸 10ml，溶液如不澄清，应用事先已洗淨 Cl-的滤纸滤过；置 50 ml 纳氏比色管中，加水使成约 40ml，摇匀，即得供试溶液。(3)对照溶液的配制取标准氯化钠溶液
8、 6.0ml，置 50ml 纳氏比色管中，加稀硝酸 10ml，用水稀释使成约 40 ml，摇匀，即得对照溶液。(4)检查于供试溶液与对照溶液中分别加硝酸银试液(0.1 molL)1.0ml，用水稀释使5成 50 ml，摇匀，在暗处放置 5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较所产生的浑浊，样品管不得比对照管更浓(0.01)。4、硫酸盐(1)标准硫酸钾溶液的制备称取硫酸钾 0.181g，置 1000ml 容量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每 lml 相当于 100 g 的 SO4)。(2)供试溶液的配制取本品 2.0g，加水溶解使成约 40ml(如溶液显碱性，可滴加盐
9、酸使遇石蕊试纸显中性反应)；溶液如不澄清，应滤过；置 50ml 纳氏比色管中，加稀盐酸 2 ml，摇匀，即得供试溶液。(3)对照溶液的配制取标准硫酸钾溶液 2.0ml，置 50 ml 纳氏比色管中，加水使成约 40 ml，加稀盐酸 2 ml，摇匀，即得对照溶液。(4)检查于供试溶液与对照溶液中分别加入 25氯化钡溶液 5m1，加水稀释至50ml，充分摇匀，放置 10min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较所产生的浑浊，样品管不得比对照管更浓不得更浓(0.01)。5、铁盐(1)标准铁溶液的制备精密量取硫酸铁铵贮备液 10ml，置 100ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每 1
10、ml 相当于 10 g 的 Fe)。(2) 检查取本品 2.0g，加水 20ml 溶解后，加硝酸 3 滴，缓缓煮沸 5 min，放冷，加水稀释使成 45ml，加硫氰酸铵溶液(30100)3ml，摇匀，如显色，与标准铁溶液 2.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不得更深(0.001)。66、亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品 1.0g，加水 10ml 溶解后，加碘试液(0.05molL)l 滴，应即显黄色。7、蛋白质取本品 1.0g，加水 10ml 溶解后，加磺基水杨酸溶液(15)3ml，不得发生沉淀。五、数据记录及处理样品名称 来源 批号数据记录检查项目 现象及数据 结果 酸度乙醇溶液的澄清度氯化物
11、硫酸盐铁盐亚硫酸盐与可溶性淀粉7蛋白质结论：六、杂质限量计算葡萄糖中的杂质氯化物、硫酸盐、铁盐的检查方法采用对照法，其计算公式为：因一定量的供试品(S)中所含杂质的量是通过一定量标准溶液进行比较，杂质最大允许量=标准溶液体积(V) 标准溶液浓度(C)，所以杂质限量(L)可表示为：l、氯化物的检查2、硫酸盐的检查3、铁盐的检查七、注意事项81、纳氏比色管的选择与洗涤比色或比浊操作，一般均在纳氏比色管中进行，因此在选用比色管时，必须注意使样品与标准管的体积相等，玻璃色质一致，最好不带任何颜色，管上的刻度均匀，如有差别，不得大于 2mm。纳氏比色管用后应立即冲洗，比色管洗涤时避免用毛刷或去污粉等洗刷
12、，以免管壁划出条痕影响比色或比浊。2、平行操作原则进行比色、比浊检查时，样品溶液与对照溶液的实验条件应尽可能一致，严格按照操作步骤平行操作，按规定顺序加入试剂。比色、比浊前可利用手腕转动360的旋摇使比色管内试剂充分混匀。比色方法一般是将两管同置于白色背景上，从侧面观察；比浊方法是将两管同置于黑色或白色背景上，自上而下地观察。3、实验中应准确选用量具，杂质检查中允许的误差为10，量筒的绝对误差为 1ml，刻度吸管的绝对误差为 0.010.1 ml，在实验中，应根据样品、标准液的取用量正确选用量器。例如，取标准液 2ml 应选择刻度吸管或移液管吸取标准液。取样品 2g，允许的误差为 0.2g，可
13、选用称量精度为 0.1g 的普通天平。4、进行铁盐检查时，采用硝酸将 Fe2+氧化为 Fe3+，标准液应与样品液同法操作。样品液加硝酸煮沸时，应注意防止暴沸，必要时补充适量水。八、思考题l、比色、比浊操作中应注意什么原则?2、进行葡萄糖的铁盐检查时，在加入显色剂之前应如何操作?为什么?实验二 固体药物制剂的常规检查一、目的要求9l、熟悉固体药物制剂中片剂和胶囊剂的常规检查项目。2、掌握片剂的常规检查操作方法。3、掌握胶囊剂的常规检查操作方法。4、掌握干燥失重测定的操作技能。二、实验原理(一)片剂的常规检查l、重量差异检查片剂的重量差异指按规定称量方法测定每片的重量与平均片重之间的差异程度。中国
14、药典(2010 年版)规定片剂重量差异不得超过下表限度的规定。片剂的重量差异限度要求平均片重或标示片重 重量差异限度0.30g 以下 7.50.30g 及 0.30g 以上 52、崩解时限检查崩解指固体制剂在检查时限内全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的囊壳外，应通过筛网。测定时使固体制剂在液体介质中，随着崩解仪器吊篮的上下移动，发生崩解成碎粒、溶化或软化的现象，以供试品通过筛网或软化的时间来控制。(二) 胶囊剂的常规检查l、装量差异检查胶囊剂的装量差异指按规定称量方法测定每粒胶囊的内容物的装量与平均装量之间的差异程度。中国药典(2010 年版)规定胶囊剂装量差异不得超过下表限度的规
15、定。胶囊剂的装量差异限度要求平均装量 重量差异限度100.30g 以下 100.30g 及 0.30g 以上 7.52、崩解时限检查同片剂(三)干燥失重测定法干燥失重是指药物在规定条件下，经干燥后所减失的重量，根据所减失的重量和取样量计算供试品干燥失重的百分率。干燥失重检查法主要控制药物中的水分，也包括其他挥发性物质如乙醇等。三、试剂与器材l、材料维生素 B1片(规格 10mg)，对乙酰氨基酚片(规格 0.5g) ，诺氟沙星胶囊(规格 0.1g)。2、器材烧杯(1000ml 2 只)电子天平，崩解时限测定仪，电热恒温干燥箱，温度计(2 根)，研钵，扁形称量瓶(8 只)，培养皿(4 个)，干燥器(1 只)。四、实验步骤(一)性状观察维生素 B1片的性状,本品为白色片。观察对乙酰氨基酚片的性状,本品为白色片。观察诺氟沙星胶囊的性状,本品内容物为白色至淡黄色颗粒和粉末。(二)片剂的常规检查l、重量差异检查分别取维生素 B1片 20 片、对乙酰氨基酚片 20 片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定每片的重量，每片重量与平均片重相比较，按表中的规定，超出重量差异限度的不得多于 2 片，并不得有 1 片超出限度 l 倍。2、崩解时限检查
