1、1沁 水 县 人 民 医 院 检 验 科 文件编号 XK-9第 1 页 共 2 页SOP 文件第 2 版 第三次编写主 题: Haier 低温冰箱操作维护规程 颁布日期 2010 年 7 月1. 仪器分析原理和适用范围1.1 原理 Medical 低温冰箱采用 150W 的 HERMETIC 压缩机制冷。1.2 适用范围 适用于需要在低温条件下保存的血清、血浆、试剂、菌珠等。2. 仪器性能参数 2.1 有效容量：222L。2.2 制冷剂：R-509。2.3 温度控制与显示：电子控制；-20-30 ，-30-40两个范围。2.5 环境条件：温度：1630。2.6 电源：电压：220Vac，50H
2、z。2.7 大小和重量：924mm640mm883mm，52。3.操作规程3.8.11 该机 24 小时待机。3.8.12 一般除霜：为了保障制冷效率，在内部积霜厚度超过 5mm 时，应除霜。不必关闭仪器电源，用冰箱提供的附件（除冰器）轻柔地剥离霜层。3.8.13 全面除霜：3.3.1 将冰箱内的物品移出，将温度调节旋钮调至“DEF” 。3.3.2 完全打开冰箱门。3.3.3 用除霜器移除霜层。4. 维护保养项目和频率频率 每月 需要时保养执行时间 每月 28 日前 需要时更换1 清洁外表面 1.添加制冷剂2 用柔软的干布和中性洗涤剂清洁仪器内部，并用干布擦干净。3 用吸尘器清洁仪器后面的压缩
3、机等的灰尘5. 校准方法和程序常规校准频率 需要时的校准 校准方式每年一次 1.重要零件更换时。 自校或外校（深圳市计量检测站）6. 期间核查项目和频率：每天用经过校准的温度计检测其实际温度。7. 相关记录：仪器使用记录、定期维护记录、期间核查记录、校准记录编写人:审核人;批准人:生效日期: 年 月 日2沁 水 县 人 民 医 院 检 验 科 文件编号 XK-09第 1 页 共 2 页SOP 文件第 2 版 第一次编写主 题: Baso 离心机操作维护规程 颁布日期 2010 年 11 月1. 仪器分析原理和适用范围1.1 原理：主要利用绕固定旋转轴旋转的液体在离心力场的作用下做加速的沉降运动
4、,从而对液体中的不同密度、不同体积或不同形状的组分进行分离、精制和纯化的仪器设备 ，广泛应用于生物、医药和化工、食品的行业生产、科研、教学中。1.2 适用范围：用于完全抗体及不完全抗体的抗体筛查、交叉配血及血型鉴定。同时可用于血液成分的离心分层及其他实验相关血清试验。2. 仪器性能参数 2.1 最大转速：4000rpm2.2 时间控制：1-99min59sec 连续短时运转 2.3 最大容量：121015m12.4 噪音：75dBA(最大转速时 )2.5 最大离心力：500-1770*g2.6 尺寸(cm)：293224。52.7 重量：8.5Kg3. 操作规程3.1 打开离心机电源开关3.2
5、 按 OPEN 键,同时按手动安全门扣,打开离心机上盖3.3 放入要离心的试管(注意试管的三点配平 ),关上离心机上盖 .3.4 本机出厂预设三种工况供选择:工况 1:3000rpm(1000g)10 秒参数固定,供交叉配血、血型鉴定、抗体筛检等试验用。工况 2:1000rpm(1000g)60 秒参数固定,供洗涤血细胞。工况 3:3000rpm(1000g)180 秒参数固定，供分离血清及血浆用。3.5 预设操作按工况选择键 RECALL（工况数字闪烁） ，按 PROG 键选择工况数作为要预设的地址，按 RECALL 键确定按 RPM（转速数字闪烁）按上、 下键调转速，按 RPM 键确定，按
6、TIME 键（时间数字闪烁）按上、下键讯时间，按 TIME 键确定，最后按 STORE 键连续 2次储存。3.6 盖上离心机上盖按 START 键开始离心。3.7 听到“嘟”的长音，表示离心结束，可以打开上盖取出试管，全部离心实验做完后，关闭离心电源。4. 维护保养项目：41 操作前后的检查：（1）检查内部有无杂质或水滴，并清除杂质及水滴（2）检查转盘是否松动，如果松动请锁紧后再使用（3）检查门盖是否可盖紧，并检查螺丝是否松动，如果不正常，应暂停使用并通知当地经销商。（4）检查接地线是否正确连接42 每日应检查项目：清理机内的污迹，检查转盘是否有刮伤、变形或腐蚀，如有上述情形请联络当地经销商3
7、检查。43 每年应检查之项目检查转盘固定螺帽是否松动，若发现转速表的数值无法符合实际转速，请联络当地经销商检查。44 清洗：当样品弄脏转盘时，操作人员请戴好橡胶手套，用少量清洁剂擦拭，并用干布擦干。消毒转盘时，温度不要超过 100（不得长时间加温） ，严禁使用蒸汽消毒。5 注意事项51 第一次使用离心机前请祥细阅读离心机使用说明书52 离心机应安装在平稳的工作台面上，离心机运行过程中请不要移动53 严禁使用电源稳压器54 严禁在离心机上盖上放置杂物55 严禁单一试管进行离心56 严禁开盖离心；离心机运行过程中，严禁添加和放置物品，保证运转安全57 停电无法正常打开上盖时，可用细木杆插入离心机右
8、侧小孔并用力推，同时按手动安全门扣，即可打开上盖取出离心试管；严禁在离心机运行过程中强行打开上盖58 离心机运行过程中如出现不正常的振动或噪音，请立刻停止运转，关闭电源进行检查。在故障排除后方可进行离心实验。59 如离心机出现不工作报警，请检查转盘是否配平，配平后关上电源开关再打开，按面板 OPEN 键，清除报警再按 START 键进行工作如继续出现报警，则说明有其它故障，需进行修理。510 如发现，试管擦壁、转速正常，应检查离心机底板与机壳连接处，离心机铁板应镶入塑料机壳凹槽里511 离心机开盖向后翻时请不要用力过猛，以免损伤机盖6 校准：厂家校准。编写人:审核人;批准人:生效日期: 年 月
9、 4沁 水 县 人 民 医 院 检 验 科 文件编号 XK-01第 1 页 共 2 页SOP 文件第 2 版 第三次编写主 题: ABO 血 型 正 反定 型 鉴 定 颁布日期 2010 年 7 月1、方法原理:单克隆抗体根据红细胞上有或无 A 抗原或（和）B 抗原，将血型分为 A 型、B 型、AB 型和 O 型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定 A B O 血型。所谓正定型，是用已知抗 A 和抗 B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或（和）B 抗原；所谓反定型，是用已知 A 红细胞 B 红细胞来测定血清中有无相应的抗 A 或（和）抗 B。2、使用的标本种类和收集方法
10、2.1、受检者 5红细胞悬液红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤 3 次，取压积红细胞 1 滴加入生理盐水 16 滴（0.8ml）配成 5的红细胞悬液。2.2、受检者血清采取受检着静脉血 2-3ml，置水浴箱中至完全凝固，3000 转/分钟离心 5 分钟，分离上层血清备用。2.3、标本接收2.3.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外 2.3.2 规定内容） 。2.3.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。2.4、标本容器要求：洁净一次性玻璃试管3、使用的试剂3.1、抗 A 、抗 B
11、定型试剂（单克隆抗体）3.1.1、批准文号：国药准字 S109600813.1.2、生产厂家：长春博德生物技术有限责任公司3.1.3、保存条件：2-8避光保存，有效期内使用。25 A、B 及 O 型试剂红细胞盐水悬液2.5.1、制备方法分别采取已知 A、B、O 三种血型的红细胞，经盐水洗涤 3 次，经盐水洗涤 3 次，取压积红细胞 1 滴加入生理盐水 16 滴（0.8ml）配成 5的红细胞悬液。2.5.2、保存条件：配制好的 5的红细胞悬液在试管上注明红细胞血型及配制时间，2-8避光保存，有效期 3 天。4、仪器： 4.1、仪器型号:Anke 型医用离心机4.2、仪器厂家：上海安亭科学仪器厂4
12、.3、许可证号：字 2001 第 2030436 号4.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序。5、操作步骤、报告结果5.1、 正定型：取清洁试管 2 支作好标记，分别加入抗 A（蓝色）和抗 B（黄色）标准血清各 2 滴。每管加入被检者 5红细胞悬液各 2 滴，混匀，1000 转/分钟离心一分钟或在室温放置 1 小时，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。5.2、反定型：取清洁试管 2 支作好标记。用滴管分别加入被检者血清各 2 滴，A 和 B 型 5标准红细胞悬液各 2 滴。混合。立即以 1000 转/分钟离心 1 分钟，轻轻摇匀，涂至载玻5片上，用显微镜观察是否凝集。5.3、结果
13、见下表：抗 A 抗 B 血 型 A 红细胞 B 红细胞+ - A - +- + B + - - O + + + AB - -注：（） 凝集（） 不凝集6、注意事项6.1、标准血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。6.2、试剂红细胞以 3 个健康者同型新鲜红细胞混合，用生理盐水洗涤 3 次，以除去存在于血清中的抗体及可溶性抗原。6.3、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。6.4、操作方法应按规定，一般应先加血清， 然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。6.5、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。6.6、观察
14、时应注意区别真假凝集。6.7、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。7、临床意义输血已成为临床上必不可少的治疗手段，输血必须输入 A B O 同型血，如输入异型血，输入的红细胞可能迅速破坏，导致严重的溶血反应， 常常威胁生命甚至造成死亡。8、方法的局限性：本方法不能检测出亚型。参考文献:全国临床检验操作规程产品说明书编写人:审核人;批准人:生效日期: 年 月 日6沁 水 县 人 民 医 院 检 验 科 文件编号 XK-02第 1 页 共 1 页SOP 文件第 2 版 第三次编写主 题: Rh（抗 D）血 型 鉴 定 颁布日期 2010 年 7 月1.原理：Rh 血型系统通过输血或妊娠可产生免疫
15、性抗体，当遇有相应抗原，可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治，可导致患者残废或死亡。目前，一般应用 5 种分型血清来检查红细胞抗原。临床上，凡带有 D 抗原者，称为 Rh 阳性，不带 D 抗原者，称为 Rh 阴性。2、使用的标本种类和收集方法2.1、受检者 2-3红细胞悬液红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤 3 次，取压积红细胞 1 滴加入生理盐水 32 滴（1.6ml）配成 2-3的红细胞悬液。2.2、标本接收2.2.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外 2.3.2 规定内容） 。2.2.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标
16、本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。2.3、标本容器要求：洁净一次性塑料试管3. 仪器和试剂：3.1、仪器型号：Anke 型医用离心机3.2、仪器厂家：上海安亭科学仪器厂3.3、许可证号：字 2001 第 2030436 号3.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序3.5、Rh 抗血清本科使用上海血液生物医药有限责任公司生产的 Rh 抗血清试剂产品注册号:国食药监械(准) 字 2009 第 3400648 号4. 操作4.1 取小试管 2 支,用蜡笔标记，分别加上述 Rh 抗血清 1 滴,再加 2-3%受检者红细胞盐水悬液 2 滴,混匀。离心：3200-3400 转/min,1
17、5-30 秒4.2 结果判断:轻摇试管，观察结果：如受检管凝集 ,即表示阳性；受检管不凝集,即表示阴性。5、注意事项5.1、Rh 抗血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。5.2、 。试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。5.3、操作方法应按规定，一般应先加血清,然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。5.4、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。5.5、观察时应注意区别真假凝集。5.6、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。5.7、当用未经洗涤的细胞作试验时，试样中的自身凝集和异常蛋白质可能引起假阳性结果。编写
18、人:7审核人;批准人:生效日期:. 年 月 日沁 水 县 人 民 医 院 检 验 科 文件编号 XK-04第 1 页 共 2 页SOP 文件第 2 版 第三次编写主 题: 凝 聚 胺 介 质 交 叉 配 血 颁布日期 2010 年 7 月原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta 电位，决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM） ，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（溶液，它是一种高阶
19、阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞 Zeta 电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入凝聚胺(Resuspending),Resuspending 具有中和凝聚胺（ Polybrene）的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。试剂本科使用珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺介质试剂产品注册号:国食药监械(准)字 2009 第 3400076 号1、主要组成成份 150T 装量（BA-1003 ） 1LIM(Low
20、Ionic Mediun) 2 瓶5549ml 5%葡萄糖、0.2/%EDTA（2Na ）2、Polybrene Solution 1 瓶15ml 0.05%Polybrene、0.9% 氯化钠3.Resuspending Solution 1 瓶15ml 3.5%柠檬酸三钠、1.5%葡萄糖2、标本要求1、新鲜血清、含 EDTA 抗凝血浆、3%-5%的红细胞悬液。2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。3、试验步骤3.1 取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2 滴，加供血者 3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管反之。3.2 各加 LIM0.7ml,混合均匀
21、后,再各加 Polybrene2 滴,并混合均匀.3.3 用血库离心机 3400 转/分离心 10 秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约 0.1ml 液体.3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做.3.5 最后加入 Resuspending2 滴,轻轻转动试管混合并涂片,显微镜下观察结果：在 30 秒-1 分钟内凝集散开,代表是由 Polybrene 引起的非特异性聚集,配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。应进一步作抗体鉴定.3.6。配血相合后，认真填写配血纪录单和登记本，并通知临床取血。4、注意事项：4.1 可以用含
22、EDTA 之血浆代替血清使用。4.2 若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加 4-6 滴 Polybrene 溶液以中和肝素。4.3 本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。84.4 试剂使用前请回复室温再行操作。4.5 加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K 的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。4.6 在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，建议在最后滴入 Resuspending 时，将试管立即置入 37 摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在 30 秒内观察结果。编写人:审核人;批准人:生效日期:. 年
23、 月 日9沁 水 县 人 民 医 院 检 验 科 文件编号 XK-03第 1 页 共 2 页SOP 文件第 2 版 第三次编写主 题: 盐 水 介 质 交 叉 配 血 颁布日期 2010 年 7 月方法原理：本法是目前最常用的配血方法，可以发现临床上最重要的 ABO 不配合性。当受血者和供血者红细胞经混合并离心后，如有不配合问题，就会很快显示出来。标本采集：由医护人员持输血申请单和贴好标签的试管送交输血科，双方进行逐项核对并进行登记标本要求：受血者配血试验的血标本必须是输血前三天之内的。标本处理:输血科要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者血型（正、反定型）,正确无误时可
24、进行交叉配血。试剂来源：生理盐水仪器：Anke T型医用离心机使用方法：1、抽取受血者静脉血 3-4ml，待凝固后分离血清（也可用抗凝血标本）.并取红细胞配成 3%盐水悬液.2、将供血者血标本同法分离血清（血浆）,并配成 3%盐水悬液.3、取洁净试管 2 支，一支标明“主”侧管，另一支标明“次”侧管4、于主侧管中加受血者血清 2 滴+供血者红细胞悬液 1 滴，次侧管中加献血者血清 2滴+ 受血者红细胞悬液 1 滴。5、3000 转离心 10 秒，轻摇试管观察结果。结果判定：ABO 同型配血，主侧和次侧均无溶血无凝集表示无输血禁忌，可以输血；如主侧凝集，绝不可以输注此血，必须另选血源；如主侧无凝
25、集，次侧发生凝集，应查明原因后再作决定。发血：配血合格后由医护人员到输血科取血，取血和发血的双方必须共同查对患者姓名、性别、病案号、门急诊/病室、床号、血型、血液有效期及配血试验结果，以及保存血的外观等，准确无误时，双方共同签字后方可发出。交叉配血的临床意义及注意事项：1、抗体筛检阴性，并不能保证血清中就不含有临床意义的抗体。因为方法和筛检红细胞的原因，有的抗菌素体可能检不出。故还应做交叉配血试验 。2、盐水介质交叉配血相容，一般只是表示 IgM 类抗体和相应红细胞抗原相容，主要是血型抗菌素体，检测不出具有临床意义的 IgG 抗体。故必须加做不规则抗体配血 .3、交叉配血，不论哪种方法，任何反
26、应条件和反应介质，最终出现凝集和溶血都被认为是不配合的。4、只要患者有输血史、妊娠史或者在患者血清中已检出有临床意义的抗体，只进行盐水交叉配血有很大的危险性，必须进行检测不规则抗体的交叉配血试验。5、交叉配血试验，是输血前检查的最后一环，直接关系到输血安全，关系到病人的安危，一定要认真对待，仔细操作。106、所有配血标本，应置 4冰箱保存 7 天以备复查。7、RH(D)阴性的患者，必须给 D 阴性的血液；在紧急抢救的情况下，若无 D 阴性血液，可以输配合型的 D 阳性血，但最好能在输入 D 阳性血液之后，给患者注射抗 RH1(D)免疫球蛋白，以预防抗-D 产生。8、结果在受血者血清中检出其不具有临床意义的不规则抗体，应选择相应抗原阴性的血液进行交叉配血。编写人:审核人;批准人:生效日期:. 年 月 日
