1、免疫抑制剂(地塞米松)对家兔异型输血的影响(临床专业,07 级 2 班,吴菲 43 号,李志鹏 44 号,李媛媛 45 号,吴剑宏 46 号)(一)立题依据及实验内容输血是临床上最重要的医疗手段之一,随着其技术的广泛应用,安全输血成为输血工作中的一个重要研究课题。临床上输血不良反应主要有溶血反应、发热反应、过敏反应等,输血后患者可出现不明原因的发热、呼吸困难、心率加快乃至血压下降,甚至发生休克和 DIC。糖皮质激素(地塞米松)肾上腺皮质类激素,作用广泛,可影响免疫反应多个环节,包括抑制巨噬细胞的吞噬提呈作用;使淋巴细胞,尤其是辅助性 T 细胞溶解减少等。有降低自身免疫性抗体水平,缓解过敏反应及
2、对抗异体细胞的排斥反应和抗休克等作用。据此推测糖皮质激素可对抗或缓解输血反应,此实验拟以糖皮质激素对兔异型输血反应的影响加以证明。(2)实验材料1、实验动物 无菌健康家兔若干只,雌雄不限,体重 2-2.5Kg.2、实验器材与药品 BL-450 生物机能实验系统(含压力换能器) ,兔手术台,气管插管,哺乳动物手术器械,动脉夹,玻璃分针,静脉插管和输液装置,注射器(含针头) ,肝素生理盐水,生理盐水,盐酸利多卡因溶液,地塞米松试剂。(3)试验方法和操作步骤1、随机选家兔一只,标记为甲兔,筛选十只与甲兔发生体外凝血的兔子。1)以利多卡因溶液在甲兔股部浸润麻醉,与股静脉取血5ml,收集在加入肝素的烧杯
3、。2)在其他兔子动脉末梢取少量血,进行体外交叉配血实验,筛选出与甲兔血体外凝血者。2、取甲兔,分离颈总动脉,取血 30ml,收集在加入肝素的烧杯中。3、将 10 只家兔标记 1-10,随机选出 5 只作为实验组,其余为对照组将其耳缘静脉注射 20%乌拉坦 5ml/kg 麻醉,固定于兔手术台上,减去颈部被毛。 颈部手术 在甲状软骨下颈部正中切开皮肤 6cm,分开皮下组织,依次分离:右颈外静脉:用止血钳钝性分离右颈外静脉,动脉夹夹闭近心端,结扎远心端,在颈外静脉侧壁剪一小切口,插入静脉插管,当插管到达动脉夹处,用手捏住血管,放开动脉夹,将插管继续插入约 6cm 左右结扎固定;气管:用止血钳在舌骨下
4、肌群正中插入,将左右胸骨舌骨肌向两侧拉开,即可看到气管,分离一段气管并穿一根粗线,在气管表面做一倒 T 形切口,插入气管插管并结扎固定。气管插管的一侧接张力换能器,并 BL-450 生物机能实验系统相连,记录呼吸;左侧颈总动脉:将胸骨舌骨肌和胸锁乳突肌向外拉开,在气管左侧深处,可见到与其平行的左颈总动脉,用止血钳钝性分离左侧颈总动脉,结扎左侧颈总动脉的远心端,用动脉夹夹闭近心端,用眼科剪在靠远心端结扎出的动脉壁上剪一斜口,向近心端插入动脉插管动脉导管(管内充满 0.3%肝素生理盐水) ,用线结扎固定,接压力换能器。与 BL-450 生物机能实验系统相连,记录血压。4、打开计算机,启动 BL-4
5、50 生物机能实验系统,分别记下正常的呼吸频率、心率、血压(收缩压与中心静脉压) 。实验组输入 0.5mg 地塞米松生理盐水,对照组输入等量的生理盐水;5、将 10 只家兔同时输入 3ml 的甲兔血,受血过程中严密观察各家兔反应,观察上述各指标的变化,并作详细记录。输血不良反应观察结果(XS)观察指标 观察组 对照组输血前 输血后 t p 输血前 输血后 t p呼吸频率 心率(次/min)收缩压中心静脉压 (4)预期实验结果 两组家兔的各项指标在输血前后结果的差别都具有统计学意义。在异型输血后家兔各指标变化中,加入地塞米松的实验组均比未加入地塞米松的对照组变化幅度小,故可推测地塞米松可以减轻或
6、消除异型输血反应; 糖皮质激素(地塞米松)抑制了异型输血反应。(5)统计方法 采用 t 检验进行统计学处理。(6)可能遇到的困难、问题及解决措施:1、手术操作技术不熟练,须平时加强训练。2、兔子因个体差异而引起输血反应的差别,应结合同组的其他实验结果进行取舍。(7)参考文献1、GrzelakI,Ialeskam,Olesewkiwl,Transfusion,1998,38:11042、AvallH,Hyllnerm,Grunwald,et,transfusion,1998,39:243、期刊邓梅英;宁芬;陈宇;唐玉杰;输血不良反应 178例分析;就医学;2009 年 10 月期:41-424、书籍刘达庄,免疫血液学;上海科学技术出版社,2002:111-1215、期刊汪传喜,田兆崇,AIHA 病人的输血前检查和成分输血,中国输血杂志,2000 年 01 期:1