1、无脊椎动物学实验讲义西华师范大学生命科学学院实验教学中心2007 年 1 月目 录实验一 动物的细胞和组织实验二 眼虫和变形虫实验三 兔艾美球虫卵囊及草履虫实验四 水螅、薮枝螅及海葵实验五 涡虫实验六 华枝睾吸虫实验七 猪带绦虫实验八 蛔虫实验九 环毛蚓实验十 环毛蚓横切面玻片标本及环节动物门代表动物观察实验十一 河蚌实验十二 螯虾实验十三 蝗虫实验十四 昆虫分类（一）实验十五 昆虫分类（二）实验十六 海盘车实验一 动物的细胞和组织一、实验目的了解细胞的基本结构及有丝分裂各期的特点；了解动物的 4 类基本组织的结构相功能。二、实验内容1.细胞：人口腔上皮细胞；马蛔虫细胞的有丝分裂制片。2.上皮
2、组织：复层扁平上皮。3.结缔组织：疏松结缔组织；透明软骨、娃的血液装片。4.肌肉组织：平滑肌。5.神经组织：脊髓的前角细胞。三、实验材料和用具人口腔上皮、复层扁平上皮、透明软骨、平滑肌及神经组织 4 种组织的切片。显微镜、裁玻片、盖玻片、吸管、吸水纸、牙签、0.1的亚甲蓝、0.9的NaCl 溶液、蒸馏水。四、实验操作1.人口腔上皮细胞：用牙签粗的一端，放在自己的口腔里，轻轻地在口腔颊内刮几下(注意不要用力过猛，以免损伤颊部；也不要太轻，以免刮不下细胞)。将刮下的白色粘性物薄而均匀地涂在栽玻片上。加一滴 0.9NaCl 溶液，然后加盖玻片。先在低倍显微镜下观察。口腔上皮细胞常数个连在一起。由于口
3、胺上皮细胞薄而透明，因此光线密要暗些。找到口腔上皮细胞后，将其放在视野中心，再转高倍镜观察。口腔上皮细胞呈扁平多边形。试辨认细胞核、细胞质、细胞膜。如果结构不清楚，可在盖片一侧加一滴 0.1的亚甲蓝，另侧用一小块吸水纸吸。如此，可使染液流人盖片下面，将细胞染成法蓝色，核染色较深。注意染液不可加得过多，以免妨碍观察。2.细胞有丝分裂：在各切片中辨认出染色体、中心粒及纺锤体。注意分裂各期的特点。前期：染色体出现，着色较深。中心粒已分裂为二，向两极移动，形成纺锤体。在前期结束时核仁及核膜消失。中期：染色体排列在细胞赤道面上，中心粒已达两极，此时纺锤体最大。染色体数目很清楚。后期：各染色体已经纵裂为二
4、，分别向两极移动。细胞已开始分裂，细胞的中部出现凹陷。末期：细胞分裂为二，染色体消失，重新组成的核出现。3.复层扁乎上皮：取食道横切片，用低倍镜找到上皮，转高倍镜观察。基层为排列整齐的一层柱状细胞，最外层为多层扁平细胞。4.软骨组织：观察透明软骨的染色切片，可见大部底质被染成相同的均匀颜色，此即为软骨基质，基质中有许多圆形成卵圆形的窝，称为胞窝，常常 2 个或 4 个并列在一起。胞窝内有软骨细胞，细胞核染成深色，细胞膜界限很清楚，细胞质染色极浅，不太清楚。5.平滑肌：取猫胃的横切片，在低倍镜下观察，肠壁被染成粉红色的部分为肌肉层，将光线调节略暗些，可见肌肉是由很多细梭形的细胞所组成，此即为平滑
5、肌细胞，核呈椭圆形，被染成蓝紫色。6.神经组织：观察牛脊髓涂片。找到有细胞处，则可见细胞被染成淡蓝色，细胞形状不规则。细胞核位于中央，色浅，核仁着色较深。能看到细胞突起，树突的基部较粗，而轴突则粗细均匀，涂片上不易看到。五、注意事项做口腔上皮细胞临时装片时，注意必须将从颊部刮下的细胞在载破片上涂得薄而均匀。滴加的 0.9NaCl 溶液不宜过多，被盖玻片恰好盖住为宜。 六、作业绘人口腔上皮细胞（23 个）放大图，标注各部分名称。七、思考题1. 细胞的基本结构及其机能2. 4 类基本组织的结构特点与主要机能。实验二 眼虫和变形虫一、实验目的通过眼虫、变形虫的观察，了解鞭毛虫纲与肉足纲的主要特点。二
6、、实验内容眼虫和变形虫的观察。三、实验材料和用具培养的眼虫和变形虫。显微镜、裁玻片、盖玻片、吸管和吸水纸。四、实验操作1.眼虫的观察：观察烧杯里眼虫培养液的颜色。注意颜色分布与光线的关系。从烧杯里绿色较浓的一边用吸管吸一些培养液，滴一小滴于载玻片上并加盖玻片。先在低倍镜下观察，可看到许多绿色游动的眼虫，注意它们的体形。观察它们的运动方式。当眼虫不甚活动时，常呈现出一种蠕动，称眼虫式运动。在高倍镜下观察一个蠕动的眼虫，注意其身体蠕动的情形。辨认眼虫的前、后端：前端钝圆，后端尖削。在前端有一个略呈长圆形无色透明的部分，称储蓄泡；前端的一侧有一红色的眼点。眼点的功用是什么？对眼虫的生活有何意义？细胞
7、内有许多绿色的椭圆形小体叶绿体。在身体中央稍靠后方有一个圆形透明的结构即细胞核。将亮度调暗些，可见到虫体的前端有一根鞭毛在不停地摆动。在盖玻片的一侧加一小滴碘液能将鞭毛及细胞核染成褐色。2. 变形虫的观察：用吸管从培养液底部的泥沙表面或从培养液中吸取数滴于在载玻片上，加盖玻片，然后用低倍镜观察。一般变形虫体较小且几乎透明，在低倍留下呈极浅的蓝色；当变形虫缓慢移动时，身体不断地改变形状。根据这两个特点在镜下仔细寻找(将光线调暗些)。找到一个变形虫后，换高倍镜观察。变形虫体的最外面为质膜，其内为细胞质。变形虫的细胞质明显的分为两部分，外边一层透明的为外质。外质里面颜色较暗、含有颗粒的部分为内质。在
8、内质的中央有一个呈扁圆形、较内质略为稠密的结构为细胞核。在内质中还可看到一些大小不同的食物泡和伸缩泡。伸缩泡是一个清晰透明的圆形泡，时隐时现。注意变形虫的运动，当变形虫移动时，细胞质随之流动。其体表不断突出，形成伪足。详细观察伪足的形成过程。如果发现一变形虫正在取食，应详细观察这种动作。五、注意事项变形虫一般体小而透明，在装片过程中因受水震动影响，常缩成一团，因此在制成装片后需静置片刻，待虫体伸展后，将光线调暗些再找。眼虫的鞭毛不经染色也可看到，但需将亮度调暗到适宜程度，耐心仔细观察，常可见到鞭毛摆动。 六、作业绘变形虫的放大图，标注所观察到的各部分名称。七、思考题1. 变形虫体内的叶绿体有何
9、功用？2变形虫如何运动?如何摄食?实验三 兔艾美球虫卵囊及草履虫一、实验目的通过对兔艾美球虫卵囊和草履虫的观察，了解孢子纲和纤毛纲的主要特征。二、实验内容兔艾美球虫卵囊和草履虫的观察。三、实验材料和用具新鲜兔粪、培养的草履虫。显微镜、裁玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸、甘油生理盐水、5的冰醋酸。四、实验操作1.兔艾美球虫卵囊的观察：球虫借卵囊传播。在裁玻片上滴一滴甘油生理盐水，用牙签挑取新鲜兔粪少许，涂于甘油生理盐水内，充分均匀混合，盖上盖玻片，在低倍镜下观察（亮度要稍暗一些） 。兔艾美球虫的卵囊为卵形，卵囊壁较厚，里边有一个圆形的卵细胞。在合适的外界环境中经发育(约 24h)，卵囊内有清楚可
10、见的 4 个孢子，每个袍子内有 2 个子孢子。思考卵囊形成的意义，结合观察结果，了解球虫生活史特点。2.草履虫的观察：为限制草履虫的迅速游动以便观察，将少许棉花撕松，放在载玻片上，滴一滴草履虫培养液，盖好盖玻片，在低倍镜下观察。如果草履虫仍旧游动迅速，则取吸水纸放在盖玻片的一侧，将水吸去一些(注意不要吸干)，再进行观察。首先分辨出前、后端。前端较圆，后端稍尖，然后观察草履虫的运动方式。选择一个比较清晰而又不太活动的草履虫观察其内部构造。虫体最外层为表膜，有弹性，因此，当其穿过棉纤维时，体形可以改变。将亮度调暗一些，可看到虫体满覆纤毛，在不停的摆动。表膜内是透明无颗粒的外质。外质内有与表膜垂直排
11、列的折光性强的椭圆形的刺丝泡。外质里面是颗粒状的内质。从虫体前端起，有一斜向后行直达体中部的凹沟是口沟，在口沟的后端有胞口，胞口下有一导入内质的短管为胞咽。胞咽内有颤动的纤毛，具运输食物的功能。内质里有大小不同的食物泡，在虫体的前端和后端各有一个圆的亮泡，此即为伸缩泡。当伸缩泡缩小时，可见周围有 67 个呈放射状的长形透明小管，即收集管。注意前、后端伸缩泡之间及伸缩泡与收集管之间收缩时的规律，思考它们的功用。 大草履虫有两个细胞核：一大核和一小核。位于内质中央。生活时小核不易见。在盖玻片一边滴一滴 5的冰醋酸，另一边用吸水纸吸水，过23min 后在光线比较充足的情况下，用低倍镜可观察到虫体的中
12、部被染成黄白色。呈肾形的结构为大核。高倍镜下可见大核凹处有一个点状的结构，即为小核。五、注意事项草履虫游动迅速，需于载玻片上加少许撕松的棉花纤维阻拦。注意使棉花纤维之间的孔隙大小较均匀，成一薄层，滴加草履虫培养液液适量(棉花纤维及液体量均不宜多)。六、作业绘草履虫的放大图，标注所观察到的各部分名称。七、思考题通过对草履虫的观察，总结单细胞动物有哪些细胞器的分化，各有什么功能？实验四 水螅、薮枝螅及海葵一、实验目的通过对水螅、薮枝螅及海葵的观察，了解腔肠动物门的主要特征。二、实验内容水螅、薮枝螅及海葵的观察。三、实验材料和用具水螅活体、水螅横切片、纵切片、水螅过精、卵巢切片，水媳神经网装片，薮枝
13、螅浸制标本及装片、海葵浸制标本。显微镜、放大镜、盖玻片、载玻片、培养皿、解剖针、50的醋酸。四、实验操作1.活水螅观察：将水螅盛于培养皿中，待其完全伸展后，用放大境观察。水螅体呈圆柱状，附着在物体上的一端为基盘；另一端为圆椎形突起，叫垂唇。垂唇中央为口，周围有一圈细长的触手。注意水螅体型的对称形式。用解剖针轻轻触动一条触手，观察它的反应。再稍用力触动一下，又有何反应？怎样从结构上去理解两种不同的反应现象?2.水媳的切片观察；先用放大镜观察纵切片，区别出水媳的口端和基盘的一端。再用低倍镜观察，认出外胚层、中胶层和内胚层，中央的空腔即为消化循环腔。然后观察纵切的触手，注意它的腔与消化循环腔的关系。
14、若有芽体，则观察芽体的胚层与母体的关系。在低倍镜下观察横切片，辨认出组成体壁的内、外胚层、中胶层和消化循环腔。注意内、外胚层的细胞的区别。将体壁的一部分移至视野中心，转高倍镜观察。在外胚层中可看到大而结构清楚的外皮肌细胞。在皮肌细胞间可看到与皮肌细胞的核大小近等的数个在一起的细胞，称间细胞。中央具有一染色较深的圆形或椭圆形囊的细胞为刺细胞，其囊叫刺丝囊。内胚层的内皮肌细胞占大多数，细胞大，核清楚，并含有许多染色较深的圆形食物泡；有时可看到较小的细胞，游离缘含有细小的深色颗粒，此为腺细胞。3刺细胞及刺丝的观察：将水螅放在 50的醋酸中浸 20min，取出置于载玻片上，加盖玻片在低倍镜下观察，可见
15、到刺细胞略呈圆形，端部放出一丝，即为刺丝。转高倍镜可看到刺丝囊，细胞放出刺丝的一端有一刺状物称刺柄；还能看到另一种刺丝明显，但无刺柄、呈长椭圆形、较小、结构不甚清楚的刺细胞。4.薮枝螅观察：先观察群体的浸制标本。认出螅根、螅茎。螅体较小需注意观察。然后观察染色的整体装片。辨认连接水螅体与生殖体之间的共肉。观察生殖体，注意产生水母芽的方式。5.海葵观察：注意观察口道、口道沟、隔膜、隔膜丝、生殖腺等结构。五、注意事项将水螅置于培养皿中静置，待其完全伸展，方可进行各种观察。六、作业绘水螅的横切面图，标注各部分名称。七、思考题根据实验观察的腔肠动物，总结本门的主要特征。 实验五 涡虫一、实验目的通过对
16、涡虫形态和结构的观察，了解扁形动物及涡虫纲的基本特征。二、实验内容1活体外形观察。2活体焰细胞等原肾结构的观察。3整体装片标本观察，研究其内部各系统器官构造。4横切面玻片标本观察，了解其皮肤肌肉囊和三胚层的体层构造三、实验材料和用具活的涡虫；涡虫整装玻片标本；涡虫横切面玻片标本。显微镜、解剖镜、放大镜、玻璃培养皿、镊子、毛笔、裁玻片、盖玻片、解剖针、滴管、吸水纸。四、实验操作1.活体观察：凭肉眼或在放大镜、解剖镜下观察祸虫的外形、运动和取食情况。涡虫体扁长，叶片状，全长 1015mm。前端呈三角形，两侧各有一耳状突起，后端稍尖。体背面稍凸，灰褐色，前端有两个黑色眼点。腹面干坦，色较浅；口位于身
17、体腹面近体后 1/3 处中央；口向前为咽囊，囊内有肌肉性咽，可自由从口伸出体外或缩人咽囊内；口的稍后方有一生殖孔，无肛门。体表，尤其是腹面密生纤毛。2活体焰细胞等原肾结构的观察；选取饥饿数日的涡虫，置于加少量水的载玻片上，加盖玻片后以解剖针轻压，使涡虫组织破碎外溢。静置片刻后在低倍镜下可见体两侧一系列不规则光亮分枝，选取一段清晰处转至高倍镜下观察，可见到焰细胞中摆动的纤毛束和原肾管的管腔。3内部构造：消化系统：有口、咽及肠 3 部分，无肛门。肠分 3 支，1 支向前 2 枝向后，每枝有出许多盲状侧枝。排泄系统：体两侧各有 1 条弯曲的纵排泄管，并有分技，分技末端为焰细胞。神经系统：梯形神经系统
18、，头部有 1 对脑神经节，由此分出 2 条腹神经索通向体后，索间有横神经连接，呈梯形。生殖系统（雌雄同体）：雄性：体两侧有许多小的球形精巢，各经输精小管通人 1 对输精管；输精管在体中部膨大为储桔囊，两储精囊通过肌肉质的阴茎通人生殖腔；生殖腔以生殖孔与外界相通。雌性：体前端有椭圆形卵巢 1 对，各经输卵管向后行，沿途收集由许多分支状卵黄腺产生的卵黄，后端汇合成 l 条阴道后通人生殖腔。受精囊也通人生殖腔。4模切面玻片标本的观察：外胚层：为单层柱状表皮细胞，间杂有条状杆状体和囊状、合深色颗粒的腺细胞；腹面的表皮细胞具纤毛。表皮细胞内为非细胞构造的基膜。中胚层：形成肌肉层和实质组织。基膜以内依次为环肌、斜肌和纵肌，它们与表皮合成体壁，即皮肤肌肉囊，背、腹体壁问还有背腹肌联系。实质组织填充于体壁与消化道之间，故无体腔。内胚层；形成单层肠上皮组织。五、作业绘涡虫的生殖系统，标注各部分名称。六、思考题
