家禽免疫抑制病的鉴别诊断.doc

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1、家禽免疫抑制病的鉴别诊断在引起鸡病的病原微生物中,有一些病毒除引起机体发生原发感染甚至死亡之外,更严重的是致使感染禽的免疫功能受到损害,导致机体抵抗力降低,遭受其它病原的并发和继发感染,造成更大的损失。鸡传染性法氏囊病、马立克氏病、传染性贫血病、禽网状内皮组织增生病及 J亚群白血病是常见免疫抑制病。本文就此类疾病的临床症状、诊断要点及诊断方法进行论述。 1 传染性法氏囊病(IBD) 1.1 临床特点 IBD 主要发生于 38 周龄的幼鸡,但也曾见于 3 月龄以上的鸡。病鸡精神沉郁、羽毛逆立、下痢、震颤、共济失调。发病率可达 100%,死亡率为 5%15%,有时高达 20%以上,并发或继发感染所

2、致的死亡率更高。 1.2 病理特点 剖检见法氏囊严重水肿,并有坏死灶,内含淡黄色胶冻样渗出物,粘膜面上有时有出血点或出血斑,病后期的法氏囊可能萎缩。鸡尸可能不消瘦,但胸肌、腿肌上常有出血斑的存在。肾小管和输尿管内有尿酸盐沉积,心包和肝脏表面也常出现尿酸盐。2周龄以下的雏鸡发生感染时,大多呈亚临床感染。 1.3 诊断要点 1.3.1 琼脂扩散试验 取病鸡法氏囊制作悬液(1215),离心取上清,再用特异的高免血清按琼扩法常规进行。在加特异性抗血清孔与加待检病毒孔之间出现乳白色沉淀线则为阳性,否则判为阴性。 1.3.2 荧光抗体检测 先以传染性法氏囊病病毒标准毒株制备标准抗血清,再用荧光素标记制成荧

3、光抗体,并用于待检病料中病毒的鉴定。 1.3.3 中和试验 用标准抗血清作鸡胚中和试验,可以鉴定新分离的毒株。 2 马立克氏病(MD) 2.1 临床特点 MD 临床上可分为急性型和慢性型两大类型。急性型死亡率高,内脏器官产生各种各样的淋巴瘤。慢性型根据侵害部位可分为以下几种类型: 2.1.1 内脏型 表现为消瘦、苍白、腹泻。 2.1.2 神经型 常见坐骨神经受到侵害,表现为一侧或双侧瘫痪;臂神经受到侵害则翅膀下垂,不能收起;迷走神经受到侵害表现为嗉囊异常增大。 2.1.3 眼型 表现为虹彩消失或虹彩边缘不整齐,呈锯齿状。 2.1.4 皮肤型 表现为皮肤的羽毛囊上形成大小不一的肿瘤。 2.2 病

4、理特点 2.2.1 内脏型 内脏器官上形成大小不一的肿瘤结节,肝、脾最易受伤,其次是肺、卵、心。发生于卵巢的呈菜花状。 2.2.2 神经型 正常时,神经粗细均匀有横纹,病后横纹消失,粗细不一,神经周围组织水肿。 2.3 诊断要点 2.3.1 琼脂扩散试验 在待检鸡的翅部拔一根未成熟的羽毛,剪下毛根尖端的下段,插在琼脂扩散板的外周检测孔内,每只鸡一根羽毛用一个孔。再将一定量的 MDV 高免血清滴入琼脂中央孔内。在湿润的条件下于室温放置 23d 或 37温箱中过夜,最后观察结果。如在插羽毛的孔与中央孔之间出现沉淀线,即可判定鸡羽毛囊上皮中含有病毒抗原。 2.3.2 间接红细胞凝集试验 将被检血清和

5、 MDV 抗原所致敏的红细胞按常规法进行血凝反应。凝集价达 116 或更高时,可判为阳性反应(未接种 MD 疫苗者)。必须设阴性对照。 2.3.3 间接荧光抗体试验、酶联免疫吸附试验等也是常用诊断方法。近年来,随着分子生物学技术的发展,应用 PCR 扩增和核酸斑点杂交等方法进一步提高了检测的可靠性和灵敏性。3 传染性贫血病(CIA) 3.1 临床特点 贫血是该病的特征性变化,病鸡感染后 1416d 贫血最严重。病鸡表现精神沉郁,衰弱,消瘦,体重减轻,喙、肉髯和可视粘膜苍白。血液稀薄,血凝时间延长。发病后 56d 病鸡大量死亡,呈急性经过,死亡率通常不超过 30%。 3.2 病理特点 本病最特征

6、的剖检病变是骨髓萎缩,常见股骨骨髓呈脂肪色、淡黄色或淡红色。胸腺明显萎缩,重量降低,呈深红褐色,严重时可导致完全退化。随着病鸡年龄的增加,胸腺萎缩比骨髓的病变更容易观察到。法氏囊萎缩不明显。病情严重者,可见肝、肾变黄,肿大,质脆。胃肠道和肌肉有点状出血。 3.3 诊断要点 确诊应依赖病毒分离或证实病毒特异抗原或核酸的存在。用 MDCCMSB1细胞或 SPF 鸡分离病毒费时费力,目前在组织触片和冷冻切片中证实病毒特异抗原是病毒感染价廉快速的诊断方法。鸡贫血因子(CAA)也可用斑点杂交、原位杂交或聚合酶链式反应(PCR)技术检测病毒 DNA 的方法进行诊断。 4 禽网状内皮组织增生病(RE ) 4

7、.1 临床及病理特点 REV 是以淋巴网状细胞增生为特征的肿瘤性疾病。目前发现 REV 有两种对禽产生致病作用的毒株:REVA 和 REVT。REV 感染在禽类中散在发生,但往往不见临诊疾病。具有经济意义的是急性致死性网状细胞瘤、慢性淋巴细胞性肿瘤以及一种以法氏囊和胸腺发生萎缩、羽毛发育异常为特征的矮小综合征。REVA 可引起网状内皮细胞增生、脾肿大、脾坏死、神经系统淋巴细胞浸润、淋巴肉瘤和贫血等。 4.2 诊断要点 4.2.1 间接免疫荧光试验(IFA)含(CEF)单层的 96 孔板在接种样品并维持 7d 后用乙醇- 丙酮(46)固定,用抗 REV 的单克隆抗体作为第一抗体,37 作用 45

8、min,PBS 洗涤后,再用 FITC 标记的羊抗鼠 IgG 抗体作为第二抗体,37作用 45min,PBS 洗涤后,在荧光倒置显微镜下观察。如见细胞浆内有绿色荧光染色者,则判为阳性,否则为阴性。 4.2.2 斑点核酸分子杂交 用 REV 全基因组 DNA 克隆质粒,经地高辛标记后作为核酸探针,对病鸡的脾 DNA 作斑点核酸分子杂交。 5 J亚群白血病(ALV-J) 5.1 临床特点 感染后出现的症状主要表现为骨髓性白血病及其它多种肿瘤。病鸡嗜睡、鸡冠苍白、厌食、消瘦、腹泻。公鸡发生后影响受精率,母鸡发生后产蛋率、孵化率下降。特征表现:头部、胸骨异常突起。 5.2 病理特点 较特征的是头骨、胸

9、骨、肋骨有奶油状的肿瘤形成。另外,在肝脏和其它内脏器官有肿瘤形成。 5.3 诊断要点 5.3.1 病毒中和试验 用 ALV-J 的原型株 HPRS-103 感染后康复鸡血清作病毒中和反应来鉴别在 CEF 上分离到的病毒的亚群。 5.3.2 血凝抑制试验 以在昆虫细胞中表达的 ALV-J 的重组囊膜糖蛋白作为诊断抗原,诊断成年鸡群中感染 ALV-J 后的血清抗体状态。 5.3.3 用 PCR 技术进行诊断。 6 预防和控制 6.1 制定合理的免疫程序,必须能够从 1 日龄起就保护雏鸡免受免疫抑制病毒的感染。与此同时,对鸡进行其它疾病的免疫接种。坚持使用高质量的 SPF 鸡胚来源的弱毒活疫苗。 6.2 在饲养和经营模式上作出改进,实行全进全出制,对鸡舍彻底清洗并采用碱溶液和 0.5%有机碘溶液作彻底消毒。 6.3 应用免疫抑制病的综合诊断技术,做到早发现,早治疗。

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