食品中糖精钠的测定方法食品中糖精钠的检测分析方法.DOC

1、食品中糖精钠的测定 方法 食品中糖精钠的 检测分析方法 云南环科仪器有限公司 南京科捷分析仪器有限公司 驻西南办事处 1、 主题内容与适用范围 本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。 本标准适用于食品中糖精钠的测定。 最低检出量：高效液相色谱法取样量为 10g，进样量为 10L 时，最低检出量为 1 5ng。 第一篇 高效液相色谱法（第一法） 2、 食品中糖精钠的测定 原理 样品加温除去二氧化碳和乙醇，调 pH 至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。取样量为 10g，进样量为 10?L 时最低检出量为 1 5ng。 3、 食品中糖精钠的测定 试剂

2、 3.1 甲醇：经滤膜（ 0 5m）过滤。 3.2 氨水（ l 1）：氨水加等体积水混合。 3.3 乙酸铵溶液（ 0 02mol L）：称取 1 54g乙酸铵，加水至 1000mL 溶解，经滤膜（ 0 45?m）过滤。 3.4 糖精钠标准储备溶液：准确称取 0 0851g经 120 烘干 4h 后的糖精钠（ C6H4CONNaSO2 2H2O)，加水溶解定容至 100 0mL。糖精钠含量 1.0mg/mL，作为储备溶液。 3.5 糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储备液 10 0mL 放入 100mL 容量瓶中， 加水至刻度。经滤膜（ 0 45m）过滤。该溶液每毫升相当于 0 10mg的糖精钠

3、。 4、 食品中糖精钠的测定 仪器 高效液相色谱仪，紫外检测器。 5、 食品中糖精钠的测定 分析步骤 5.1 样品处理 5.1.1 汽水：称取 5 00 10 00g，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（ 1 1）调 pH 约 7。加水定容至适当的体积，经滤膜（ 0 45?m）过滤。 5.1.2 果汁类：称取 5.00 10 00g，用氨水（ 1 1）调 pH 约 7，加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经滤膜（ 0 45m）过滤。 5.1.3 配制酒类：称取 10 0g，放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（ 1 1）调 pH 约 7，加水定容至 20ml，经滤膜（ 0 45?m）

4、过滤。 5.2 高效液相色谱参考条件 5.2.1 色谱柱： YWG C184.6mm250mm10m 不锈钢柱。 5.2.2 流动相：甲醇：乙酸铵溶液 (0.02mol/L)(5 95)。 5.2.3 流速： 1mL/min。 5.2.4 检测器：紫外检测器，波长 230nm，灵敏度 0.2AUFS。 5.3 测定 取样品处理液和标准使用液各 10?L(或相同体积 )注入高效液相色谱仪进行 分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据进行定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。 5.4 计算 式中： X1 样品中糖精钠含量， g/kg； m1 进样体积中糖精钠的质量， mg； V2 进样体积

5、， mL； V1 样品稀释液总体积， mL； m2 样品质量， g。 结果的表述：报告算术平均值的三位小数。 5.5 允许差 相对相差 10%。 5.6 其他 应用 5.2 的高效液相分离条件可以同时测定苯甲酸、山梨酸和糖精钠，色谱图如下： （图略） 第二篇 薄层色谱法 (第二 法 ) 6、 食品中糖精钠的测定 原理 在酸性条件下，食品中的糖精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色谱分离、显色后与标准比较，进行定性和半定量测定。 7、 食品中糖精钠的测定 试剂 7.1 乙醚：不含过氧化物。 7.2 无水硫酸钠。 7.3 无水乙醇及乙醇 (95%)。 7.4 聚酰胺粉： 200 目。 7.5 盐酸 (1 1

6、)：取 100mL 盐酸，加水稀释至 200mL。 7.6 展开剂 7.6.1 正丁醇氨水无水乙醇 (7 1 2)。 7.6.2 异丙醇氨水无水乙醇 (7 1 2)。 7.7 显色剂 溴甲酚紫溶液 (0.4g/L)：称取 0.04g溴甲酚紫，用乙醇 (50%)溶解，加氢氧化钠溶液 (4g/L)1.1mL 调节 pH为 8，定容至 100mL。 7.8 硫酸铜溶液 (100g/L)：称取 10g硫酸铜 (CuSO4 5H2O)，用水溶解并稀释至 100mL。 7.9 氢氧化钠溶液 (40g/L)。 7.10 糖精钠标准溶液：准确称取 0.0851g 经 120 干燥 4h 后的糖精钠，加乙醇溶解

7、，移入 100mL 容量瓶中，加乙醇 (95%)稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 1mg糖精钠 (C6H4CONNaSO2 2H2O)。 8、 食品中糖精钠的测定 仪器 8.1 玻璃纸：生物制品透析袋纸或不含增白剂的市售玻璃纸。 8.2 玻璃喷雾器。 8.3 微量注射器。 8.4 紫外光灯：波长 253.7nm。 8.5 薄层板： 10cm20cm 或 20cm20cm。 8.6 展开槽。 9、 食品中糖精钠的测定 分析步骤 9.1 样品提取 9.1.1 饮料、冰棍、汽水：取 10.0mL 均匀试样 (如样品中含有二氧化碳，先加热除去。如样品中含有酒精，加 4%氢氧化钠溶液使其呈碱性，在沸水浴中

8、加热除去 )置于 100mL 分液漏斗中，加 2mL 盐酸 (1+1)，用 30，20， 20mL 乙醚 提取三次，合并乙醚提取液，用 5mL 盐酸酸化的水洗涤一次，弃去水层。乙醚层通过无水硫酸钠脱水后，挥发乙醚，加 2.0mL 乙醇溶解残留物，密塞保存，备用。 9.1.2 酱油、果汁、果酱等：称取 20.0g 或吸取 20.0mL 均匀试样，置于 100mL 容量瓶中，加水至约 60mL，加 20mL 硫酸铜溶液 (100g/L)，混匀，再加 4.4mL 氢氧化钠溶液 (40g/L)，加水至刻度，混匀，静置 30min，过滤，取 50mL 滤液置于 150mL 分液漏斗中，以下按 9.1.1

9、 自 “加 2mL 盐酸 (1 1)”起依法操作。 9.1.3 固体果汁粉 等：称取 20.0g磨碎的均匀试样，置于 200mL 容量瓶中，加 100mL 水，加温使溶解、放冷。以下按 9.1.2 自 “加 20mL 硫酸铜溶液 (100g/L)”起依法操作。 9.1.4 糕点、饼干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品：称取 25.0g 均匀试样，置于透析用玻璃纸中，放入大小适当的烧杯内，加 50mL 氢氧化钠溶液 (0.8g/L)，调成糊状，将玻璃纸口扎紧，放入盛有 200mL 氢氧化钠溶液 (0.8g/L)的烧杯中，盖上表面皿，透析过夜。量取 125mL 透析液 (相当 12.5g样品 )，加约 0

10、.4mL 盐酸 (11)使成中性，加 20mL 硫酸铜溶液 (100g/L)，混匀，再加 4.4mL 氢氧化钠溶液 (40g/L)，混匀，静置 30min，过滤。取 120mL(相当 10g样品 )，置于 250mL 分液漏斗中，以下按 9.1.1 自 “加 2mL 盐酸 (1 1)”起依法操作。 9.2 薄层板的制备 称取 1.6g聚酰胺粉，加 0.4g可溶性淀粉，加约 7.0mL 水，研磨 3 5min，立即涂成 0.25 0.30mm 厚的 10cm20cm 的薄层板，室温干燥后，在 80 下干燥 1h。置于干燥器中保存。 9.3 点样 在薄层板下端 2cm 处，用微量注射器点 10?L

11、 和 20?L 的样液二个点，同时点 3.0， 5.0， 7.0， 10.0L 糖精钠标准溶液，各点间距 1.5cm。 9.4 展开与显色 将点好的薄层板放入盛有展开剂 (7.6.1 或 7.6.2)的展开槽中，展开剂液层约 0.5cm，并预先已达到饱和状态。展开至 10cm，取出薄层板，挥干，喷显色剂，斑点显黄色，根椐样品点和标准点的比移值进行定性，根据斑点颜色深浅进行半定量测定。 9.5 计算 式中： X2 样品中糖精钠的含量， g/kg或 g/L； m3 测定用样液中糖精钠的质量， mg； m4 样品质量 (体积 )， g(mL)； V3 样品提取液残留物加入乙醇的体积， mL； V4

12、点板液体积， mL。 第三篇 离子选择电极测定方法 (第三法 ) 10、 食品中糖精钠的测定 原理 糖精选择电极是以季铵盐所制 PVC 薄膜为感应膜的电极，它和作为参比电极的饱和甘汞电极配合使用以测定食品中糖精钠的含量。当测定温度、溶液总离子强度和溶液接界电位条件一致时，测得的电位遵守能斯特方程式，电位差随溶液中糖精离子的活度 (或浓度 )改变而变化。 被测溶液中糖精钠含量在 0.02 1mg/mL 范围内。电极值与糖精离子浓度的负 对数成直线关系。 11、 食品中糖精钠的测定 试剂 11.1 乙醚：使用前用盐酸 (6mol/L)饱和。 11.2 无水硫酸钠。 11.3 盐酸 (6mol/L)

13、：取 100mL 盐酸，加水稀释至 200mL，使用前以乙醚饱和。 11.4 氢氧化钠溶液 (0.06mol/L)：取 2.4g氢氧化钠加水溶解并稀释至 1000mL。 11.5 硫酸铜溶液 (100g/L)：称取硫酸铜 (CuSO4 5H2O)10g溶于 100mL 水中。 11.6 氢氧化钠溶液 (40g/L)。 11.7 氢氧化钠溶液 (0.02mol/L)：将 11.4 稀 释而成。 11.8 磷酸二氢钠 c(NaH2PO4 2H2O) 1mol/L溶液：取 78g磷酸二氢钠 (NaH2PO4 2H2O)溶解后于 500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 11.9 磷酸氢二钠 c(N

14、a2HPO4 12H2O) 1mol/L：取 89.5g磷酸氢二钠 (Na2HPO4 12H2O)于 250mL 容量瓶中溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。 11.10 总离子强度调节缓冲液： 87.7mL 磷酸二氢钠溶液 (1mol/L)与 12.3mL 磷酸氢二钠溶液 (1mol/L)混合即得。 11.11 糖精钠标 准溶液：准确称取 0.0851g经 120 干燥 4h 后的糖精钠结晶移入 100mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。此溶液每毫升相当于 1.0mg糖精钠 (C6H4CONNaSO2 2H2O)。 12、 食品中糖精钠的测定 仪器 12.1 精密级酸度计或离子活度计或其他精

15、密级电位计，准确到 1mV。 12.2 糖精选择电极。 12.3 217 型甘汞电极：具双盐桥式甘汞电极，下面的盐桥内装入含 1%琼脂的氯化钾溶液 (3mol/L)。 12.4 磁力搅拌器。 12.5 透析用玻璃纸。 12.6 半对数纸。 13、 食品中糖精 钠的测定 分析步骤 13.1 样品提取 13.1.1 液体样品：浓缩果汁、饮料、汽水、汽酒、配制酒等。准确吸取 25mL 均匀试样 (汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取样 )，置于 250mL 分液漏斗中，加 2mL 盐酸 (6mol/L)，用 20， 20， 10mL 乙醚提取三次，合并乙醚提取液，用 5mL 经盐酸酸化的水洗涤一次，弃去

16、水层，乙醚层转移至 50mL 容量瓶，用少量乙醚洗涤原分液漏斗合并入容量瓶，并用乙醚定容至刻度，必要时加入少许无水硫酸钠，摇匀，脱水备用。 13.1.2 含蛋白质、脂肪、淀粉量高的食品：糕点、饼干、酱菜、豆 制品、油炸食品，称取 20.00g 切碎样品，置透析用玻璃纸中，加 50mL 氢氧化钠溶液 (0.02mol/L)，调匀后将玻璃纸口扎紧，放入盛有 200mL 氢氧化钠溶液 (0.02mol/L)的烧杯中，盖上表面皿，透析 24h，并不时搅动浸泡液。量取 125mL 透析液，加约0.4mL 盐酸 (6mol/L)使成中性，加 20mL 硫酸铜溶液混匀，再加 4.4mL 氢氧化钠溶液 (40

17、g/L)，混匀。静置30min，过滤。取 100mL 滤液于 250mL 分液漏斗中，以下按 13.1.1 自 “加 2mL 盐酸 (6mol/L)”起依法操作。 13.1.3 蜜饯类：称取 10.00g切碎的均匀样品，置透析用玻璃纸中，加 50mL 氢氧化钠溶液 (0.06mol/L)，调匀后将玻璃纸扎紧，放入盛有 200mL 氢氧化钠溶液 (0.06mol/L)的烧杯中，透析、沉淀、提取按 13.1.2 操作。 13.1.4 糯米制食品：称取 25.00g切成米粒状的小块均匀样品，按 13.1.2 操作。 13.2 测定 13.2.1 标准曲线的绘制：准确吸取 0， 0.5， 1.0， 2

18、.5， 5.0， 10.0mL 糖精钠标准溶液 (相当于 0， 0.5， 1.0，2.5， 5.0， 10.0mg糖精钠 )，分别置于 50mL 容量瓶中，各加 5mL 总离子强度调节缓冲液，加水至刻度，摇匀。 将糖精选择电极和甘汞电极分别与测量仪器的负端和正端相连接，将电极插入盛有水的烧杯中，按其仪器的使用说明书调节至使用状态，在搅拌下用水洗至电极起始电位 (例如某些电极起始电位达 320mV)。取出电极用滤纸吸干。将上述标准系列溶液按低浓度到高浓度逐个测定，得其在搅拌时的平衡电位值 (mV)。 在半对数纸上以毫升 (毫克 )为纵坐标；电位值 ( mV)为横坐标绘制标准曲线。 13.2.2

19、样品的测定：准确吸取 20mL 13.1 条下的乙醚提取液置于 50mL 烧杯中，挥发至干残渣，加 5mL 总离子强度调节缓冲液。小心转动，振摇烧杯使残渣溶解，将烧杯内容物全部定量转移入 50mL 容量瓶中，原烧杯用少量水多次漂洗后，并入容量瓶中，最后加水至刻度摇匀。依法测定其电位值 ( mV)，查标准曲线求得测定液中糖精钠毫克数。 13.3 计算 式中： X3 样品中糖精钠的含量， g/kg或 g/L； m5 测定液中糖精钠的质量， mg； V5 乙醚提取液的体积， mL； V6 分取乙醚提取液的体积， mL； m6 样品的质量或体积， g或 mL。 结果的表述：同 5.4。 13.4 干扰

20、 本法对苯甲酸钠的浓度在 200 1000mg/kg 时无干扰；山梨酸的浓度在 50 500mg/kg，糖精钠的含量在 100 150mg/kg 范围内，约有 3% 10%的正误差，水杨酸及对羟基苯甲酸酯等对本法的测定有严重干扰。 附加说明： GB/T 5009.281996 (食品 标准 ) 本标准由卫生部卫生监督司提出。 本标准第一法由天津市食品卫生监督检验所、辽宁省食品卫生监督检验所、武汉市卫生防疫站、浙江省卫生防疫站、四川省卫生防疫站负责起草；第二法由卫生部食品卫生监督检验所 负责起草；第三法由上海市食品卫生监督检验所、扬州市卫生防疫站、上海市南市区卫生防疫站、广西壮族自治区卫生防疫站、太原市卫生防疫站负责起草。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 资料来源：化验室网站 相关食品分析 ：食品分析食品添加剂分析食品中脂肪酸分析食品包装材料分析香精香料分析白酒香精成分分析酒分析农药残留分析三聚氰胺分析 相关食品 检测 ：食品中山梨酸苯甲酸的测定 食品中合成着色剂的测定 食品中糖精钠的测定 食品中环乙基氨基磺酸钠的测定 (1.4 气相 , 2.3 液相 ) 联系人：陈良 （小姐） 电话： 0871-5126897 5141625 云南环科仪器 网址： 南京科捷分析仪器 网址： 食品中糖精钠的测定 ：高效液相色谱法 （ LC600）