1、生物显微镜的原理及使用,一、实验目的： 掌握普通复式光学显微镜的原理、构造及其使用方法。,二、普通复式光学显微镜原理,是将两个凸透镜系统适当地组合在仪器上对标本进行放大，经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像。,1、照明系统：光源(普通光线可见光)、折光镜、聚光镜、滤光片 2、光学放大系统：两组玻璃透镜目镜、物镜 3、机械装置：保证光学系统的准确配置和灵活调控,三、普通复式光学显微镜构造,普通复式光学显微镜,镜筒,载物台,聚光镜,光阑,粗动螺旋,微动螺旋,照明装置,基座,棱镜,光路图,四、普通复式光学显微镜使用方法,1取镜和安放：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住
2、镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，略偏左（显微镜放在距实验台边缘7cm左右处），镜座后端距桌边46cm为宜，便于坐着操作。安装好目镜和物镜。安装物镜时要用左手食指和中指托住物镜，然后用右手将物镜装上去，这样即使没安装好，也不会摔到地上。,2、对光：用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动)，使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察(右眼睁开)，同时调节反光镜方向，直到视野内的光线均匀明亮为止。 3、放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住
3、，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。,4、调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5mm处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。 如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，一般显微镜的物距在cm左右。如果物距已远超过c
4、m，仍未看到物像，那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋速度过快，此时应调整装片位置，然后再重复上述步骤，当视野中出现模糊的物像时，就要换用细准焦螺旋调节，使看到的物像更加清晰。只有这样，才能缩小，切不可心急而盲目地上升镜台。,5、观察：使用准焦螺旋调节焦距，找到物象可以说是显微镜使用中最重要的一步，也是学生感觉最难的一步。用显微镜观察物体时，应双眼同时睁开，左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。寻找范围，提高找到物像的速度。,6、转换物镜：使用低倍镜后换用高倍镜时应手握转换器的下层转动板转换物镜。不能用手指直接推转物镜，因为这样虽比较省力，但因转换器的材
5、料质地较软，精度较高，螺纹受力不均匀很容易松脱，容易使物镜的光轴发生偏斜。一旦螺纹破坏，整个转换器就会报废。,高倍镜的使用方法：一定要先在低倍镜下选好目标后，把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，然后转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜焦距没有调好，应重新操作。 调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼观察，物象不太清楚的，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.51圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)。如果亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如需要更换玻片标本时，必须顺时针(切勿转错方向
6、)转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。,油镜的使用方法：经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。将集光器上升到最高位置，光圈开到最大。转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。 如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍高倍油镜程序。在加油区内重找应按：低倍油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。 油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去，再用干擦
7、镜纸擦干净。,7、边观察边画图。 8、整理登记：实验完毕，取下标本片，把显微镜的外表擦拭干净。转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜，下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，放回实验台柜内。最后填写使用登记表。,五、光学显微镜的维护要点： 1、取送显微镜时一定要一手握住弯臂，另一手托住底座。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。不可把显微镜放置在实验台的边缘，以免碰翻落地。 2、观察时，不能随便移动显微镜的位置。,3、保持显微镜的干燥、清洁，避免灰尘、水及化学试剂的玷污。显微镜的光学部分只能用特殊的擦镜纸与溶液一同擦拭，不能乱用
8、他物擦拭，更不能用手指触摸透镜，以免汗液玷污透镜。切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。 水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，如果沾污应立即擦净。 4放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，防止压坏玻片或碰坏物镜。,5、转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，只能转动转换器。现在显微镜有电动转换,使用也很方便,是一个发展方向。 6、切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋钮时，用力要轻，转动要慢，转不动时不要硬转。 7、不得任意拆卸显微镜上的零件，严禁随意拆卸物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。,9、用毕将光源调到最小,延长灯泡的使用寿命。 10、物镜和目镜
9、的生霉生雾的处理办法： 准备30%无水乙醇 + 70%乙醚，将不同的镜头单独分开放置干燥剂器皿中，最好用棉花棒，纱布，柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭，注意不能用力擦，以防止损伤镀膜层。油镜当时就要清洗，特别是100X的油镜，处理不当的话，前片容易浸油或开胶。目镜可以自己拆下来清洗，16X目镜注意别装反了，前片凹面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头发来做，易弄脏镜头，厂家可配备一个指针。一般2个月最好能集中保养一次。显微镜多时，各个镜头要标号以免弄错了搭配。,11、透镜的清洁 清洁灰尘用用棉花棒，纱布，柔软的刷子等比较柔软的东西来，注意轻 柔 慢 缓。有些较顽固的污迹如油迹，指纹等，可以用干净的软棉布，棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻轻的擦去。如果是从油镜上擦去浸油，应用镜头纸，软棉布或纱布，蘸上二甲苯轻轻擦去。注意，不要用二甲苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜内的棱镜表面。因为纯酒精和二甲苯容易燃烧，在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。防患于未然。 12.定期检查 显微镜的精细和贵重，要求我们要更加的爱护它。为了保持它的性能的稳定，我们建议您定期的检查，保养。,
