1、实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制(一)2007-05-30 16:13生物标本常用染料性能简介(一)天然染料1、苏木精 苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞
2、中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红是细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。(二)人工染料人工染
3、料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。1、酸性品红 酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染,能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。2、刚果红 刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。他能作染料,也用作指示剂。他在植物制片中
4、常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色,也可用作类淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要迅速。3、甲基蓝 甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保存。4、固绿 固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为 4%)和酒精(溶解度为 9%)。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极
5、广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。5、苏丹 苏丹是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为 0.15%)。苏丹是脂肪染色剂。 6、伊红 这类染料种类很多。常用的伊红 Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15 摄氏度是溶解度达 44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为 2%)。伊红在动物制片中广泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。 7、碱性品(复)红 碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度 1%)和酒精(溶解度 8%)。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核
6、质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中,长用来鉴别结核杆菌。在 尔根氏反应中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。 8、结晶紫 结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度 9%)和酒精(溶解度8.75%)。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用
7、结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保存。 9、龙胆紫 龙胆紫是混合的碱性染料,主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水,主要成分是甲基紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 10、中性红 中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度 4%)和酒精(溶解度 1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做活体染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。 11、番红 番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常
8、用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。 12、亚甲蓝或美蓝 亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度 9.5%)和酒精(溶解度 6%)。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。 13、甲基绿 甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度 8%)和酒精(溶解度 3%)。甲基绿是最有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。 把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生
9、沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。 本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出 0.15 0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 配方二 裴林(Fehling)溶液 (1)把 34.5克硫酸铜溶于 500毫升蒸馏水中。 (2)把 125克氢氧化钾(钠)和 173克酒石酸钾钠溶解在 500毫升蒸馏水中。 上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏(Lugols)溶液(碘液) 取 6克碘化钾溶于 20毫升蒸馏
10、水中,搅拌到溶解后,加入 4克碘,等碘充分溶解,在加入 80毫升蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶内。 碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。 3、检查蛋白质的试剂 配方一 米伦(Millon)试剂 在 60毫升浓硝酸(比重 1.42)中溶解 40克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。 在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。 配方二 双缩尿试剂 分别配制 10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液。 在 3毫升待测物中加入 1毫升 10%氢氧
11、化钠溶液和 1滴 1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。 4、检查脂肪的试剂 苏丹()酒精饱和溶液 取 0.2克苏丹(或苏丹),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。 5、酸碱指示剂 配方一 酚酞试剂和试纸 酚酞试剂 取 1克酚酞,溶解在 100毫升 60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。 酚态试纸 取 1克酚酞,溶解在 100毫升 95%酒精溶液里,加入 00毫升蒸馏水。把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。 酚泰试剂(试纸) pH 值变色范围 8.210,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。 配方二 红
12、蓝石蕊试纸 取市售石蕊 1克,放在 80毫升 10%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。1 份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另 1份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。 6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。 配方一 溴代麝香草酚蓝溶液 取 0.1克溴代麝香草酚蓝,溶解在 100毫升蒸馏水里,滴入少量 0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。 溴代麝香草酚
13、蓝溶液 pH值变色范围是 6.0(黄)7.6(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。 配方二 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。 如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。 7、检查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制 1%中性红溶液和 1%甲基蓝溶液,这两种溶液各取 1份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色(二)分离液 1、肌细胞分离液 配方一 马克
14、凯郎(Maccallum)液 取 1份浓硝酸、2 份甘油、3 份水,混合后就得到马克凯郎液。 把新鲜的肌肉组织小块(横纹肌、心肌和平滑肌)投入这种溶液里浸渍,分离时间需 13 日。这种溶液尤其适于分离横纹肌核心肌细胞。 配方二 氢氧化钾溶液 取 35克氢氧化钾,放在 100毫升蒸馏水中,加热,使它完全溶解后,在室温下冷却。 把新鲜的肌肉组织块投入氢氧化钾溶液中,浸泡 1530 分钟后,肌细胞便可分离。 2、上皮细胞分离液 配方一 福尔马林氯化钾溶液 称取 58.44克氯化钠,用蒸馏水溶解,再稀释到 1000毫升,加入 2毫升福尔马林。 这种溶液是很好的上皮细胞分离液,分离很迅速,而且能保护纤细
15、的上皮细胞纤毛。小肠和气管的上皮组织小块,放在此溶液里 2小时即可分离,口腔和皮肤上皮组织小块的细胞分离一般需 3日左右。 配方二 水和氯醛溶液 称取 5克水和氯醛,用蒸馏水溶解,再稀释到 100毫升,就得到 5%水合氯醛溶液。 从洗净的动物胃、肠和口腔内壁上取下上皮组织一小块,投入以上溶液中,浸泡 2448 小时。 3、神经细胞分离液 配方一 可以用上皮细胞分离液配方一福尔马林氯化钠溶液来分离神经细胞(见 2)。 配方二 硼酸生理盐水溶液 在生理盐水溶液内加入一些硼酸,搅拌到不再溶解时为止,使成为饱和溶液。 把脊椎灰质和脑皮质部位的神经组织一小块投入这种溶液中分离。 4、植物茎细胞分离液 杰
16、弗里氏(Jeffreys)液 取等量的 10%铬酸溶液和 10%硝酸溶液混合,成铬酸硝酸溶液。 这种溶液用来分离木本植物茎部的导管、管胞、筛管、伴胞和韧皮纤维等。把材料切成小块放在水里,加热煮沸,冷却后再加热煮沸。这样重复几次,到材料全部沉于水底后,投入分离液内,分离时间是 2448 小时。 5、植物根尖细胞分离液 配方一 盐酸酒精溶液 在 1份 95%酒精中慢慢的加入 1份浓盐酸,即成盐酸酒精溶液,装瓶密闭保存。把植物根尖部位截下一小段,投入以上溶液中分离。 配方二 4%盐酸溶液 配制 4%盐酸溶液。 截下植物根尖部位,投入盛有 4%盐酸溶液的小烧杯内,在 60摄氏度温水中隔水温热 12 分
17、钟,使根尖软而不酥,这时分离效果最好。 6、植物纤维分离液 取 10克氢氧化钠(或氢氧化钾),溶解在 90毫升水里,制成 10%氢氧化钠(或氢氧化钾)溶液,放在瓶里密闭保存。 把植物茎纵切成细条,剪成小段后,投入分离液内。 7、植物细胞质壁分离液 配方一 30%蔗糖溶液 取 30克蔗糖,溶解在 70毫升蒸馏水里,装瓶备用。 配方二 5%氯化钠溶液 取 5克食盐,溶解在 95毫升蒸馏水里,装瓶备用。 配方三 5%硝酸钾溶液 取 5克硝酸钾,溶解在 95毫升蒸馏水里,装瓶备用。 (三)生理盐水 配方一 各种动物需用的生理盐水 哺乳类 需用生理盐水浓度是 0.9%。称取 0.9克氯化钠,溶解在少量蒸
18、馏水中,稀释到 100毫升。 鸟类 需用的生理盐水浓度是 0.75%。称取 0.75克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100毫升。 两栖类 需用的生理盐水浓度是 0.65%。称取 0.65克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100毫升。 配方二 任氏(Ringers)生理盐水 氯化钠 6.5 克 碳酸氢钠 0.2 克 氯化钾 0.14 克 磷酸二氢钠 0.01 克 氯化钙 0.12 克 先把氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠、磷酸二氢钠分别溶解在少量蒸馏水中,混合后用蒸馏水稀释到 980毫升。然后取氯化钙溶解在 20毫升蒸馏水中,把氯化钙溶液逐滴加入到上述溶液内,边滴、边搅拌,以免产生不溶解的磷酸钙沉淀。 此
19、溶液用于变温动物,尤其常用于两栖类。 配方三 乐氏(Lockes)生理盐水 氯化钠 9.0 克 碳酸氢钠 0.10.3 克 氯化钾 0.42 克 氯化钙 0.24 克 把氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠分别用少量蒸馏水溶解,混合后加蒸馏水到 980毫升。把氯化钙溶解在 20毫升蒸馏水里,逐滴加入上述溶液中。 以上溶液用于恒温动物,尤其常用于哺乳类。 四)培养液 1、人造海水 配方一 氯化钠( ) 24.72 克 氯化钾( ) 0.67 克 氯化钙( ) 1.36 克 氯化镁( ) 4.66 克 硫酸镁( ) 6.29 克 碳酸氢钠( ) 0.18 克 蒸馏水 加到 1升 把上述各种盐溶解在少量蒸馏水中
20、,再加入碳酸氢钠,最后用蒸馏水稀释到1000毫升。 配方二 氯化钠 45.0 克 硫酸镁 0.1 克 氯化镁 5.0 克 氯化铁(1%溶液) 1 滴 先把硫酸镁、磷酸一氢钾、氯化铁用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到 980毫升。随后取硝酸钙溶解在 20毫升蒸馏水里,把此溶液逐滴加到上述溶液内,装瓶保存。 配方二 克诺普氏(Knops)溶液 硝酸钾 1 克 硫酸镁 1 克 磷酸二氢钾 1 克 硝酸钙 3 克 先把硝酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钾用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到 980毫升。随后取硝酸钙,用 20毫升蒸馏水溶解,加入到上述溶液内。溶液灰形成白色沉淀,在使用是必须摇动。 在以上溶液中加入蔗糖溶液(1
21、4%),能刺激某些藻类形成游动孢子。该液用于培养绿藻。 3、植物无土培养液 配方 霍格伦德(Hoagland)和斯纳德(Snyder)液 硝酸钙 0.821 克 硝酸钾 0.506 克 磷酸二氢钾 0.136 克 硫酸镁 0.120 克 酒石酸铁 0.005 克 把上述盐类溶解在少量蒸馏水里,然后稀释到 1000毫升。 (五)培养基 1、细菌培养基 配方一 牛肉膏琼脂培养基 牛肉膏 0.3 克 蛋白胨 1.0 克 氯化钠 0.5 克 琼脂 1.5 克 水 1000 毫升 在烧杯内加水 100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂
22、,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用 10%盐酸或 10%的氢氧化钠调整 pH值到7.27.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌 30分钟。 配方二 马铃薯培养基 取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250 克,用刀细细剁成肉末后,加入 500毫升蒸馏水和 5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖 2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液 pH值调到 7.5左右。每支试管内加入 10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。 配方四 根瘤菌培养基 葡萄糖 10 克 磷酸氢二钾 0.5 克 碳酸钙 3 克 硫酸镁( ) 0.2 克 酵母粉 0.4 克 琼脂 20 克 水 100
23、0 毫升 1%结晶紫溶液 1 毫升 先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。 2、放线菌培养基 配方一 淀粉琼脂培养基(高氏培养基) 可溶性淀粉 2 克 硝酸钾 0.1 克 磷酸氢二钾 0.05 克 氯化钠 0.05 克 硫酸镁 0.05 克 硫酸亚铁 0.001 克 琼脂 2 克 水 1000 毫升 先把淀粉放在烧杯里,用 5毫升水调成糊状后,倒入 95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整 pH值到 7.27.4,分装后灭菌,备用。 配方二 面粉琼脂培养基 面粉 60 克
24、琼脂 20 克 水 1000 毫升 把面粉用水调成糊状,加水到 500毫升,放在文火上煮 30分钟。另取 500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整 pH值到7.4,分装,灭菌,备用。 3、真菌培养基 配方一 萨市(Sabourauds)培养基 蛋白胨 10 克 琼脂 20 克 麦芽糖 40 克 水 1000 毫升 先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入 40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。 本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。 配方二 马铃薯糖琼脂培养基 把马铃薯洗净去皮,取 200克切成小块,加水 1000毫升,煮沸
25、半小时后,补足水分。在滤液中加入 10克琼脂,煮沸溶解后加糖 20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。 把这培养基的 pH值调到 7.27.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。 配方三 黄豆芽汁培养基 黄豆芽 100 克 琼脂 15 克 葡萄糖 20 克 水 1000 毫升 洗净黄豆芽,加水煮沸 30分钟。用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到 1000毫升,分装,灭菌,备用。 把这培养基的 pH值调到 7.27.4,可用来培养细菌和放线菌。 配方四 豌豆琼脂培养基 豌豆 80 粒 琼脂 5
26、克 水 200 毫升 取 80粒干豌豆加水,煮沸 1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用4、食用菌菌种培养基 配方一 马铃薯蔗糖-琼脂培养基 20%马铃薯煮汁 1000 毫升 蔗糖 20 克 琼脂 18 克 把马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取马铃薯小块 200克,加水 1000毫升,煮沸 20分钟后,过滤。在滤汁中补足水分到 1000毫升,即成 20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。使用该培养基对 pH值要求不严格,可以不测定。 配方二 综合马铃薯培养基 20%马铃薯煮汁 1000 毫升 磷酸二氢钾 3 克
27、硫酸镁 1.5 克 葡萄糖 20 克 维生素 10 毫克 琼脂 18 克 先配制 20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整 pH值到 6。分装,灭菌,备用。 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。 (六)染色剂 1、细菌染色剂 配方一 齐氏(Ziehl)石炭酸品红染液 甲液 取石炭酸 5克,溶解在 95毫升蒸馏水中。 乙液 取 0.3克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入 10毫升 95%酒精,继续淹没,使它溶解。 将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。 配方二 罗氏(Loefflers)美蓝染液 甲液 取 5克美蓝,溶于 100毫升 9
28、5%酒精中,制成美蓝酒精饱和液。 乙液 取氢氧化钾 0.01克(或 1%氢氧化钾溶液 1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。 配方三 革兰氏(Grams)染液 用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液处理,最后用丁液复染。四种液体的配方如下: 甲液(结晶紫液) (1)结晶紫 2 克 95%酒精 20 毫升 (2)草酸铵 0.8 克 蒸馏水 80 毫升 使用钱江(1)、(2)液相混,静置 48小时后使用。 乙液(碘液) 碘 1 克 碘化钾 2 克 蒸馏水 300 毫升 将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至 300毫升。 丙液 95%酒精
29、溶液 丁液(番红花红液) 2.5%番红花红酒精溶液 10 毫升 蒸馏水 100 毫升 2、细菌特殊染色剂 配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。 甲液 取 5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到 100毫升,即成孔雀绿染液。 乙液 取番红花红 0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到 100毫升,集成番红花红复染液。 配方二 荚膜染液 此配方先用甲液染色,后用乙液复染。 甲液 取结晶紫 0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到 100毫升,再加入 0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。 乙液 取硫酸铜( )31.3 克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到 10
30、0毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。 配方三 鞭毛染液 甲液 饱和明矾溶液 2 毫升 5%石炭酸溶液 5 毫升 20%丹宁酸溶液 2 毫升 乙液 碱性品红 11 克 95%酒精 100 毫升 使用前取甲液 9毫升和乙液 1毫升相混,过滤即可。 3、植物细胞壁染色剂 配方一 纤维素细胞壁染液() 取固绿 0.1克,溶于 100毫升 95%酒精中,即成 0.1%固绿酒精溶液。 该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。 配方二 纤维素细胞壁染液() 氯化锌 20 克 碘化钾 6.5 克 碘 1.5 克 蒸馏水加至 100毫升 先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入 6.5克碘化钾,在碘完全溶解后
31、,用蒸馏水稀释到 100毫升,即成碘氯化锌溶液。 该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。 配方一 纤维素细胞壁染液() 甲液 取 1克碘和 1.5克碘化钾,溶于 100毫升蒸馏水中,即成 1%碘液。 乙液 取 7份硫酸和 3份蒸馏水相混,即成 66.5%硫酸溶液。 染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。 配方四 木质化细胞壁染液() 硫酸化苯胺(或盐酸话本安) 1 份 蒸馏水 70 份 95%酒精 30 份 硫酸 30 份 将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。 配方五 木质化细胞壁染液() 取间苯三酚 45
32、克,溶于 100毫升 95%酒精中,即成间苯三酚酒精液。 先在材料上滴上 1滴浓盐酸,然后滴上间苯三酚酒精液 1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。 配方六 木质化细胞壁染液() 取 1克番红,溶于 99毫升蒸馏水中,即成 1%番红溶液。 4、细胞质染色剂 配方一 伊红染液 伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。 (1)取 1克伊红,溶于 99毫升蒸馏水中,即成 1%伊红水溶液(市售红墨水内含伊红成分,可以用红墨水稀释液来代替本溶液)。 (2)取 1克伊红,溶于 99毫升 70%酒精中,即成 1%伊红酒精溶液。 配方二 甲基蓝染液 取 1克甲基蓝,溶于 29毫升 70%酒精中,加入 70毫升
33、蒸馏水,即成 1%甲基蓝染液。 配方三 亮绿染液 取 0.5克亮绿,溶解在 100毫升蒸馏水中,即成 0.5%亮绿溶液。 5、细胞核染色剂 配方一 甲基绿染液 取 1克甲基绿,溶于 99毫升蒸馏水中,加入 1毫升冰醋酸。本染液能染细胞核,还用来染木质化细胞壁。 配方二 龙胆紫染液 取 1克龙胆紫,溶于少量 2%醋酸溶液中,加 2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。 配方三 美蓝(亚甲基蓝)染液 取 0.5克美蓝,溶于 30毫升 95%酒精中,加 100毫升 0.01%氢氧化钾溶液,保存在棕色瓶内 。 此溶液能染细胞核,还用来染细菌、血和神经组织等。 配方四 硼砂洋红染液 取 4克硼砂,溶于 96毫升蒸馏水中。再加入 2克洋红,加热溶解后煮沸 30分钟,静置 3日,用 100毫升 70%酒精冲淡,放置 24小时后过滤。 此染液能染细胞核,还用来染糊粉粒和一般动物、植物的整体染色,如水螅、血吸虫等整体标本。 配方五 德氏(Delafields)苏木精染液 甲液 取 1苏木精,溶于 6毫升无水酒精中,即成苏木精酒精溶液。 乙液 取 10克铵矾溶于 90毫升蒸馏水中,即成 10%铵矾水溶液。 取甲液逐滴加入到乙液中,用纸遮盖,放在阳光明亮处,使它充分氧化。34天后将溶液过滤,在滤液中加入 25毫升甘油和 25毫升甲醇,保存在密闭玻璃