1、农业仪器权威门户 http:/ 11 号 联系电话：0571-81953317 http:/ 75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。农业仪器权威门户 http:/ 11 号 联系电话：0571-81953317 http:/ 7-1.2)，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧过烫)。(6)将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。(7)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。(8)接
2、种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。(9)将接种环烧红灭菌。放下接种环，再将棉花塞旋紧。2、液体接种(1)由斜面培养基接入液体培养基，此法用于观察细菌的生长特性和生化反应的测定，操作方法与前相同，但使试管口向上斜，以免培养液流出接入菌体后，使接种环和管内壁磨擦几下以利洗下环上菌体。接种后塞好棉塞将试管在手掌中轻轻敲打，使菌体充分分散。(2)由液体培养基接种液体培养基，菌种是液体时，接处除用接种环外尚用无菌吸管或滴管。接种时只需在火焰旁拔出棉塞,将管口通过火焰,用无菌吸管吸取菌液注入培养液内,摇匀即可。3、平板接种农业仪器权威门户 http:/ 11 号 联系电话：0571-81953317
3、http:/ 见分离划线法。(2)涂布接种 用无菌吸管吸取菌液注入平板后，用灭菌的玻棒在平板表面作均匀涂布。4、穿刺接种把菌种接种到固体深层培养基中，此法用于嫌气性细菌接种或为鉴定细菌时观察生理性能用。(1)操作方法与上述相同，但所用的接种针应挺直。(2)将接种针自培养基中心刺入，直刺到接近管底，但勿穿透，然后尚原穿刺途径慢慢拔出。(二)分离的操作方法1、稀释分离法通过不断稀释使被分离的样品分散到最低限度，然后吸取一定量注入平板与温度适合溶化了的琼脂培养基混合，这样分散的细菌被固定在原处而形成单菌落。(1)将大肠杆菌或酵母菌用无菌水制作菌悬液。(2)取若干支无菌试管，每支内盛 9ml 无菌水。
4、(3)吸取 1ml 制备好的菌悬液，置于第一支含有 9ml 无菌水的试管内，这样就稀释了 10 倍，也就是 10-2。(4)从第一支试管内(10-2)吸取 1ml 注入第二支含有无菌水的试管内，这样就稀释了 100 倍，也就是 10-2。(5)用同样方法操作，直至稀释至 10-5-10-6。农业仪器权威门户 http:/ 11 号 联系电话：0571-81953317 http:/ 10-5-10-6 各稀释度菌液 0.2ml 加入编好号的空无菌平皿中，同一稀释度重复做三个平皿。(7)将已溶化并冷却至 45的琼脂培养基倒入上述各平皿内，轻轻旋转使培养基与菌悬液充分混匀，凝固后倒置于 37或 3
5、8度恒温箱中培养 24-48 小时，观察平板上菌落生长和分布情况。2、平板划线分离法平板划线分离法是接种环在平板培养基表面通过分区划线而达到分离微生物的一种方法。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的。(1)倒平板 溶化牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平板，水平静置待凝。(2)在酒精灯光焰上灼烧接种环，待冷，取一接种环金黄葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。(3)左手握琼脂平板稍抬起皿盖，同时靠近火焰周围，右手持接种环伸入皿内，在平板上一个区域作之形回划线，划线时例接种环与平板表面成 30-40角度轻轻接触，以腕力在表面作轻快的滑动，勿使平板表面划破或嵌进增基内。(4)灼烧接种杯，以杀灭接种环上尚残余的菌液，待冷却后，再将接种环伸入皿内，在第一区域划过线的地方稍接触一下后，转动 90，在第二区域继续划线。(5)划毕后再灼烧接种杯，冷却后用同样方法在其他区域划线(图 7-8、9)。(6)全部划线完毕后，在平皿底用特种蜡笔注明菌种、日期、组别、姓名。将整个培养皿倒置放入恒温箱培养。农业仪器权威门户 http:/ 11 号 联系电话：0571-81953317 http:/ 24-48 小时培养后取出观察。注意菌落的开关、大小、颜色、边缘、表面结构、透明度等性状。更多农业仪器信息来自中国农业仪器网 http:/
