细菌的推断试验和确认试验.doc

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1、细菌的推断试验和确认试验问题描述:我在检测大肠杆菌的时候,推断试验和确认试验都必须完成吗?问题解答:微生物学试验通常分两阶段进行。第一阶段称为推断试验,使用允许受抑制的和受损害的微生物生长的介质。如果样品中存在目标微生物,介质可能会发生颜色变化,出现混浊或产生气体作为指示。然而,有些时候非目标微生物也可能引起介质变色或产生浊度或气体,呈现虚假的阳性,从而干扰试验。为了确定推断试验的阳性结果所指示的确实是目标微生物(例如大肠杆菌),需要使用确认介质。用于确认试验的介质对非目标微生物限制性的,而且只含有供目标微生物生长的营养物质。如果目标微生物受到抑制或受损害,他们可能无法在确认介质中生长,从而导

2、致虚假的阴性结果。这就是为什么总是先进行推断试验的原因。有些介质,例如用于检验总大肠菌群和 E. coli 的 m-coliBlue24 液体培养基,以及含有 MUG 的液体培养基不需要确认试验,因为非目标微生物不会产生干扰。细菌检验对培养箱的要求问题描述:我没有恒温培养箱。有什么无需恒温培养箱就能进行微生物学试验的方法吗?问题解答:为了提供目标微生物生长的合适条件和抑制非目标微生物的生长,保持恒定的温度是必须的。如果温度过高,微生物可能死亡。如果温度过低,微生物可能无法正常生长而非目标微生物却可能大量繁殖。使用恒温培养箱保持恒定的温度是保证结果准确性的唯一方法。用于产硫化氢细菌的 Patho

3、Screen 介质和用于多种细菌的 BART 检测剂是唯一对温度没有严格要求的试验。BART 检测剂可以在室温下培养,而 PathoScreen 可在 25 至 35范围内培养检验总大肠菌群和粪便大肠杆菌问题描述:我要检验总大肠菌群和粪便大肠杆菌。我能使用 m-ColiBlue24 试验吗?问题解答:样品中存在总大肠菌群和粪便大肠杆菌时,m-ColiBlue24 试验都会呈阳性。E. coli检验结果可能是存在粪便污染的最佳指示性大肠杆菌,而 m-ColiBlue24 介质不能用于检验所有的粪便大肠杆菌。当你需要检验粪便大肠杆菌时请使用 m-FC 液体培养基。微生物检验的详细操作步骤问题描述:

4、我收到了你们的检验用的液体培养基但是每收到操作步骤。我该如何进行检验?问题解答:Hach 的许多微生物学操作步骤有 PDF 格式的版本。你可以在文件下载区下载详细操作步骤。如何检验细菌?问题描述:我该如何检验细菌?问题解答:总的来说,检验细菌需要将样品放入液体培养基或琼脂培养基中,在培养箱内培养以促进所关注的生物生长,以及寻找能表征这种微生物的反应。有很多种方法:P/A 法或存在/不存在法,MPN 法或最可能数法,MF 法或膜过滤法,以及 HPC 法或异养菌平板计数法。HPC 法测定水中所有细菌种群,而其他方法测定的是指示微生物例如大肠杆菌。P/A法是最简单的方法,需要将样品放入装有液体培养基

5、的瓶子里,恒温培养 24 至 48 小时。如果指示微生物存在于样品中,液体培养基的颜色就会发生改变。USEPA 采用 P/A 法作为报告饮用水水样中大肠杆菌含量时使用的方法。MPN 法需要将样品或稀释过的样品加入 10 至 15 支试管中,恒温培养 24 至 48 小时。如果指示微生物存在于样品中,就能看见产气或浑浊现象。MPN 法特别用于污水或浑浊水样,通过查对一张呈阳性的试管数的表格,以每 100mL 样品的 MPN 的形式给出测定结果。MF 法需要将样品或稀释过的样品过滤,将滤纸放入培养皿培养 24 至 48 小时。测定结果以每 100mL 样品的菌落数的形式给出。所有方法给出的阳性结果

6、一般都需要用不同的液体培养基确证,有时甚至需要用不同的培养温度。m-coliBlue24 是一种得到广泛使用的测定总大肠菌群和 E. coli 的 MF 方法,因为这种方法的结果不需要另外确证,而且最长培养期为 24 小时。如果需要查找更多的细菌检验的相关内容,请参阅学习图书馆中的文献#7015 和7047,评估公众用水安全的指示微生物的使用方法和微生物实验室建立指南。硝酸盐NitraVer5 或 NitraVer6 试剂的处理问题描述:我应该怎样处理含镉的 NitraVer5 或 NitraVer6 废弃试剂呢?问题解答:您应该根据药品安全数据单并依照有害废弃物处理条例来处理含镉废物。联邦性

7、的条例有可能被州或地方条例所替代,所以您还需要到制定规章的地方机构去核实废物处理办法。美国环保局还提供了一个热线电话:800-424-9346,拨打这个热线您可以得到制定规章的地方机构的联系方法。NO3的检测结果大于平时的 4 倍问题描述:我的 NO3 检测结果是平时的 4 倍,可能是由于什么原因造成的?问题解答:这很可能是由于 NO3 在您的 Hach 比色计或分光光度计上的显示模式造成的。一般默认的情况是显示 NO3-N,氮以硝酸盐的形式表示,这也是向管理机构上报数据的一般形式。但 Hach 的仪器也可以直接用 NO3表示结果。不管氮的表示形式如何,根据颜色测量出的结果总是一样的,但当把以

8、颜色表示的结果转换成浓度时,不同的表示形式会有不同的结果。以 NO3-N(mg/L)表示只计算元素氮(在 NO3中)的质量,而以 NO3(mg/L)表示则计算全部NO3的质量,后者约为前者的 4.4 倍。若要改变您仪器的显示模式,只需按 DR/800 型比色计上的 CONC 键或在分光光度计上直接选择即可。当然,您在记录检测结果时还需记下数据的表示形式。盐类对检测的干扰问题描述:在使用硝酸镉还原法检测时,对于含盐样品总得到偏低的结果。我该怎么办?问题解答:如果样品中的氯化物浓度高于 100mg/L,将减慢与 NitraVer5 和 NitraVer6 试剂的反应速度。要解决这个问题,您可以通过

9、用已知浓度的 NO3 标准溶液(该标准溶液与被测样品一样含有相同浓度的氯化物)来校准仪器,或是改换另一种分析方法。用高浓度范围 NO3检测方法对低浓度样品进行检测,但结果较差题描述:我正在检测一个高浓度 NO3 样品,并预计结果约为 1mg/L,但最后读数却不具有可重现性。这是因为什么?问题解答:NitraVer5 试剂一般只适用于高浓度的 NO3 检测,而对于低浓度 NO3 样品,由于它不够敏感而易导致结果的可重现性很差。为了得到最好的检测结果,您在检测低浓度 NO3样品时应该使用 NitraVer6 和 NitriVer3 试剂。检测低浓度的 NO3时指示剂不显色问题描述:我正检测一个低浓

10、度的 NO3 样品但没有任何颜色,出了什么问题?问题解答:您应确保已向样品中加入了 NitraVer6 和 NitriVer3 试剂。NitraVer6 试剂还原 NO3为 NO2 ,NitriVer3 试剂与 NO2 反应并呈粉红色。您可以配制一标准浓度的 NO3 溶液代替未知样品进行检测,通过与检测结果的对比来确保整个操作过程的正确性。硝酸盐检测结果不具有可重现性,我可以做什么?问题描述:同题目。问题解答:硝酸镉Cd(NO 3)2还原法对振荡样品操作的要求很高。在振荡样品过程中,镉离子会把一部分 NO3 还原为 NO2 ,然后 NO2 与指示剂反应产生颜色。如果样品未得到充分振荡,被还原的

11、 NO3 将会少于正常,检测结果势必偏低。反之,如果振荡过于剧烈,结果将偏高。在加入 NitraVer5 或 NitraVer6 试剂后,您必须确保每个样品的振荡力度基本一致,这样才能得到准确的结果。您可以配制标准的 NO3 溶液替代未知样品进行检测,并根据结果来判断您的操作是否恰当。如果检测结果偏离了标准溶液的实际浓度,您可能需要改进振荡操作的方法。您还需要检测试剂的空白值,并从未知样品的结果中减去。一般中等或较高浓度的 NO3 样品会有较大的空白值。氧化还原电位用于 ORP 测定的 Lights 溶液的使用问题描述:我该如何使用 Lights 溶液检查我的 ORP 探针?问题解答:ORP

12、探针无法标定,但使用已知 ORP 值的样品可以检查它们是否能给出正确的读数。打开一只 Lights 溶液安瓿管(使用安瓿管开瓶器 25640-00),倒入 50mL 烧杯中。用水浴或恒温箱将溶液温度保持在 25。将 ORP 探针伸进溶液,等待大约 510 分钟至读数稳定。ORP 读数应为 475(+/-10)mV。如果读数超出了这个范围,尝试将探针在 1:1 的硝酸溶液中浸泡 15 分钟,用去离子水淋洗后重新测定。PH 值PH 缓冲溶液在色度计中的读数不正确问题描述:我的 DR/820,850,890 或便携式色度计检查一份 pH 值为 7 的缓冲溶液的 pH 值,读数与应当出现的读数不太接近

13、。我该怎么办?问题解答:请先确定你使用的缓冲溶液是无色的(目录编号 12222-49 或 12222-56),尤其不是黄色的。将 10mL 缓冲溶液倒入样品试管中,加入酚红。用未加入酚红的缓冲溶液将仪器调零,然后读取加入酚红的缓冲溶液的读数。如果读数出现少量偏离,你可以使用标样校准功能来调整标定。测量 pH 值的方法问题描述:除了使用 pH 电极以外,还有什么测量 pH 值得方法?什么时候我可以使用它们?问题解答:如果不需要进行正规的报告,可以用便携式 pH 测定仪,测定工具箱,色度计或是 pH试纸测定 pH 值。请选择最符合你对测定的准确度要求并且便于使用的方法。当样品有颜色或浑浊不清时应当

14、使用便携式 pH 测定仪。便携式测定仪可以在全 pH 范围内测量,测定结果可准确至 0.1pH 单位,但是需要用 pH 缓冲溶液对它们进行日常标定。测定工具箱和色度计在有限的 pH 范围内的准确度可达 0.1 至 0.5pH 单位,而 pH 试纸给出的是半定量的结果。氯等氧化剂会干扰这些测定。在加入 pH 指示剂前向样品中加入一滴浓度为 0.1N 的硫代硫酸钠可以避免氯的干扰。我需要什么来测定可以作为报告提交的 pH 值?问题描述:我要测定 pH 值并将结果报告给管理机构。为此我需要什么?问题解答:如果你要将结果报告给 USEPA 这样的机构,你必须使用 pH 电极和 pH 计,例如sensI

15、ON 型 pH 计。pH 计可以给出最佳的准确度和灵敏度,可以在全 pH 范围内测量,而且适用于大多数水样。但是需要用 pH 缓冲溶液对它们进行日常标定。Hach 的 pH 计配有缓冲溶液,并附有对于简化的标定方法的详细说明。磷膦酸酯化合物的换算因子问题描述:我该如何确定操作步骤上未列出的磷酸盐化合物的换算因子?问题解答:测定磷酸盐时将所有的磷酸盐化合物转化为磷酸盐,然后测定由磷酸酯化合物引起的磷酸盐的增量。特定的磷酸酯化合物的换算因子可以由该种化合物相对于磷酸根的分子量以及其分子中的 PO4(或 PO3)基团的个数确定:换算因子 = 磷酸酯化合物的分子量/(PO4 的分子量PO4 或 PO3

16、 基团的个数)范例:MDTP 的换算因子是多少?MDTP 的分子量(MW)是 490g/mole磷酸根的分子量是 95g/mole每个 MDTP 分子中含有 4 个 PO3 基团换算因子是:490/(954)=1.29在这个例子中,将你的仪器上显示的结果乘以 1.29 就能得到你的样品中 MDTP 的浓度磷酸盐 PO4 检测装置的反应时间问题描述:我在加入磷酸盐试剂后应当等待多长时间以进行反应?测定工具箱的说明书上只说不要超过 15 分钟。问题解答:这个测定工具箱的说明书上应该是写着在加入试剂后等待 5 分钟。这个时间应当出现在低量程测定说明的步骤 3 和高量程测定说明的步骤 4 中。磷酸盐测

17、定结果与其他实验室测定的结果的对比问题描述:其他实验室报告的我的样品中磷含量只有我用 Hach 测试工具箱/色度计/分光光度计测出的结果的 1/3 左右。这是什么问题?问题解答:在比较测定结果时应首先确定结果使用了相同的化学形态和单位,这是很重要的。Hach 的仪器和工具箱报告的磷含量是以 mg/LPO43-表示的。而其他的检测实验室的报告中常常以mg/LP 表示磷含量,这样得到的浓度大约是以 PO43-表示的浓度的 1/3。无论以何种形态表示,色度测定的结果都是一样的。但是将色度换算为浓度时,采用不同的化学形态表示结果就要使用不同的换算方法。换算成以 mg/LPO43-表示应使用 PO4 的

18、重量,而换算成以 mg/LP 表示应使用 P 的重量,这大约是 PO4 的重量的 1/3。因此,3mg/L PO43-相当于 1mg/LP。(实际的换算是:将以 mg/LPO43-表示的结果除以 3.07,得到以mg/LP 表示的结果。)由于多种原因,人们使用不同的化学形态表达同样的结果。其中有些情况是特别规定的。Hach 的多数色度计和分光光度计都是以 PO43-作为磷的默认化学形态,但通过从键盘或触摸屏上进行选择,它们也可以显示以其他形态表示的浓度。如果你比较的是使用同样的浓度单位和化学形态表示的测定结果,请确认你的操作步骤与你的仪器上使用的程序相符。通常来说,最好先测定一份标准溶液以确定

19、你测定已知磷含量的样品时能够得到正确的结果。确认你的标准溶液使用的单位和磷的化学形态与你用于表示测定结果的相同。我应该测定活性磷,可酸水解性磷还是总磷?问题描述:我应该测定活性磷,可酸水解性磷还是总磷?问题解答:磷在水中几乎只以磷酸盐的形式存在。磷酸盐可以溶解,吸附在颗粒物上,或是存在于水生生物体内。磷酸盐可能以最简单的正磷酸盐(PO43-)形态存在,也可能以分子量更大的形态,例如缩合磷酸盐和有机磷酸盐,存在。正磷酸盐常被称为活性磷,因为只有这种磷酸盐会和比色法测定磷酸盐的试验中所用的试剂直接发生反应。这种类型的磷酸盐被植物、细菌和藻类所利用,被认为是湖泊等地表水体中的一种限制性营养盐。化肥含

20、有正磷酸盐,并可能随着农业用地的径流进入水体,使水体中含有大量磷元素。缩合性磷酸盐(指焦磷酸盐,偏磷酸盐或是多磷酸盐)是两个或多个连接在一起的正磷酸根。它们是很强的配位剂,被广泛的用于锅炉水的处理系统中,也是许多清洁剂的成分。要测定缩合性磷酸盐可参照测定可酸水解性磷的方法和步骤。这需要将样品与强酸一起加热,使缩合性磷酸盐分解为简单的正磷酸盐分子。测定可酸水解性磷既可以测出缩合性磷,又可以测出活性磷:缩合性磷酸盐 = 可酸水解性磷 - 正磷酸盐有机磷酸盐包含一个或多个连接在有机分子,例如糖,上的正磷酸根。它们主要由生物过程形成。在植物或动物的组织等有机物,含人畜粪便和食物残余物的污水和农药中均存

21、在有机磷酸盐。测定有机磷酸盐可参照测定总磷的方法和步骤。这需要将样品与强酸和强氧化剂(例如过硫酸盐)一起加热,使有机磷酸盐转化为正磷酸盐。这个测定可以测出有机磷,缩合性磷和活性磷:有机磷酸盐 = 总磷二氧化硅用高量程二氧化硅分析仪测定一份标准溶液的结果偏高或偏低问题描述:用我的色度计或分光光度计测定一份浓度为 50mg/L 的二氧化硅标准溶液,最终结果有时偏低(例如,42mg/LSiO2),有时偏高(例如,56mg/LSiO2)。这是什么问题?问题解答:高浓度二氧化硅测定方法对测定波长的设定很敏感。如果你的仪器设定的波长与应该使用的波长有些许不同,你的结果就可能比实际上的稍微偏低或偏高。首先确

22、定你的标样(standard)的制备是精确的,并且是严格按照操作步骤进行的。如果你的测定结果依然偏低或偏高,使用仪器的标样校准功能来校准仪器使之读出正确的标样浓度。如果使用的是 DR/2000 或 DR/2010 分光光度计,按照仪器手册上更换光源灯部分描述的方法调整波长标准曲线,然后重新测定。如果结果还是偏低(或偏高),试着更换光源灯,并重新调整波长标准曲线。银我该使用快速银检测装置中的白色滤纸还是蓝色滤纸?问题描述:我该使用快速银检测工具箱中的白色滤纸还是蓝色滤纸?问题解答:快速银检测工具箱中,用蓝色的塑泥片把滤纸隔开,以免滤纸粘在一起。白色的是滤纸片,蓝色的可以丢弃掉阴离子表面活性剂表面

23、活性剂/清洁剂测试主要检测什么物质?问题描述:表面活性剂/清洁剂测试主要检测什么物质?问题解答:这项检测主要针对合成清洁剂,包括洗衣、洗碗、洗车用清洁剂等。尽管表面活性剂是指能降低水表面张力的物质,包括肥皂和清洁剂,但 Hach 并不检测肥皂。肥皂是脂肪酸盐,而清洁剂主要是磺酸盐。Hach 主要检测 LAS(直链烷基磺酸盐)型清洁剂和 ABS(烷基苯磺酸盐)型清洁剂。TDS(总溶解固体)便携式 TDS 检测仪不能校准问题描述:如果便携式 TDS 检测仪不能校准,我将怎么办?问题解答:首先您应确保使用最新的标准并按照校准说明正确地操作。如果在这种情况下仍无法校准,那么您可能应该更换一个了。总凯氏

24、氮发现向总凯氏氮(TKN)样品中添加 KOH 后出现的蓝色?问题描述:我向 TKN 样品中添加 KOH 时总是很难看到应当出现的蓝颜色。有什么比较容易的解决办法吗?问题解答:在特定的 pH 下,TKN 的指示剂会改变颜色。你可以先测定样品的 pH 值,然后直接向其中加入浓度为 8.0N 的 KOH 直到 pH 大约为 3,而无需注意蓝色是否出现。随后加入浓度为1.0N 的 KOH,将 pH 调节到 4 和 6 之间,然后进行后续的检测。使用标准铵溶液检查 TKN 测定的准确性?问题描述:说明书在介绍检查 TKN 测定的准确性这一步时说测定 1mg/L 的 NH3-N 标准液的 TKN,读数应当

25、在 26 至 27mg/L TKN 之间。为什么读数应当在此范围内?问题解答:使用标准铵溶液能够很好的检查你的仪器、试剂和所用的技术是否在测定 TKN 的过程中正常工作。需要稀释两份标准液以作出标准曲线。另外,标准液的稀释也应当计算在内。TKN的标准曲线包括一个稀释因子 33.3。考虑到 Digesdahl 消解液是由 25mL 稀释至 100mL(稀释了 4 倍),分析过程中又取 3mL 稀释至 25mL(稀释了 8.33 倍),可以算出稀释因子(48.33=33.3)。计算的最后一步还考虑了其他一些调整因素。如果使用 25mL 未经消解的 1mg/L 的 NH3-N 标准液,显示的浓度应当

26、是 33.3。但是,只取了 20mL 标准液倒入混合筒。这使得显示的结果不是 33 而是 27:1mLNH 3-N33.320mL/25mL=26.7mg/L。使用 TKN 一级标准物质检查测定的准确性问题描述:如果我用 TKN 一级标准物质,例如 Ammonia PTSA,Glycine PTSA,Nicotinic Acid PTSA,(标准集目录编号 2277800),来检查 TKN 测定的准确性,结果应该是多少?问题解答:使用 TKN 一级标准物质检查时显示的结果取决于你是直接将标准物质(固体)放入消解瓶,还是先将其配制成溶液,再取一份溶液进行消解。如果是固态消解(直接将标准物质固体放

27、入消解罐),按照步骤计算的最终结果应当是:Ammonia PTSA:74,020ppmGlycine PTSA:56,640ppmNicotinic Acid PTSA:47,430ppm如果是液态消解(使用将 10g 标准物质稀释至 1 升得到的溶液),按照步骤计算的最终结果应当是:Ammonia PTSA:740ppmGlycine PTSA:566ppmNicotinic Acid PTSA:474ppm如果配置溶液时加入的标准物质的量不是 10g 而是其它量,液态消解的结果将发生变化。如果实际测定的结果与理论值显著不同(偏差大于 10%),则参照 TKN 测定手册上的标准溶液法,使用 1mg/L 标准铵溶液。如果使用标准铵溶液时得出的结果正确,那么可能是消解过程出了问题。大迈仪器作为美国 HACH 哈希苏州地区的代理商,在 HACH 公司的直接支持下,专注于为该地区的客户提供最直接、最专业、最及时的服务。如果您需要 HACH 哈希产品或相关服务,请联系我们,让客户满意是我们和 HACH 哈希公司共同的目标。大迈仪器有限公司电话:(86)21-63549265 63546839 63534548 传真:(86)21-63546840地址:上海市闸北区天目西路 511 号 2006 室邮件: sales_shstrider-

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