1、常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品） 、储品规（放置消毒过的物品） 、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品） 、PH 计（测量培养用液 PH 值） 、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液） 。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物） 、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80） 、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录） 。必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞） 、超净工作台、倒置显微镜、CO2 孵箱（孵育培养物） 、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4冰箱（放置 serum 和培养用液） 。无菌操作无菌室的灭菌：1、定期打
2、扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用 3来苏尔或者新洁尔灭或者 0.5过氧乙酸擦拭。2、CO2 孵箱（培养箱）灭菌：先用 3新洁尔灭擦拭，然后用 75酒精擦拭或者 0.5过氧乙酸，再用紫外灯照射3、实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各 20-30 分钟4、实验后灭菌：用 75酒精（3新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。实验人员的无菌准备：1、肥皂洗手。2、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋3、用 75酒精棉球擦净双手。无菌操作的演示：1、凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用 75酒精擦拭瓶子的外表面2、
3、靠近酒精灯火焰操作。3、器皿使用前必须过火灭菌4、继续使用的器皿（如瓶盖、滴管）要放在高处，使用时仍要过火。5、各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。6、吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。器械的清洗和消毒玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：1、自来水刷洗，除去灰尘。2、烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入 5稀盐酸中 12 小时以除去脏物、铅、砷等物。3、刷洗、烘干：12 小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。4、泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾 120g：浓硫酸 200ml：蒸馏水 1000ml）浸泡 12 小时，
4、然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗 15 次，最后蒸馏水冲洗 3-5 次和用双蒸水过 3 次。5、烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸（油光纸）包装。6、高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向 15 磅时，维持 20-30 分钟。7、高压消毒后烘干二、旧的玻璃器皿的洗消：1、刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液（洗涤剂）的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。2、泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液（酸液） ，12 小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗（避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗） ，再用
5、蒸馏水冲洗 3 次。3、烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸（油光纸）等包装，以便于消毒储存及防止灰尘和再次被污染。4、高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内，盖好盖子，打开开关和安全阀，随着温度的上升安全阀冒出蒸气，当蒸气成直线冒出 3-5 分钟后，关闭安全阀，气压表指数随之上升，当指针指向 15 磅时，调节电开关维持 20-30 分钟即可。 （玻璃培养瓶消毒前可将胶帽轻轻盖上）5、烘干备用：因为高压消毒后器皿会被蒸气打湿，所以要放入烤箱内烘干备用。金属器械洗消：金属器皿不能泡酸，洗消时可先用洗涤剂刷洗，后用自来水冲干净，然后用 75酒精擦拭，再用自来水，然后用蒸馏水冲洗，再烘干或空气中晾
6、干。放入铝制盒内包装好在高压锅内 15 磅高压（30 分钟）消毒，再烘干备用。橡胶和塑料：橡胶和制品通常处理方法是：先用洗涤剂洗刷干净，再分别用自来水和蒸馏水冲干净，再用烤箱烘干，然后根据不同品质进行如下的处理程序：1、针式滤器帽不能泡酸液,用 NaOH 泡 6-12 小时,或者煮沸 20 分钟,在包装之前要装好滤膜两张，安装滤膜时注意光面朝上(凹向上)，然后将螺旋稍微拧松一些，放入铝盒中在高压锅内 15 磅 30 分钟消毒，再烘干备用。注意在超净台内取出使用时应该立即将螺旋旋紧。2、胶塞烘干后用 2氢氧化钠溶液煮沸 30 分钟（用过的胶塞只要用沸水处理 30 分钟） ，自来水洗净，烘干。然后
7、再泡入盐酸液 30 分钟，再用自来水，蒸馏水，三蒸水洗净，烘干。最后装入铝盒内高压消毒，烘干备用。3、胶帽，离心管帽烘干后只能在 2氢氧化钠溶液中浸泡 6-12 小时（切记时间不能过长） ，自来水洗净，烘干。然后再泡入盐酸液 30 分钟，再用自来水，蒸馏水，三蒸水洗净，烘干。最后装入铝盒内高压消毒，烘干备用。4、胶头可用 75酒精浸泡 5 分钟，然后紫外照射后使用即可。5、塑料培养瓶，培养板，冻存管：6、其他消毒方法：有的物品既不能干燥消毒，又不能蒸气消毒，可用 70酒精浸泡消毒。塑料培养皿打开盖子，放在超净台台面上，直接暴露在紫外线下消毒。也可用氧化乙烯消毒塑料制品，消毒后需要用23 周时间
8、洗除残留的氧化乙烯。用 20000100000rad 的 r 射线消毒塑料制品效果最好。为了防止清洗器材已消毒与末消毒发生混淆，可在纸包装后，用密写墨水作好标记。其法即用沾水笔或毛笔沾以密写墨水，在包装纸上作一记号，平时_这种墨水不带痕迹，一经高温，即出现字迹，从而可以判定它们是否消毒。密写墨水的配制：氯化钻(CoC12 6H2o)2g，30盐酸 10m1，蒸馏水 88m1。细胞培养用液的配制与消毒器材与试剂：干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH 计、磁力搅拌器。具体步骤：一、水的制备：细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水
9、或纯净水二、PBS 的制备与消毒(也可用于其它 BSS，如：Hanks， D-Hanks 液的配制) ：1、溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至 1000ml，摇匀即成新配制的PBS 溶液。2、移入溶液瓶内待消毒：将 PBS 倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内 8磅消毒 20 分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。三、胰蛋白酶溶液的配制与消毒：胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同
10、的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在 pH 为 8.0、温度为 37时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+、Mg2+的 BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。1、称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为 0.25，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右）或 PBS（D-hanks）液中。搅拌混匀，置于
11、4内过夜。2、用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（0.22 微米微孔滤膜）抽滤除菌。然后分装成小瓶于-20保存以备使用。四、青、链霉素溶液的配制于消毒1、所用纯净水（双蒸水）需要 15 磅高压 20 分钟灭菌。2、具体操作均在超净台内完成。青霉素是 80 万单位/瓶，用注射器加 4ml 灭菌双蒸水。链霉素是 100 万单位/瓶，加 5ml 灭菌双蒸水，即每毫升各为 20 万单位。3、使用时溶入培养液中，使青链霉素的浓度最终为 100 单位/ml。1 单位1 微克？五、RPMI1640 的制备与消毒：1、溶解、调 PH 值、定容：先将培养基粉剂加入培养液体积 2/3 的双蒸
12、水中,并用双蒸水冲洗包装袋 2-3次(冲洗液一并加入培养基中), 充分搅拌至粉剂全部溶解,并按照包装说明添加一定的药品 .然后用注射器向培养基中加入配制好的青链霉素液各 0.5ml, 使青链霉素的浓度最终各为 100 单位/ml 。然后用一个当量的盐酸和 NaOH 调 PH 到 7.2 左右。最后定容至 1000ml，摇匀。2、安装蔡式滤器：安装时先装好支架，按规定放好滤膜，用螺丝将不锈钢滤器和支架连接好。然后卸下支架腿分别用布包好待消毒。3、抽滤：配制好的培养液通常用滤器过滤除菌。通常用蔡式滤器在超净工作台内过滤。4、分装：将过滤好的培养液分装入小瓶内置于 4冰箱内待用。5、使用前要向 10
13、0ml 培养液中加入 1ml 谷氨酰胺溶液（4时两周有效） 。六、血清的灭火：细胞培养常用的是小牛血清，新买来的血清要在 56水浴中灭火 30 分钟后，再经过抽滤方可加入培养基中使用。七、HEPES 溶液：HEPES 的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸（N-a-hydroxythylpiperazine-N - ethanesulfanic acid ） 。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的 pH 范围。使用终浓度为 10-50mmol/L，一般培养液内含 20mmol/LHEPES 即可达到缓冲能力。1mol/L HEPE 缓冲液配制方法如下：准确称取 HEPTS 23
14、8.3g，加入新鲜三蒸水定容至 1L。过滤除菌，分装后 4保存。注意：因为现在市售 HEPES 为约 10g 包装的小瓶，所以可根据实际情况灵活配制，但是要保证培养液内HEPES 的终浓度仍然为 20m mol/L 。如：称取 4.766 克 HEPES 溶于 20ml 三蒸水中，过滤除菌后可完全（20ml）加入 1L 培养液中，或者每 100ml 培养液中加入 2ml 即可。八、谷氨酰胺：合成培养基中都含有较大量的谷氨酰胺，其作用非常重要，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，谷氨酰胺缺乏要导致细胞生长不良甚至死亡。在配制各种培养液中都应该补加一定量的谷氨酰胺。由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，4下
15、放置 1 周可分解 50，故应单独配制，置于-20冰箱中保存，用前加入培养液。加有谷氨酰胺的培养液在 4冰箱中储存 2 周以上时，应重新加入原来的谷氨酰胺。一般培养液中谷氨酰胺的含量为 14mmol/L 。可以配制 200mmol/L 谷氨酰胺液贮存，用时加入培养液。配制方法为，谷氨酰胺 2.922g 溶于三蒸水加至 100ml 即配成 200mmol/L 的溶液，充分搅拌溶解后，过滤除菌，分装小瓶，-20保存，使用时可向 100ml 培养液中加入 1ml 谷氨酰胺溶液。九、肝素溶液的配制：含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高，肝素加入全培养液中最终浓度为 50ug/ml。因为现在市售的多为
16、肝素钠，包装为约为 0.56 克/瓶，配制时，可将其溶于 100ml 三蒸水中，定容，过夜，然后过滤除菌，分装小瓶，保存温度为。使用时，向 100ml 培养液中加入 1ml（精确可加入 0.9ml）即可。十、型胶原酶：0.1型胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制和消毒灭菌。注意：因为型胶原酶分子颗粒比胰酶大，不容易过滤，因此可以用蔡式滤器过滤除菌。分装入 10ml 小瓶 -20保存。十一、明胶溶液：因为明胶难于过滤，所以配制 0.1明胶溶液必须用无菌的 PBS 配制。所以制备过程中必须要注意无菌操作。首要的问题是如何无菌准确称量 0.1 克（配成 100ml 溶液）即解决无菌分装药品的问题。其次要注意
17、即使是 01.的溶液，明胶也难溶，因此要充分摇匀，过夜放置，然后无菌分装入 50ml 小瓶中， 4保存。其他培养用液的配制：20ug/ml 内皮生长因子，注意事项：1、配制溶液时必须用新鲜的蒸馏水。2、安装蔡式滤器时通常使用孔径 0.45 微米 和 0.22 微米滤膜各一张，放置位置为 0.45 的位于 0.22 微米的滤膜上方，并且要特别注意滤膜光面朝上。3、配制 RPMI1640 培养基时因为还要加入小牛血清，而小牛血清略偏酸性，为了保证培养液 PH 值最终为 7.2，可在配制时调 PH 至 7.4。细胞传代培养（消化法）具体操作：一、传代前准备：1、预热培养用液：把已经配制好的装有培养液
18、、PBS 液和胰蛋白酶的瓶子放入 37水浴锅内预热。2、用 75酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。3、正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。4、点燃酒精灯：注意火焰不能太小。5、准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8 分钟再次消毒。6、取出预热好的培养用液：取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。7、从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。8、打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。二、胰蛋白酶消化；1、加入消化液：小心吸出旧培养液，用 PBS 清洗（冲
19、洗） ，加入适量消化液（胰蛋白酶液） ，注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是 37。2、显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。3、吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。三、吹打分散细胞：1、吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。2、吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入 10ml 离心管中。3、平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以 1000 转/分钟离心 6-8 分钟。4、弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入 2ml 培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。四、分装稀释细胞：1
20、、分装：将细胞悬液吸出分装至 2-3 个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。2、显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于 5105/ml。最后要做好标记。五、继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入 CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2 小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25时为一个，占 50为，占 75时为。传代细胞培养注意事项：1、严格的无菌操作2、适度消化：消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响，消化过程中应该注意培养细胞形态的变化，一旦胞质回缩，连接变
21、松散，或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。附：EDTA（0.02乙二胺四乙酸二钠）消化液配方：EDTA 0.20g， NaCl 8.00g， KCl 0.20g， KH2PO4 0.02g， 葡萄糖 2.00g，0.5酚红 4ml，加入蒸馏水定容至 1000ml。10 磅 20min 高压灭菌，使用时调节 PH 值到 7.4。注意 EDTA 不能被血清中和，使用后培养瓶要彻底清洗，否则再培养时细胞容易脱壁。细胞的复苏细胞复苏的原则快速融化：必须将冻存在-196液氮中的细胞快速融化至 37，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。具体操作一、实验前准备
22、：1、将水浴锅预热至 372、用 75酒精擦拭紫外线照射 30min 的超净工作台台面。3、在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。二、取出冻存管：1、根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。2、从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。三、迅速解冻：1、迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。2、约 1-2min 后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。四、平衡离心：用架盘天平平衡后，放入离心机中 3000r/min 离心 3min五、制备细胞悬液：1、吸弃上清液。2、向离心管内
23、加入 10ml 培养液，吹打制成细胞悬液。六、细胞计数：细胞浓度以 5105/ml 为宜。七、培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入 37和 5CO2 的培养箱内 2-4 小时（或者 24-48 小时）后换液继续培养培养，换液的时间由细胞情况而定。初学者易犯错误：1、水浴锅未预热或者未预热到 37。2、水浴锅内冻存管太多，导致传热不佳，使融化时间延长。3、离心前忘记平衡，导致离心机损坏和细胞丢失。4、一次复苏细胞过多，忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染。细胞计数实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细
24、胞的细胞数目。具体操作：一、准备工作：取一瓶传代的细胞，按照传代细胞培养（消化法） 中的传代方法繁殖细胞，待长成单层后以被使用。二、细胞悬液制备：细胞悬液的制备方法是用 0.25的胰蛋白酶液消化、PBS 液洗涤后，加入培养液（或 Hanks 液或 PBS 等平衡盐溶液） ，吹打制成待测细胞悬液。三、细胞计数：1、盖好盖玻片：取一套血球计数板，将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。2、制备计数用的细胞悬液：用吸管吸 5 滴细胞悬液到一离心管中，加入 5 滴台盼蓝染液（0.4）或苯胺黑，活细胞不会被染色，加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。3、将细胞悬液滴入计数板：将待测细胞悬液吹均匀，然后吸
25、取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入，要保证盖片下充满悬液，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。4、统计四个大格的细胞数：将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察，并移动计数板，当看到镜中出现计数方格后，数出四角的四个大铬（每个大格含有 16 个中铬）中没有被染液染上色的细胞数目。5、计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度：（细胞悬液的细胞数）/ml （ 四个大格子细胞数/4) 2104说明：公式中除以 4 因为计数了 4 个大格的细胞数。公式中乘以 2 因为细胞悬液于染液是 1：1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）1.0mm（宽）0.1mm
26、（高）0.1mm3 而 1ml1000mm3四、细胞计数要点：1、进行细胞计数时，要求悬液中细胞数目不低于 104 个/ml，如果细胞数目很少要进行离心再悬浮于少量培养液中；2、要求细胞悬液中的细胞分散良好，否则影响计数准确性。3、取样计数前，应充分混匀细胞悬液，尤其时多次取样计数时更要注意每次取样都要混匀，以求计数准确；4、数细胞的原则是只数完整的细胞，若细胞聚集成团时，只按照一个细胞计算。如果细胞压在格线上时，则只计上线，不计下线，只计右线，不计左线。5、操作时，注意盖片下不能有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中，否则要重新计数。五、初学者易犯的错误：1、计数前未将待测悬液吹打均匀。2、滴入细
27、胞悬液时盖玻片下出现气泡。3、滴入悬液时的量太多，至使细胞悬液流入旁边的槽中。六、本实验特殊试剂的配制：4台盼蓝母液：称取 4 克台盼蓝，加入少量蒸馏水研磨，加双蒸水至 100 毫升，用滤纸过滤，4保存。使用液：使用时，用 PBS 稀释母液至 0.4即可。细胞的冻存1、先将冻存管放入 4冰箱，约 40min。2、接着置于-20冰箱，约 30-60min。3、置于-80 超低温冰箱中放置过夜。4、置于液氮罐中长期保存。5、同时做好冻存记录，在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。注意事项：1、使用 DMSO 前，不需要进行高压灭菌，它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破华它的分子结构，以至于降低冷
28、冻保护效果。在常温下，DMSO 对人体有害，故在配制时最好戴上手套操作。2、不宜将冻存细胞放置在 0-60这一温度范围内过久，低温损伤主要发生在这一温度区内，是“危险温区” 。3、注意定期检查液氮罐内液氮量，及时添加。MEM 粉末配制培养基仔细看看 MEM 粉末的外包装标签，上面会有加碳酸氢钠的要求。如果没有，大包装盒上一定有，1L*10的大包装盒上有加碳酸氢钠的要求，1L 加 2.2g 碳酸氢钠。否则请你的供应商帮你找。至于要不要加其他成分，请根据实验目的，请教身边的老师。一般每个科室细胞培养实验室都有操作规范。 一般培养基配制每升加入 2.0-2.2g 碳酸氢钠， 2.7-5.4gHepe
29、s。其他要补充的要看你所养细胞要求，例如添加 L-谷氨酰胺。因为 Glutamine 在液体中很易分解，且 glutamine 是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞会生长不良而死亡。建议你仍补加终浓度为 2mM 的 glutamine。配制培养基用 1000 的水配。细胞培养用液体培养基 有 D-MEM，RPMI-1640 等常用液体培养基以及 HBSS（-），D-PBS（-）等平衡盐溶液。可用于各种细胞的培养。 液体培养基D-MEM（High Glucose）with L-Glutamine and Phenol Red (Code No.044-29765)用途：受
30、Dulbecco 影响的 MEM 培养基。葡萄糖含量为 4,500（mg/L）的高葡萄糖型。可广泛用于哺乳类动物细胞。保存条件：210保存D-MEM（Low Glucose）with L-Glutamine and Phenol Red (Code No.041-29775)用途：受 Dulbecco 影响的 MEM 培养基。葡萄糖含量为 1,000（mg/L）的低葡萄糖型。可广泛用于哺乳类动物细胞。保存条件：210保存 MEM with L-Glutamine and Phenol Red (Code No.135-15175)用途：Eagle 基础培养基改良而成的培养基。可广泛用于哺乳类动
31、物细胞。保存条件：210保存 RPMI-1640 with L-Glutamine and Phenol Red (Code No.189-02025)用途：为了培养正常人类造血细胞而制作的培养基。可广泛用于浮游细胞。保存条件：210保存Ham s F-12 with L-Glutamine and Phenol Red (Code No.087-08335)用途：为了中国田鼠细胞的少量细胞培养而开发研制的培养基。可广泛用于粘附细胞。保存条件：210保存 D-MEM/Ham s F-12 with L-Glutamine and Phenol Red (Code No.048-29785)用途
32、：D-MEM 与 Ham s F-12 以 1：1 比例混合的培养基。可广泛用于哺乳类动物细胞。保存条件：210保存平衡盐溶液HBSS（-）with Phenol Red (Code No.084-08345)用途：用于细胞培养的 Hanks 处方平衡盐溶液。用于洗涤或稀释等，以维持细胞内外的浸透压平衡。不含 Ca2+、Mg2+。保存条件：210保存D-PBS（-）用途：用于细胞培养的 Dulbecco 处方平衡盐溶液。用于洗涤或稀释等，以维持细胞内外的浸透压平衡。不含 Ca2+、Mg2+。保存条件：25以下保存10D-PBS（-）(Code No.048-29805)用途：D-PBS（-）的
33、 10 倍浓缩液。保存条件：25以下保存 品名 规格 容量D-MEM（High Glucose）with L-Glutamine and Phenol Red 细胞培养用 500mlD-MEM（Low Glucose）with L-Glutamine and Phenol Red 细胞培养用 500mlMEM with L-Glutamine and Phenol Red 细胞培养用 500mlRPMI-1640 with L-Glutamine and Phenol Red 细胞培养用 500mlHam s F-12 with L-Glutamine and Phenol Red 细胞培养用 500mlD-MEM/Ham s F-12 with L-Glutamine and Phenol Red 细胞培养用 500mlHBSS（-）with Phenol Red 细胞培养用 500mlD-PBS（-） 细胞培养用 500ml10D-PBS（-） 细胞培养用 500ml
