1、 1/6标 题LC-2010A HT 型高效液相色谱仪标准操作规程文件编码 SOP/QAS054 -2012 版 次 第 1 版起 草 人 起草日期 执行日期 审 核 人 审核日期 颁发部门 质量保障管理中心批 准 人 批准日期 复制份数 共 1 份分发部门 质量保障管理中心目的：为检验人员提供 LC-2010A HT 型高效液相色谱仪标准的检验操作规程，保证工作质量。范围：适用于 LC-2010A HT 型高效液相色谱仪的使用。责任：质量保障管理中心检验员。内容：1.设备组成和工作条件该仪器为集中一体化设计，主要由在线脱气机、自动进样器、柱温箱、紫外检测器及四元低压泵组成。2.准备工作2.1
2、 将色谱甲醇及流动相用 0.45um 滤膜过滤并脱气。2.2 对所进样品用 0.45um 滤膜过滤。2.3 检查色谱柱安装是否正确良好。2.4 检查泵、检测器、数据处理机的各个连接头连接是否正确良好。3.开机3.1 启动稳压器电源3.2 电压稳定后，依次打开仪器电源及计算机。4.泵、自动进样器和色谱柱的清洗4.1 打开“LCsolution”操作系统，点击“操作 ”项下“分析”标志，将仪器与计算机控制器连接。4.2 连接完成后，分析程序进入控制界面，同时，仪器显示进入系统2/6控制面板。4.3 点击“F5”进入常规系统操作显示界面。在确认计算机控制器未启动仪器的情况下，打开泵头脱气阀，点击“p
3、urge”按钮，进入脱气清洗泵及自动进样器界面。依次点击“F1-F5 ”，对你所使用的泵及自动进样器进行脱气。脱气完成后，各个泵及进样器则会显示“fin” ，否则则是“exe”状态。泵脱气完成后，会自动进入常规操作显示界面，此时表示脱气完成，可以将泵阀关闭，进行用前平衡色谱柱或是用前清洗。4.4 使用色谱柱前，用低流速纯有机相进行 30min 左右的清洗，清洗时，在分析界面的“简单设置”版面“模式”下拉菜单中，选择合适模式，如“低压梯度”或是“等浓度洗脱” 。然后在“流速”一栏输入流速“0.3ml/min”，在“泵浓度”一栏输入“100” ，表示所用有机相比例为 100%，完成后点击“下载”方
4、可使仪器正常运行。然后用流动相比例的有机相-水进行再次清洗 30min（操作如上） ，然后可以更换流动相进行平衡色谱柱（更换流动相时，应注意流路中是否有气泡，若有，则需重复 3.3 的操作，待气泡完全排除后，方可继续） 。5.实验条件的设定5.1 用流动相平衡色谱柱时，可根据实际情况，将流速逐渐升至所需流速，通常所使用的流速为 1.0ml/min、1.2ml/min、0.8ml/min。5.2 检测器波长及检测时间选择。在“简单设置”操作版面中， “检测器 A”项下“波长通道 1”一栏输入你所需的检测波长“X ”， “结束时间”一栏输入你所需检测时间“X” ，点击“下载 ”即可。5.3 柱温的
5、选择。在“简单设置”操作版面中， “柱温”项下“温度”一栏输入你所需检测温度“X” ，点击下载即可。6.基线检查待仪器运行参数设定完成后，平衡约 30min 左右后，查看基线是否为直线且稳定，若是，则可进样，否则，继续平衡。7.试验方法确定3/67.1 将处理后的样品放入样品盘，记录相应的盘号及位置。7.2 点击“数据采集”项下“单次运行”按钮，在此介面输入相关信息，如“文件保存路径” ， “样品信息” ， “样品位置”等。输入完毕后，点击“确定” ，进行方法确认。7.3 待此次运行结束时，点击“LCsolution” 项下“再解析”按钮，打开在解析界面，找到前次运行记录的色谱图，进行数据处理
6、。点击数据分析界面下“向导”按钮，进行积分参数设定，设定完成后，点击“下一步”进行数据峰的选择，再点击“下一步” ，直至完成“向导” 。然后双击此文件，保存当前设置后，点击“文件”项下“方法另存为” ，进行方法保存。8.样品批处理8.1 点击“实时分析”界面下“批处理”按钮，进入批处理界面。8.2 点击“向导”按钮，进入向导界面，根据提示进行向导操作。完成后，点击“批处理开始”按钮，进行批处理。9.报告制作及图谱打印9.1 打开在解析版面，点击“报告”界面，进入报告编辑界面。点击“文件”项下“打开报告文件”选择已有模板进行报告编辑。9.2 报告编辑完成后，点击快捷栏中“打印”即可打印报告。10
7、.清洗及关机10.1 实验完成后，用相应的有机相-水组成清洗流动相，将色谱柱及仪器管路进行清洗。一般使用 10%甲醇水（或 10%乙腈水）冲洗 30min 后，换比例至 100%甲醇（或乙腈）继续清洗 30min 后，降低流速至 0ml/min后，退出“LC-solution ”“实时分析”系统，断开仪器连接。10.2 关闭电脑，关闭仪器开关，关闭插板电源。10.3 对使用情况进行登记。11.维护保养11.1 液相色谱使用的流动相，应使用分析纯或色谱纯，且用前需进行4/6过滤脱气处理。11.2 样品进样前，需进行过滤，否则会使柱头堵塞，柱压升高，污染流通池。11.3 每次分析完成后，将所使用的
8、泵通道充分清洗，有机相使用的泵通道应固定，避免管路中有机相与缓冲盐接触后堵塞泵通道。不使用的泵应置与清洗瓶中，使管路中充满清洗液，防止不使用的泵通道因外置而影响检测。11.4 仪器运行中，如出现压力持续性波动，使保留时间发生变化，则说明管路中存在气泡，需对溶剂或泵进行脱气处理，防止气泡过柱影响分析结果或对色谱柱造成损伤。11.5 长时间不使用仪器时，应将所有管路冲洗干净，管路中充满有机溶剂，色谱柱使用相应的有机溶剂进行保存，以免因长时间保存对柱子产生永久性损耗。11. 6 对使用情况进行登记。12. 保养12.1 仪器室应保持干燥和空气流通。12.2 严禁测试腐蚀性较强的样品。12.3 避免强
9、烈震动或撞击。12.4 不用时应将仪器罩住。13.注意事项13.1 打开冲洗泵头的 10%异丙醇溶液的开关( 需用针捅抽)控制流量大小 以能流出的最小流量为准13.2 注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积及时加液。13.3 使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒 3 遍以上，并排除针筒中的气泡。13.4 溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用 5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤。13.5 实验结束后，一般
10、先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路 305/6分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭 D 灯、W 灯。SOP/QAS002-2012新疆华世丹药业有限公司 4/5附件 仪器使用记录仪器维护保养记录培训要求培训部门：质量保障管理中心培训岗位：质量保障管理中心化验员变更历史文件编码 版本 变更描述 生效日期SOP/QAS054-2012 第 2 版增加：1.设备的组成和工作条件2.13.注意事项2012 年 11月 1 日SOP/QAS002-2012新疆华世丹药业有限公司 4/5仪器维护保养记录2012 年 维护事项 维护人 备注月 日SOP/QAS054-2012新疆华世丹药业有限公司 6/6仪器使用记录年 运行时间 药品名称 规格 批号 用途 仪器状态 操作人 备注月 日
