1、2014 年江苏省高等职业院校技能大赛植物组织培养赛项竞赛规程一、竞赛项目名称植物组织培养。二、竞赛目的农林生产的持续高产高效发展，需要大量的优良品种和优质种苗，而植物组织培养为快速繁育优良品种和培育无病毒苗木开辟了新途径。本赛项是园艺生产相关专业高职学生实战锻炼和能力展示的平台，也为扩大学校间交流、寻找差距，共同进步提供机会，为新农村建设和农业科技人才队伍培养提供支撑。三、竞赛方式与内容（一）竞赛方式竞赛以团队方式进行，每队由 4 人组成，其中领队 1 人，参赛学生 2 人，指导教师 1 人。（二）竞赛内容在规定时间内，2 名选手配合在规定时间内依次完成 MS 母液的配制、MS 培养基的配制
2、和马铃薯组 培苗继代培养的无菌操作。在规定时间内完成规定的 MS 母液配制、MS 固体培养基的配制及马铃薯组培苗继代培养。（1）MS 母液配制根据表 1 配方进行计算（扩大倍数和母液体积按照大赛要求填写），将结果填入表中，并配制相应溶液。表 1 母液配制配方母液配制母液 成分 规定量(mg/L) 扩大倍数 称取量 (mg) 母液体积(ml) 配制 1L 培养基吸取量（ml）钙盐 CaCl2.2H2O 440微量元素 KI 0.83激素 NAA 0.01mg/ml （2）MS 培养基的配制根据表 2 进行计算，并将结果填入表中。请利用提供的母液和材料，以 MS+ 0.01 mg/LNAA+ 3%
3、蔗糖 + 0.7%琼脂，pH 为5.8，配制培养基 500ml，并均匀分装到 12 个培养瓶，不进行灭菌。（表 2 中浓度由参赛者按照大赛提供的母液标签填写）。表 2 MS 培养基配制母液 浓度 配制体积（ml） 母液吸取量 （ml） 称取量 （g）大量元素 钙盐母液 铁盐 微量元素 有机物 萘乙酸 蔗糖 琼脂粉 写出灭菌操作步骤：（3）马铃薯组培苗继代培养的无菌操作在 30min 内，按无菌操作 规范要求完成试 管苗的继代培养，每瓶转接 15 株苗，茎段长 1-2cm，带 1-2 叶片，扦插到培养基中，均匀分布，无交叉污染等动作。竞赛时间为 120 分钟。其中，MS 母液配制时间为 40 分
4、钟、MS 培养基的配制时间为 40 分钟、 马铃薯组培苗继代培养的无菌操作时间为 40 分钟，每项比赛之间休息 10 分钟。四、竞赛规则1参赛选手出场顺序、位置、比赛所用材料、工具由抽签决定，不得擅自变更、调整。2参赛选手提前 15 分钟检录进入赛场，并按照指定位号参加比赛。 迟到 15 分钟者，取消比赛资格；比赛开始 15 分钟后，选手方可离开赛场。3植物组织培养项目选手应在比赛试卷或实物标签上填写比赛号。 试卷（或实物标签）上不得有任何暗示选手身份的标记，否则取消成绩。4选手在比赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意。选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在比赛时间内。
5、5比赛在规定时间结束时，参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延比赛时间。选手操作完成后，在实际操作现场记录表上签名确认，方可离开赛场。五、技术平台技能竞赛设备（每两人为一单元）（1）MS 母液配制：氯化钙（CaCl2.2H2O），碘化钾（KI）、萘乙酸(NAA)、 电子分析天平（品牌：上海越平；型号： FA1004；感量：0.0001g）1 台、 电炉 1 个、电子天平（品牌：奥豪斯；型号：SE602F ；感量：0.01g）1 台、 烧杯（200ml）3 个、容量瓶（250ml ）1 个、容量瓶（200ml）1 个、容量瓶（ 100ml）1 个、玻璃棒 3 个、胶头滴管 2 个、洗瓶 2
6、个、5L 广口瓶（装有蒸馏水）、 95%酒精 1 瓶、0.1mol/LHCl 1 瓶、抹布 1 块、称量纸 2 包、卷纸 1 包、标签纸 1 张、草稿纸 2张、水芯笔 1 支、计算器 1 个。（2）MS 培养基的配制：电磁炉 1 个、 MS 母液 6 瓶、琼脂粉 1瓶、蔗糖 1 瓶、搪瓷杯（1000ml）1 个、培养瓶 12 个、烧杯（200ml ）1 个、 2L 广口瓶（装有蒸 馏水）、洗瓶 1 个、量筒（50ml ）1 个、移液管（10ml）1 个、移液管（ 5ml）5 个、0.1mol/LHCl 1 瓶、0.1mol/L NaOH 1 瓶、pH 试纸 （5.07.0）1 包、抹布 1 块
7、、称量纸 1 包、卷纸 1 包、 标签纸 1 张、草稿纸 2 张、水芯笔 1 支、计算器 1 个。（3）马铃薯组培苗继代繁殖的无菌操作：试管苗 15 瓶、培养基 50 瓶、双人单面工作台 1 台（品牌：上海咏星；型号：SW-CJ-2A）、剪刀 6 把、镊子 6 把、酒精灯 2 个、无菌纸 2 包、酒精棉 1瓶、一次性口罩 3 个、记号笔 1 个。六、评分方式竞赛评分严格按照公平、公正、公开的原则。由该项目裁判员统一评分，称量、定容、pH 测定终止举手示意裁判确认，否则该项操作不计分。本次竞赛采用百分制计分。考核要点与分值如下：植物组织培养评分细则序号 考核内容 考核要点 分值计算 准确计算各种
8、试剂所用量. 10试剂称量 称样采用减重法，称量方法正确，操作规范、熟练。 101 MS 母液配制（35 分）溶液配制 玻璃棒搅拌正确，试剂完全溶解， 10熟练定容准确，贴好标签。分工协作 分工合理，相互协作，完成速度快。 5计算 准确计算各种试剂所用量。 9配制 琼脂粉完全溶解，定容准确，pH 值测定、调节正确，熟练操作。 11分装 均匀分装，熟练操作，培养瓶表明洁净，贴好标签、标签内容准确。 52MS 培养基配制（30 分）分工协作 分工合理，相互协作，桌面整洁，完成速度快。 5无菌操作无菌操作准备完全，熟练进行无菌操作，灭菌方式正确，接种速度较快，操作结束清理完全，标签书写准确。16分工
9、协作分工合理，相互协作，完成速度快。满 30 瓶，得 8 分，少一瓶扣 0.5 分，扣完为止，多一瓶加 0.5 分，最高加 8 分。163 无菌操作 （35 分）文明操作与安全操作文明、安全，工作台场地清洁干净，用具摆放整齐。 3在竞赛过程中，参赛选手如有不服从裁判判决、扰乱赛场秩序、舞弊等不文明行为，由裁判长按照规定扣减相应分数，情节严重的取消竞赛资格，竞赛成绩记 0 分。七、申诉与仲裁（一）申诉1.参赛队对不符合竞赛规定的设备、工具、软件，有失公正的评判、 奖励，以及对工作人员的违规行为等，均可提出申诉。2.申诉应在竞赛结束后 1 小时内提出，超过时效不予受理。申诉时， 应按照规定的程序由参赛队领队向赛项仲裁工作组递交书面申诉报告。报告应对申诉事件的现象、发生的时间、涉及到的人员、申诉依据与理由等进行充分、实事求是的叙述。事实依据不充分、仅凭主观臆断的申诉将不予受理。申诉报告须有申诉的参赛选手、领队签名。3.赛项仲裁工作组收到申诉报告后，应根据申诉事由进行审查，6 小时内书面通知申诉方，告知申诉处理结果。4.申诉人不得采取过激行为刁难、攻击工作人员，否则视为放弃申诉。（二）仲裁赛项设仲裁工作组接受由代表队领队提出的对裁判结果等方面问题的申诉。赛项仲裁工作组在接到申诉后的 2 小时内组织复议，并及时反馈复议结果。仲裁工作组的仲裁结果为最终结果。
