1、- 1 -MSOP-A-1 标本处理MSOP-A-2 尿标本的处理MSOP-A-3 上呼吸道标本的处理MSOP-A-3.I 细菌性咽颊炎的实验室诊断MSOP-A-3.II 白喉的实验室诊断MSOP-A-3.III 百日咳的实验室诊断MSOP-A-3.IV 鼻窦炎的实验室诊断MSOP-A-3.V 奋森(氏) 咽峡炎的实验室诊断MSOP-A-4 下呼吸道标本的处理MSOP-A-5 军团菌的实验室诊断MSOP-A-6 类鼻疽-Pseudomonas pseudomallei 的实验室诊断MSOP-A-7 胃肠道标本的处理MSOP-A-8 挤压出乳奶的实验室诊断MSOP-A-9 无菌体液的培养（血液、
2、脑脊液、尿液除外）MSOP-A-10 骨骼和组织的培养MSOP-A-11 其他拭子的培养MSOP-A-12 特殊标本的处理芽孢管-湿热灭菌的生物指示剂甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）的筛选静脉内导管头的培养（Maki 技术）灭菌物品的培养-血液透析器来源的透析液的定量培养血液制品的培养？水标本的细菌计数细菌培养标本处理流程表- 2 -年度总结和修改记录- 3 -MSOP-A-1 标本处理I. 原理微生物实验室的主要功能是检验和培养微生物标本，对重要的致病菌准确鉴定并按照要求进行抗生素药敏试验。标本处理是标本分析的重要环节。要最小限度对标本进行处理：保证标本的连续性和完整性，并减少标本中苛
3、养菌的死亡机会和正常菌群的过度生长；正确的化验申请；可接受的标本；适当的容器和运输培养基才能满足我们的要求（见样本采集指南） 。II. 程序 样本的接收 检查申请单上病人信息是否与标本相符合。 检查申请单上病人信息a. 病人姓名是否完整、清晰。b. 申请单号码和住院号。c. 标本来源描述是否完整、清晰、特异。d. 申请医师的姓名是否完整、清晰。e. 标本采集日期。f. 诊断/临床病史g. 用过的抗生素。h. 接收日期 检查容器和运输培养基是否合适。 检查标本是否泄漏。 仔细总结和分析标本是否符合申请单的要求 给标本标注一个实验室号码用于实验室内部使用III. 标本拒收标准 泄漏 对于非侵袭性的
4、标本（尿，痰，或喉）拒收标本并在申请单上标注-“标本容器泄漏” （附 1）并要求重新送检。在本室拒收标本登记表上登记。 对于侵袭性程序采取的标本（CSF，体液或组织）处理前联系临床医生说明情况并征求意见，并在化验单上标注。 标签丢失或与化验单不符 对于非侵袭性的标本（尿，痰，或喉）拒收标本并在申请单上注明原因；在本室拒收标本登记表上登记。 对于侵袭性程序采取的标本（CSF，体液或组织）征求临床取标本医生的意见。 拒收所有迟送的尿标本，并注明原因。 拒收 Foley 导管头做培养，要求其送检尿标本。 用非无菌容器送检标本作细菌培养。 对于非侵袭性的标本（尿）拒收标本并注明原因- 4 - 对于侵袭
5、性程序采取的标本（CSF，体液或组织等）征求临床取标本医生的意见 拒收唾液标本做痰培养（特别指出的除外） ，并要求重新送检。 标本与申请单不符 用尿做淋球菌培养。 可能被正常菌群污染的标本（例如：尿，喉拭子等）不能做厌氧培养。 有大量上皮细胞的痰标本怀疑为口咽部菌群污染。该标本不适合作进一步培养应要求重新送检。 拒收其他实验室开展的实验项目（附一） 。 （例如：粪潜血试验）-“细菌室不做该实验，请与其他实验室联系” 拒收干燥的吸头（如：静脉导管，心脏导管）并注明-“干燥吸头不适于培养，因为它们在通过皮肤和粘膜层时可能不经意的污染。进一步咨询，请联系细菌室。 ” 拒收气管内管道做培养，注明-“不
6、合适的标本。该检测未做。如有临床指征，请送气管抽吸液或痰标本送检。 拒收鼻咽抽吸物做培养并注明-“该该检测未做，因为常规鼻咽抽吸物做培养不能提供有临床价值的信息。 ” “拒收”单和/或标本应放置在一起，并注明拒收原因。IV. 标本保存 处理前 室温保存温度敏感的细菌（如：化脓链球菌，脑膜炎奈瑟菌，百日咳杆菌等）所有咽拭子（直肠拭子除外） ，手术组织和体液 4 度保存含正常菌群可能过渡生长的标本。粪，痰，尿标本和尸检组织 处理后 大部分标本在丢弃前要放置一周，特殊标本如 CSF 保存更长。 室温保存含温度敏感的细菌的标本和难以重复检出的细菌（如百日咳杆菌） ，经鼻或口咽部的拭子 4 度保存以上类
7、型之外的标本 用于血清学检测的标本，上午 8：00-11：00，其余时间放置 4 度保存。V. 参考文献- 5 -附录 1 拒收单 A 请咨询细菌室 标本容器泄漏 空容器 收到的运输拭子未使用 标本送检太迟 请注明病人姓名、性别、年龄、和住院号 要求特别注明实验目的 特殊类型的标本 临床信息不全 非无菌容器，不适合用于培养 未收到标本 未收到申请单 标本不合适，不能提供相关临床信息 细菌室未开展本实验，请联系其他实验室 病人资料与瓶上和申请单上标本类型不符 不合适的标本。实验未做，如果临床需要请送气管抽吸物或痰标本送检。 实验未做。因为常规鼻咽部抽吸液细菌培养不能提供有用的信息。 干燥吸头不适
8、于培养，因为它们在通过皮肤和粘膜层时可能不经意的污染。进一步咨询，请联系细菌室。- 6 -MSOP-A-2 尿标本的处理I. 原理尿常规为脓尿的标本可做出辅助诊断。尿标本必须做定量培养。标本在培养前应放置冰箱以避免细菌复制。正确处理并接种的尿标本105,用显著的临床意义。不过，急性膀胱炎菌落计数结果可能低一些。II. 标本3. 类型A. 无菌中段尿（MSU）B. 导管尿（CSU）C. 无菌尿：耻骨弓上尿，输尿管尿D. Foleys 导管尿，耻骨弓上的导管尿，malcclot 引流管和尿道管头不适合作尿培养，可以做 CSU 培养E. 拒收尿标本作 G.C 培养，要求送检尿道拭子。F. 拒收尿标本
9、的做厌氧培养，穿刺尿除外。4. 标本运输A. 采集标本后应尽快送检尿标本到实验室，因为容器内无保护剂。B. 标本采集后放置如果24 h，将被拒收。在申请单上注明“标本放置时间过长，请重新取标本送检” 。III. 材料3. 培养基A. 胱氨酸乳糖电解质缺乏的琼脂（CLED）B. 血琼脂C. 麦康克琼脂4. 试剂和材料A. 10ul 标准接种环（）IV. 质量控制3. 培养基使用之前，QC 由培养基组负责。4. 10ul 接种环的 QC 证明由厂家负责提供。5. 操作- 7 -V. 培养程序3. 不同的尿标本按照类型不同选择不同的培养基（表 1）VI. 定量接种尿标本3. 把 0.01ml 定量接
10、种环垂直插入重复混匀的尿标本中，让尿附着在环上。4. 把环上尿标本，涂布琼脂板上。5. 再次将接种环垂直插入尿标本中，接种另一块平板。6. 怀疑为伤寒热培养/肠热 /伤寒沙门菌携带者做尿培养，按如下方法：A. 15-20ml 尿标本 3000rpm 离心 15 分钟。B. 接种沉淀到 SF 肉汤。C. 35 度过夜培养后转种麦康克或 DCA 平板。7. 用于诊断细菌性前列腺炎的培养，按照图 1 用 Stamey 方法进行操作。VII. 参考文献：标本 CLED 血平板 中国兰 备注MSU，尿袋，注射器穿刺尿，管道尿+ 定量接种环导管尿，CSU + 定量接种环耻骨弓上尿 + + 定量接种环输尿管
11、尿 + + 定量接种环肾造瘘术尿 + + 定量接种环malcclot 引流管尿+ + 定量接种环硅橡胶管 + + 定量接种环PCN（经皮引流） + + 定量接种环- 8 -表 1 尿标本培养基和方法的选择- 9 -图 1 “Stamey 方法”VB：膀胱排出的尿 EPS: 挤出的前列腺分泌物VB1VB2VB3EPS0.01ml10ul 接种环0.1ML9.9ml H2O(1:100 稀释)0.01 ml10ul 接种环血琼脂，CLED，中国兰，&G.C100血琼脂，CLED，中国兰，&G.C10000+- 10 -MSOP-A-3 上呼吸道标本的处理大部分步骤需要在生物安全柜内接种I. 细菌性
12、咽炎的实验室诊断A. 原理大多数上呼吸道感染是由病毒引起的。细菌性咽炎经常是由化脓性链球菌引起。但重度的会厌炎和喉气管炎则是例外，其一般是由于 b 型流感嗜血杆菌引起。B. 标本从扁桃体和后咽部采集标本的咽拭子C. 选择性培养基（如表 1）1. 5%羊血琼脂2. 含抗生素的 Thayer Martin 琼脂（GC+）和无抗生素的 (仅用于淋病奈瑟菌病例)3. 巧克力琼脂（仅用于会厌炎和喉气管炎病例）D. 质量控制培养基使用之前，QC 由培养基组负责。E. 培养程序1. 在 1/6 琼脂表面用力滚动拭子，并划线分离。2. 在一区用接种针穿刺血平板几次。 （图 1）3. 把平板放置在 5%CO2 培养。
