唾液淀粉酶活性的测定.docx

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资源描述

1、影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性2 影响唾液淀粉酶的活性的因素(1)实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察温度、pH 、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。(2)实验原理人唾液中淀粉酶为 -淀粉酶,在唾液腺细胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精

2、的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。变化过程如下:淀粉紫色糊精红色糊精麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。淀粉与糊精无还原性,或还原性很弱,对班氏试剂呈阴性反应。麦芽糖与葡萄糖是还原性糖,与班氏试剂共热后生成红棕色氧化亚铜的沉淀。唾液淀粉酶的最适温度为 37-40C,最适 pH 为 6.8.偏离此最适环境时,酶的活性减弱。低浓度的 Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。 Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。(3)器材及试剂1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、

3、唾液淀粉酶2、试剂:1淀粉溶液、碘液、班氏试剂、0.4HCl 溶液、0.1的乳酸溶液、1NaCl 溶液、1CuSO4 溶液、0.1淀粉溶液(4)操作步骤1、淀粉酶活性的检测:取一只试管,注入 1淀粉溶液 5mL 与稀释的唾液 0.5-2mL。混匀后插入 1 支玻璃棒,将试管连同玻璃棒置于 37C 水浴中。不是的用玻璃棒从试管中取出 1 滴溶液,滴加在白磁板上,随即滴加 1 滴碘液,观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化。向上面的剩余溶液中加 2mL 班氏试剂,放入沸水中加热 10 分钟左右,观察现象2、pH 对酶活性的影响:

4、取 4 支试管,分别加入 0.4盐酸、0.1乳酸、蒸馏水与 1碳酸钠各 2mL,再向以上四支试管中各加 2mL1淀粉溶液及2mL 淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。3、温度对酶活性的影响:取 3 支试管,各加 3mL1淀粉溶液;另取 3 支试管,各加 1mL 淀粉酶液。将此 6 支试管分为 3 组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各 1 支,三组试管分别置于 0C、37C 与 70C 的水浴中。5 分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件 5min 后,立即加 2 滴碘液,观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对 酶活性的影响。4、

5、激活剂与抑制剂对酶活性的影响:取 3 支试管,按下表加入各种试剂。混匀后,置于 37C 水浴中的保温。从 1 号试管中用玻璃棒取出 1 滴溶液,置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待 1 号试管内的溶液遇碘不再变色后,立即取出所有的试管,各加碘液 2 滴,观察溶液颜色的变化,并解释之。管号 1 2 31NaCl(mL)1 1CuSO4(mL) 1 蒸馏水(mL) 1淀粉酶液(mL)1 1 10.1淀粉溶液(mL)3 3 3(5) 、实验结果与讨论1.加入班氏试剂后2.PH 值对酶活性影响:1 号深红色,2 号为红棕色,3 号为砖红色,4 号为偏蓝。因为 PH1 时,超出了淀粉酶有效 PH 范

6、围,使得酶完全失活,淀粉没有被分解。2 号是因为 PH=5 时,不是淀粉酶的最适范围。3 号是因为 PH7时,为淀粉酶分解的最适 PH,淀粉被酶迅速分解生成麦芽糖和葡萄糖。而 4 号则是因为 PH9 超出了淀粉酶的适宜 PH,活性受到或者是部分失活,使淀粉分解较慢。3.温度对酶的影响:1 号显紫红色,2 号为淡黄色,3 号为深蓝色。当温度为 0 度时,蛋白质分子的热运动减慢,即酶分子的活性受到了抑制,使酶的活性降低了,淀粉分解减慢,生成紫红色的糊精;2 号处于 37 度,接近人体温度,酶的活化性能较高,淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快,所以是淡黄色,而当温度为 70 度时,由于酶是蛋白质,遇到

7、高温时会失活,所以淀粉没有被分解。4.激活剂和抑制剂对酶的影响:3 号作为对照实验组,显红棕色,1 号显浅黄色,2 号显深蓝色。因为在 1 号溶液中,NaCl 对酶的活性在增加作用,激活了淀粉酶,淀粉酶迅速把淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖,滴加碘液时,溶液显浅黄色,而对照组显示红棕色,表明淀粉被分解成了糊精,在 1 号中,溶液中的淀粉没有被分解遇碘变蓝,通过对比 1 和 3 号,2 和 3 号,由颜色的变化,判断淀粉水解程度为 132,说明了 NaCl 具有激活作用,CuSO4 具有抑制作用。结论:酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA 或其复合体。是生物催化剂,能通过降低化学反应的活化能加快反应速率,

8、但不改变反应的平衡点。绝大多数酶的化学本质是蛋白质。具有催化效率高、专一性强、作用条件温和等特点。PH 可以影响酶蛋白的结构、酶的活性部位的解离状态、辅酶的解离以及底物分子的解离,从而影响酶与底物的结合以及对底物的催化效力。温度升高是通过对酶结构破坏,从而抵消了酶促反应速率随温度升高而升高的趋势。我们可以看出 PH 和温度都通过影响了酶的结构来影响酶促反应速率。抑制剂和激活剂也均是通过影响酶的结构来影响酶的活性。参考文献:1周锦兰,张开诚.实验化学M. 武汉:华中科技大学出版社,2006:310-311.3许冰,原媛 ,赵文献.pH 值对酶活性影响的实验观察J. 临床合理用药杂志,2010,3

9、(10):35-35.4冯攸科.唾液淀粉酶活性的最适温度质疑J.中等医学教育 1996(03). 5杨玉萍.几种环境条件对唾液淀粉酶活性的影响期刊论文-新乡学院学报(自然科学版).6陈电容.生物化学与生化药品M郑州:郑州大学出版社,2004:28 .7尚渤程(云南省昆明市第一中学 6s0031) 黎一苇(云南大学生物化学与分子生物学中心 650091) 生物学教学2009 年(第 34 卷)第 12 期.8石渊渊生物化学实验指导M.开封:河南大学出版社.9张杰技术. 第 1 版北京:北京大学医学出版社2006.12:276、235、345、李淑艳.医学化学实验.10陈铁茹,王亚杰(讷河市中医院,黑龙江讷河 161300 )黑龙江医学 .11吴丽明.福建医药学校.福州 350002 海峡药学 2003,15(2).

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