1、- 1 -擦拭取样方法验证一、引言1.概述制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求，检验残留物的限度有两种方法：一是最终淋洗水取样；二是擦拭取样。擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况。但取样方法需验证其可行性。因此须通过取样方法验证确定清洁方法的有效性，能消除药品交叉污染及微生物污染。2验证目的本验证是验证擦拭取样方法，通过对清洗消毒后取样方法的回收率试验，评价取样方法的有效性、代表性和科学性，并为证明清洗方法有效性提供基本依据。 3范围本次验证适合棉签擦拭法取样。4.验证周期及验证进度安排验
2、证小组提出完整的验证计划，经批准后实施，整个验证活动分四个阶段完成。人员确认： 年 月 日 至 2010 年 月 日；确认公用文件：2010 年 3 月 9 日 至 2010 年 3 月 10 日；试验时间：2010 年 3 月 11 日至 2010 年 3 月 17 日5.验证项目小组成员及职责5.1.验证小组成员：部 门 人员生产部QA 部门QC 部门52 职责52 1 验证委员会1. 批准年度验证计划。2. 负责验证方案的审批。3. 领导协调验证工作，以保证本验证方案规定的项目能顺利实施。- 2 -4. 负责验证数据及结果的审核。5. 负责验证报告的审批。6. 负责发放验证证书。7. 负
3、责再验证周期的确认。8. 为验证提供必要的资源（人、财、物）52 2 验证办公室：1.负责验证管理的日常工作、起草验证管理制度及验证工作程序。2.编制验证总计划。3.依据验证委员会决议组织验证小组。4.组织起草验证方案，组织实施和协调验证。5.管理验证文件，并归档保存。6.负责相关人员验证工作的培训。7.配合、辅助验证委员会的工作。52 3 验证小组职责1.起草验证方案。2.编制验证进度计划。3.实施验证活动。4.负责取样及对样品的检验。5.负责设备操作。6.负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析后，起草验证报告，报验证委员会。52 4 设备科1.负责组织试验所需仪器、设备的验证和确
4、认。2.负责仪器、仪表、量具等的校正。3.负责设备的维护保养。二、验证项目、评价方法及标准1、人员检查生产操作及检验的所有人员的档案，评价其培训及健康检查情况是否符合 GMP 及操作的要求。（1）人员确认A.评价方法：查阅人员档案，确认是否对有关操作者进行了相关培训，包括：- 3 -（一）人员确认记录表人员 培训内容 检查结果 检查人 确认人生产操作人员检验人员1.GMP 及药品管理法培训2.安全防护规程3.微生物基础知识及微生物污染的防范培训4.所在岗位相关设备的操作、清洗、维修保养规程 5.进出洁净区更衣程序培训6.岗位 SOP 培训 7.岗位实际操作技能B.标准：上岗操作人员已经接受了相
5、关的知识及操作技术培训，并经考核合格，有上岗证。培训及考核均在有效期内。生产操作和检验的所有人员均进行了规定项目的健康检查，各项指标正常，身体健康健康，检查结果在有效期内。2、仪器、设备、试药本验证棉签擦拭法所用主要仪器、设备见下表。所列设备均符合检验的要求。所用主要仪器、设备序号 名称 型号 使用点1 钢板 500500cm 中心化验室2 头孢拉定对照品 130427-2010HTA 中心化验室3 高效液相色谱仪 LC-2010HTA 中心化验室4 移液管 1ml 中心化验室5 棉签 药签 中心化验室- 4 -3、相关文件、规程，依据与棉签擦拭法有关的主要文件文件编号 文件名称 存放位置头孢
6、拉定胶囊质量标准 技术科、中心化验室高效液相色谱操作规程 技术科、中心化验室验证依据 药品生产质量管理规范与验证指南 质量部4、棉签擦拭取样：A.评价方法：一块 500 mm500 mm 平整光洁的不锈钢板；用钢锥划出 400 mm400 mm 的区域，每隔 100 mm 划线，形成 16 块 100 mm100 mm 的方块；配制 0016 的对照品溶液，定量装入移液管；将 10 mL 溶液尽量均匀地滴在 400 mm400 mm 的区域内，自然干燥；用无菌 0.9%氯化钠注射液润湿擦拭工具，按取样方法擦拭钢板，每擦一个方块(100cm 2 )换一根擦拭棒，共擦 6 块方块；擦拭棒分别放入具
7、塞试管中，精密加入流动相 10mL，盖上瓶塞，轻摇，放置 10 min，使头孢拉定溶出；按高效液相色谱检测法，计算回收率和RSD 影响因素：进行擦拭取样验证试验时应注意擦拭工具和不锈钢板的干扰。常用的擦拭工具为棉签，棉签易吸附残留物，其上面的隐形留物也易被溶剂洗脱，但棉签易脱落纤维，故在使用前应用溶剂预先清洗，以免纤维遗留在取样表面；不锈钢板应平整光洁，清洗干净后用电吹风吹干净再滴溶液，以免取样不均匀和引进杂质，而产生较大的RSD 。还应注意取样方式，应尽可能采用固定的力度、擦拭速度和线路，以免产生较大的RSD。B.标准：回收率不得低于 50 ，RSD 不得大于 20C. 取样方法：将药签头按
8、在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。在向前移动的同时将其从一边移到另一边。擦拭过程应覆盖整个表面。翻转药签，让药签的另一面也进行擦拭。但与前次擦拭- 5 -移动方向垂直。(如图 1)。擦拭完后，将药签放入试管，并用螺旋盖盖紧密封。六份备检（收集各样液的试管应预先编好序号） 。5、 检测方法51 色谱条件用 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 填 充 剂 ， 以 水 -甲 醇 -3.86%醋 酸 钠溶 液 -4%醋 酸 溶 液 （ 1564:400:30:6） 为 流 动 相 ， 流 速 为 每 分 钟0.9ml， 检 测 波 长 为 254nm。 对 照 品 进 样
9、 连 续 5次 ， RSD不 能 超 过2%。 理 论 板 数 按 头 孢 拉 定 峰 计 算 应 不 低 于 2500。52 回收率试验精密称取头孢拉定对照品0.01609g 至100 mL量瓶，加水约12ml，置超声波浴中使溶解，再加流动相稀释至刻度，摇匀，将10 mL溶液尽量均匀地滴在 400 mm400 mm的区域内，自然干燥；用注射用水润湿擦拭工具，按取样方法擦拭钢板，每擦一个方块(100cm2 )换一根擦拭棒，共擦6块方块；将擦拭棒分别放人具塞试管中，精密加入流动相10 mL，盖上瓶塞，轻摇，放置10 min，作为供试品溶液；再称取头孢拉定10mg至100 mL量瓶，加水约12ml
10、，置超声波浴中使溶解，再加流动相稀释至刻度，摇匀，吸取5ml 到50ml容量瓶，用流动相稀释至刻度，作为对照溶液。分别吸取对照溶液和6个试管中的供试品溶液各10l，进样，测定。测得平均回收率和RSD。棉签擦拭取样法检测结果板号 试管编号 峰面积 对照品峰面积 回收率123456平均回收率回收率 RSD- 6 -6.质量保证（1）文件完整A.目的：评价生产过程中 QA 检查方法及检查结果。B.评价方法： 审核生产过程中 QA 检查结果是否正确并记录成正确文件。C.标准： 全部 QA 文件均完整、正确。（2）正确的检验方法A.目的：评价检验结果的正确性。B.评价方法：审核所有检验过程是否按规定的检
11、验规程规定的检验方法进行。C.标准 所有检验方法均与检验规程一致。（3）检验结果正确A.目的：评价检验结果正确性。B.评价方法审核生产过程中检查结果是否在规定的标准范围内（若有任何不符合规定的结果均应查明原因，并由质量部经理签署意见） 。C.标准： 所有检验结果均符合标准要求。内 容 标 准 检查方法 检查结果 检查人 确认人QA 文件记录完整正确 检验方法 方法、标准一致检验结果 符合质量标准三、拟订日常监测程序及验证周期验证小组根据验证情况，起草验证报告，拟订日常监测程序再验证周期，报验证办公室审核。- 7 -四、验证结果评定与结论验证办公室负责收集各项验证、试验结果记录，根据验证、试验结果起草验证报告，报验证委员会。验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书，确认再验证周期。
