1、一 检验前应作哪些准备病人准备和标本采集是检验质量保证的重要环节之一。许多检验项目的质量都受各种客观因素的影响,由于病人受到各种内在和外在的干扰,可使检验结果产生或大或小的误差,因此,病人在接受检验前必须避免相关因素的干扰,为此检验前病人须作适当准备,可减少随机分析误差。自 70 年代以来,病人准备的研究日益受到重视,在此对主要的几种影响因素作一简述,以利于提高检验质量。病人准备除特殊检验有专门规定之外,一般要求病人处于安静状态,生活饮食处于日常状态。目前已公认运动、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等均可影响某些检验的结果,现分述如下:1运动:肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类,短暂
2、性影响为血浆脂肪酸含量,可因运动而暂时性减少。而后渐渐增加而恢复,丙氨酸可因运动暂时增加达 180%,而乳酸则可增至 300%。受到持续性影响的主要是一些与肌肉有关的酶,如肌酸激酶、醛缩酶、乳酸脱氢酶等,据称一场 60min 的手球训练赛后 11 小时,肌酸激酶活性比赛前仍增加达 125%,长期坚持体育锻炼还会提高性激素的水平,因此采血前宜安静,不作过大的活动。2过度空腹:一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食,至次日早晨采血,空腹约 12-14h,但过度空腹,若达 24h 以上,某些检验会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹 48h而增加 240%;血糖可因空腹过长而减少为低血糖 ;血脂空腹过度,
3、甘油三酯、甘油、游离脂肪酸反有增加,而胆固醇无明显改变。故空腹并非越长越好,近年国外有人主张胆固醇单项检验,不必空腹抽血。3食物:进餐以后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。有人研究于高脂餐后 2-4h 采血,多数人碱性磷酸酶含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O 型或B 型兼为 Le 分泌型者增高更为明显。高蛋白饮食可显著增高血液尿素的浓度和增加尿中排出量;男性比女性的浓度平均高 0.7-1.1mmol/L;一般认为高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量;高比例不饱和脂肪酸食物,可减低脂固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液 5-羟色胺增加数倍;含咖啡因饮料,可使血浆脂肪酸
4、增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。以上这种情况说明在作某些检验时,应对食物也要有一定的控制。4饮酒;饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白脂固醇偏高,平均红细胞体积增加,谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。5吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达 8%,而不吸烟者含量在 1%以下。此外儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为多;血液学方面亦有变化,白细胞数增加,嗜酸性粒细胞减少,中性粒细胞及单核细胞增多,血红蛋白偏高,平均红细胞体积偏高。6药物;药物对检验的影响非常复杂,15000 多种药物
5、对检验有干扰作用。众所周知,抗结核药、抗白血病抑制剂、磺胺类药物,对肝脏功能有大小不一的影响,甚至几片常用药可以引起严重的药物反应;阿司匹林、抗生素等药物可使血小板减少;如降脂药、避孕药、噻嗪类利尿药、B 受体阻滞剂、某些降压药、降糖药、胰岛素及其它激素制剂等均使脂类结果受到影响。异烟肼、他巴唑等可导致 ALT 异常,因心肌、骨骼肌等组织 ALT 含量也较高,这些组织受损时,ALT 也可能升高,所以对 ALT 升高应综合考虑,决不能一发现 ALT 升高就诊断为肝炎。故在采样检查之前,暂停各种药物是为上策,如某种药物不可停用,则了解可能对检验结果产生的影响,且申请单上最好能注明近期用药情况。7体
6、位;体位影响血液体液循环,由于血浆和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如卧位改为站位,血浆白蛋白可因此浓度增大,总蛋白、酶、钙、胆红素及甘油三酯等亦因站位而浓度增加;血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。由于体位的因素,在制订参考值时,要考虑门诊和住院病人的不同,并且不要让住院病人自己到检验科来采血做血常规,或复查红、白细胞计数,以免体位引起的误差。8其它:病人准备还应考虑病人的生物钟规律,因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久,也是一种误差因素,如以结扎 1 分钟的样品结果为基数,则结扎 3 分钟,可使血浆总蛋白增加 5%,胆固
7、醇增加 5%,铁增加 6%,胆红素增加 8%。细菌培养的样品要采用无菌技术,防止污染。以上为病人准备的基本影响因素,如措施不当,注意不足,常可引起误差而难以发现更正,在质量保证中不可不予重视。二 临床检验项目标本采集指南一临床基础检验1、全血细胞分析11 静脉采血:用配套的真空管采血针取肘部静脉血 2ml 放入容器盖为紫色的(内有 EDTA-K2 抗凝剂)真空抗凝管中,立即将试管轻轻颠倒混匀 5-8 次,使其充分抗凝。 (该采血管一支可同时用于全血细胞分析、血型正定型、Rh 血型鉴定、网织红细胞计数和疟原虫涂片的检测)12 皮肤采血:一次性采血三棱采血后加入有 EDTA 抗凝剂的离心管。2、P
8、T 、APTT抽取静脉血 1.8ml,加入到容器盖为淡蓝色的(含 0.2ml0.109mmol/L 的枸橼酸纳抗凝剂)真空试管中,并轻轻颠倒 5-8 次抗凝,总量不得超过 2.00.2ml。3、尿液常规干化学分析及有形成分分析病人根据检验单要求留取尿样,容器只限一次性使用、清洁,不含有干扰试验的物质。所用容器至少可容纳 5ml 尿液。31 首次晨尿标本收集早晨起床后的第一次尿液标本,此尿液最适合于尿液常规检查和 HCG 定性定量试验,特别是细胞、管型等有形成分的显微镜检查。32 随机尿标本随机留取任何一个时间的尿液标本,不受条件的限制。是尿液分析等检查最常用的方法,单受饮水、饮食和收集时间等因
9、素影响,病理成分容易漏诊。33 3 小时尿标本即收集上午 3 小时的尿液标本。早晨 8 点排空膀胱的尿液,然后卧床 3 小时,至 11 点收集所有尿液标本。此标本适用于病人每小时或每分钟细胞排泄率。34 24 小时尿标本病人于早晨 8 点排空膀胱的尿液,再收集以后 24 小时内所有尿液标本。此标本用于体内代谢产物的定量检测,如尿蛋白、微量白蛋白排泄率、糖、肌酐定量等检查。4、粪便常规分析与隐血病人尽量选择有黏液脓血或肉眼见有异常的粪便部位,挑取约 5g(约拇指大小)于采集器中。不得混有小便、消毒剂、自来水等物质。采样从粪便表面及深处多个部位挑取,并首选有粘液,脓血等病理成分。采集标本后以及时送
10、检为原则。若检查阿米巴滋养体,则需立即送检,寒冷季节需要保温送检。5、红细胞沉降率(ESR)抽取 1.6ml 静脉血,加入到容器盖为黑色的(含 0.4ml0.109mmol/L 的枸橼酸钠抗凝剂)真空管中,并轻轻颠倒 5-8 次抗凝。6、本周氏蛋白检验留取新鲜晨尿中段尿不少于 10ml 于干净的一次性尿杯中,应使用标签注明收集标本的时间。7、绒毛膜促性腺激素(HCG)定性检测+定量检测留取随机尿送检。定量检测亦可随机抽取血液送检8、精液常规检验用清洁干燥小瓶收集精液,不宜采用避孕套内的精液。9、妇科分泌物综合分析由妇产科医师采集。取两试管分泌物,一管用棉签取白带分泌物,放进装有生理盐水的试管中
11、(生理盐水不能滴得太多) 。一管用棉签取宫颈分泌物,放进不加生理盐水的试管中。二、临床化学检验临床化学检验中多采用血液为标本,次为尿液,少数是其他体液(如唾液、脑脊液、肠腹水、羊水等)标本的化学成分含量可因为某些因素的影响而发生改变,也可因标本采集初处理不当而发生变化,从而影响测定结果的准确性。因此,在取标本时要考虑到并设法消除这些因素的影响。许多成分在红细胞中浓度比血清中高几倍或几十倍,溶血可影响该成分的分析,如 K+ 、LDH 、AST、ALT 等,最好及时分离血清,而钠在溶血时会降低,故血液采集时应防止溶血。1 防止溶血的基本措施:1) 使用一次性注射器及试管2) 静脉采血时止血带压脉时
12、间不易过久,以免引起管内溶血3) 抽血后应先将针头取下,缓缓将血液沿管壁注入试管4) 抽血时产生的大量气泡不要放入试管内,否则易引起溶血5) 采血用的针头不易过细,以免造成血钾增高6) 分离血清及血浆时离心速度不宜过高,离心时间不易过久7) 及时分离血清,血中许多成分采血或可大大降低,如 Glu 可因红细胞酵解而明显降低,有些酶放置后失活8) 血标本不能及时检测时,应分离血清或血浆放在 4冰箱低温保存2 一般化学检验早晨采集空腹静脉血3 血糖、糖耐量、血脂、蛋白质、尿酸、无机离子、酶类测定,采血后注入盛有适当抗凝剂的试管中,并立即混匀。4 纤维蛋白原等、PT、APTT、ESR、血粘度、糖化血红
13、蛋白等需血浆者,采血后注入盛有适当抗凝剂试管中,并立即混匀。5 尿液检验需收集中段尿,尿液生化检测如 24 小时尿蛋白等需加入甲苯或二甲苯防腐。三、临床免疫学检验一般免疫学检验如 HAV、HBV、HCV、TP、血吸虫检验、TORCH 等标本均可采集静脉血注入无抗凝剂试管后分离血清。四、微量元素检验吸取外周血各 40ul 分别放入五元素、二元素稀释液中,摇匀送检。五、细胞学检查(一) 液基细胞学检测1) 病人准备:避开月经期。病人在检查前三天停止性生活,检查前停止外用药,并清洗外阴部2) 标本采集:应用专用采样器。医生用窥阴器扩开阴道后先观察,如果宫颈表面粘液、血液较多者,应先用棉签轻轻擦净粘液
14、血液,再用采样器抵住宫颈表面转动5-10 次。然后取出采样器迅速放入保存液瓶内均匀摇动数次,再拧紧瓶盖,详细填写送检化验单后送检。3) 注意事项:用取样器采集标本时,取样器前面的长毛刷应插进宫颈管以便采集到颈管上皮及移行上皮细胞,采样时动作应轻柔,用力适中,太大容易损伤宫颈,太小不能采集到足够由于诊断的上皮细胞。(二) 宫颈刮片由妇产科医生采集。(三) 穿刺细胞学检测乳腺、淋巴结、皮肤及皮下表浅肿块由检验科穿刺,其他由医师采集六、微生物学检查1. 下呼吸道分泌物(痰液)培养患者起床后用清水漱口,立即从下呼吸道咳出第一口痰,吐入已消毒或一次性带盖盒中送检。2. 尿液(中段尿)培养清洗尿道口后留取
15、或用导尿管导出约 3 毫升中段尿,装入无菌试管中送检。3. 粪便培养取有粘液、脓血部分粪便置于盒中送检。4. 眼、耳、鼻、咽拭子培养将棉拭子沾取少许无菌生理盐水,挤去多余的水分,然后采取可疑部位的分泌物,置于无菌试管内送检。5. 脓液培养用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液,要尽量多取一些,置于无菌试管内送检。6. 血液培养采血 5-10 毫升注入血液培养瓶中送检。7. 穿刺液培养抽取穿刺液后用无菌橡皮塞等封好针孔或将穿刺液注入无菌试管内送检。七、高危型人乳头肿瘤病毒(HPV)检测1病人准备:三天内不能做阴道冲洗或应用阴道药物;24 小时内不能有性生活;非月经期采样检查2样本采集1) 放置扩阴器,用
16、专用取样刷置于子宫颈口与粘膜交界处逆时针旋转 5-7 次,停留十秒钟2) 将取样刷放于专用试管中,在切口处折断多余部分3) 拧紧盖子后送检。3标本类型和标本量:宫颈刷取物,尽量避免保存液在取样过程中漏出,否则影响检测。4. 标本保存:4可保存 3 周;-20可保存半年。八、性病培养标本的采集与处理1分泌物支原体培养+药敏支原体对干热抵抗力差,标本采集后应尽快接种于培养基中男性:用专用的无菌拭子沾取无菌盐水少许,深入尿道口 2-2.5cm 处取分泌物,将拭子以无菌刷洗在培养基中。前列腺液亦同。女性:用沾取少许无菌生理盐水的棉拭子取宫颈管内口 1-2cm 单层柱状上皮细胞,取样拭子不可碰到阴道壁,
17、将拭子以无菌刷洗在培养基中。2分泌物衣原体检测男性患者将无菌拭子插入尿道 2-4cm,旋转 3-分钟后取出,放入无菌试管中送检女性患者在取样前先用棉签或棉球将宫颈口外的粘液抹去,再将取样拭子插入宫颈管内至棉花部分全部插入,旋转 15-20 次后取出,不要碰到宫颈外及阴道壁,放入无菌试管中送检。3淋球菌培养+药敏男性尿道炎急性期患者可用沾有少许生理盐水的无菌拭子取脓性分泌物。非急性期病人,可用无菌细小棉拭子沾取少许无菌生理盐水插入尿道 2-4cm 深处,转动拭子然后送检。女性患者先用无菌拭子擦去宫颈分泌物,再用另一个沾有生理盐水的棉拭子插入宫颈口内 1cm 处旋转,取出分泌物。采集标本后马上把拭
18、子插入淋球菌培养基中。4念珠菌培养+药敏病人准备:病人在采集标本做该项目时至少停用药物一周以上。标本类型:生殖器分泌物标本采集:疑为阴道念珠菌感染需要做培养及做药敏试验的患者用沾有生理盐水的棉拭子沾取大量豆腐渣样白带或可疑白带倒置于无菌试管中送检。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间血液分析仪血细胞分析临检抗凝全血2ml BC-2000 血液分析仪 随机白细胞计数(WBC)成人 4.0-10.0G/L小儿 5.0-13.0G/L增高:各类细菌急性感染,组织损伤,白血病等;降低:病毒感染,造血受抑,药物或放射影响。红细胞计数(RBC)男:4.0-5.5T/L女:3.8-
19、5.0T/L增高:脱水,高热等引起相对红细胞增高或真性红细胞增多症,或缺氧等代偿性增多。降低:各类贫血。血红蛋白测定(Hb)男:120-160g/L女:110-150g/L增高或降低:与红细胞相同,但还要注意参考 MCV 值及RBC 形态。红细胞比积测定(HCT)男:0.4-0.5T/L女:0.37-0.48T/L增高:红细胞增多症等绝对红细胞增多或脱水等相对红细胞增多。降低:各类贫血。红细胞平均体积(MCV) 80-97fl增高:为大细胞性贫血减小:为小细胞性贫血红细胞平均血红蛋白含量(MCH)27-31.2pg增高:大细胞性贫血。降低:单纯小细胞性贫血及小细胞低色素性贫血。检验项目检测类型
20、样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间平均红细胞血红蛋白浓度(MCMC)318-345g/L增高:严重呕吐,频繁腹泻,慢性一氧化碳中毒,心脏代偿功能不全。降低:小细胞低色素性贫血随机血小板计数(PLT)100-300G/L增高:急性化脓性感染,脾摘除术后以及真性红细胞增多症。降低:各类贫血。淋巴细胞比值(LYMPH%) 0.20-0.40增高:淋巴细胞性白血病,病毒感染等传染性疾病。中性粒细胞比值(NEUT%)37-80增高:各种急性细菌感染,组织损伤等。降低:病毒感染,造血功能受抑制淋巴细胞计数(LYMPH)1.0-3.0与体液免疫和细胞免疫有关,WBC 总数低,而淋巴绝对值正常,说
21、明有一定免疫力,总数正常而淋巴绝对值低说明免疫力低。中性粒细胞计数(NEUT)3.0-8.0 增高与降低同分类。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间红细胞分布宽度(RDW-CV )99% 阴性1%根据红细胞膜上凝集原和血清内抗 A,B 凝集素的不同而进行的分型。受检红细胞与抗 D 血清发生凝集者为阳性,反之为阴性,测定 Rh 血型对于溶血性输血反应和新生儿 Rh 溶血症极有价值随机检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间血浆凝血酶原时间测定(PT )临检抗凝血2ml 11-15s测定值较正常对照值延长超过10s 以上才有临床意义。延长:凝血酶原(
22、因子、)和纤维蛋白原缺乏,纤维蛋白溶解(纤溶)活力增强,如继发性,原发性纤溶以及血循环中有纤维蛋白(原)降解产物(FDP)缩短:高凝状态,如 DIC 的高凝血期,促凝物质进入血流及凝血因子孤活动性增高;血栓性心绞痛,脑血管病变,糖尿病伴血管病变,肺梗死,深静脉血栓形成,妊娠高血压综合症和肾病综合症等。随机活化部分凝血活酶时间测定(APTT)临检抗凝血2ml 30-45s延长:血友病,DIC,凝血因子、及纤维蛋白原减少,血中含有抗凝物质进入血流及凝血因子的活性增高等;血栓性疾病,如心肌梗死,不稳定性心绞痛,脑血管病变,糖尿病伴血管病变,肺梗死,深静脉血栓形成,妊娠高血压综合症和肾病综合症等。随机