1、生化练习一一.是非题（正确的填“是” ，错误的填“非” ）1. （ ）自然界的多肽类物质均由 L 构型的氨基酸组成，完全没有例外2. （ ）某一生物样品，与茚三酮反应呈阴性，用羧肽酶 A 和 B 作用后测不出游离氨基酸，用胰凝乳蛋白酶作用后也不失活，因此可以肯定它属非肽类物质3. （ ）含有四个二硫键的胰核糖核酸酶，若用巯基乙醇和尿素使其还原和变性，由于化学键遭到破坏和高级结构松散，已经无法恢复其原有功能4. （ ）球状蛋白分子含有极性基团的氨基酸残基在其内部，所以能溶于水5. （ ）血红蛋白与肌红蛋白结构相似，均含有一条肽链的铁扑啉结合蛋白，所以功能上都有与氧结合的能力，血红蛋白与氧的亲和力
2、较肌红蛋白更强6. （ ）血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体，前者是一个典型的别构蛋白因而与氧结合过程中呈现正协同效应，而后者却不是7. （ ）分子病都是遗传病8. （ ）蛋白质中所有的氨基酸（除甘氨酸外）都是左旋的9. （ ）一个蛋白质样品，在某一条件下电泳检查，显示一条带。因此说明该样品是纯的10. （ ）蛋白质的亚基和肽链是同意的 11. （ ）疏水作用是使蛋白质立体结构稳定的一种非常重要的次级键12. （ ）胶原螺旋与 螺旋是互为镜面对称的蛋白质的两种构象13. （ ）与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能14. （ ）脯氨酸与茚三酮反应生
3、成紫色产物15. （ ）用羧肽酶 A 水解一个肽，发现从量上看释放最快的是 Leu，其次是 Gly，据此可断定此肽的 C 端序列是Gly-Leu16. （ ）蛋白质四级结构是第四度空间的蛋白质结构，即蛋白质结构因时间而变化的关系17. （ ）蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变18. （ ）二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键就没有三级结构19. （ ）溴化氰能作用于多肽链中的甲硫氨酸键20. （ ）所有蛋白质的摩尔消光系数都是一样的21. （ ）凝胶过滤法可用于测定蛋白质的分子量，分子量小的蛋白质先流出拄，分子量大的后流出拄22. （ ）胰岛素是由 A、B 两条
4、链通过正确匹配的二硫键连接而成的蛋白质，体内从其一条肽链的前体通过酶的加工剪裁而成23. （ ）镰刀型红细胞贫血症是一种先天性的遗传性的分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个谷氨酸残基被纈氨酸残基所置换24. （ ）在蛋白质和多肽分子中，连接氨基酸残基的共价键除肽键外，还有二硫键25. （ ）镰刀型细胞贫血症是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍26. （ ）两条单独肽链经链间二硫键交联组成蛋白质分子，这两条肽链是该蛋白质的亚基27. （ ）蛋白质在小于等电点的 pH 溶液中向阳极移动，而在大于等电点的 pH 溶液中，将向阴极移动28. （ ）一般讲，从 DNA 分子的三
5、联体密码中可以推定氨基酸的顺序，相反从氨基酸的顺序也可毫无疑问地推定 DNA 顺序29. （ ）所有的氨基酸中，因 碳原子是一个不对称碳原子，因此都具有旋光性30. （ ）蛋白质的氨基酸序列是由基因的编码区核甘酸序列决定的只要将基因的编码序列转入细胞，就能合成相应的蛋白质31. （ ）形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽键-CO-NH-中的四个原子以及和它相邻的两个 碳原子处于同一平面32. （ ）肌红蛋白和血红蛋白亚基在一级结构上有明显的同原性，它们的构象和功能十分相似，所以它们的氧结合曲线也是相似的33. （ ） 螺旋是蛋白质二级结构中的一种，而 折叠则是蛋白质的三级结构34. （
6、）蛋白质的变性作用的实质就是蛋白质分子中所有的键均被破坏引起天然构象的解体35. （ ）电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法二填空题1.胰凝乳蛋白酶专一性地切断（ ）和（ ）的羧基端肽键2.蛋白质分子中的 螺旋结构靠氢键维持，每转一圈上升（ ）个氨基酸残基3.一般说来，球状蛋白（ ）性氨基酸残基在其分子内核， （ ）性氨基酸残基在分子外表4.丝-酪- 丝-甲硫-谷-组-苯丙- 精-色- 甘用胰蛋白酶彻底水解后可得（ ）个肽段5.两条相当伸展的肽或同一条肽链的两个伸展的片段之间形成氢键的结构单元称为（ ）6.最早提出变性理论的科学家是（ ）7.血红蛋
7、白（Hb）与氧结合的过程呈现（ ）效应，是通过 Hb 的（ ）现象实现的。它的辅基是（ ）8.精氨酸的 pK1（COOH）值为 2.17，pK 2（NH 3+）值为 9.04，pK 3（胍基）值为 12.98。其pI（等电点时的 pH 值）为（ ） 。天冬氨酸的 pK1（COOH）值为 1.88，pK 2（COOH）值为 3.65，pK 3（NH 3+）值为 9.60，其 pI 值为（ ）9.苯丙氨酸是人体的必需氨基酸，这是因为（ ）10.镰刀状贫血血红蛋白分子 HbS 链与人血红蛋白分子 HbA 链间有（ ）个残基的差别11.一条肽链 Asn-His-Lys-Asp-Phe-Glu-Ile-
8、Arg-Glu-Tyr-Gly-Arg 经胰蛋白酶水解，可得到（ ）个肽12.肽经溴化氰（CNBr）处理后，在（ ）残基右侧的肽键被裂解，裂解后该残基变成（ ）13.胰蛋白酶的专一性就是在（ ）残基右侧的肽键上水解14. 在某特定 pH 下，蛋白质带等量的正电荷和负电荷，该 pH 值是该蛋白质的（ ）15.（ ）不是真的氨基酸，它经常改变肽链折叠的方式16.谷胱甘肽的化学式为 HOOC-CH-（CH 2） 2-CONH-CH-CONH-CH2-COOH，依肽的命名法，NH2 CH2SH它的全名应写作（ ）17.蛋白质中主要两种二级结构的构象单元是（ ）和（ ）18.用分光光度计在 280nm
9、测定蛋白质有强烈吸收，主要是由于（ ） （ ）和（ ）等氨基酸侧链基团起作用19.谷胱甘肽由三种氨基酸通过肽键连接而成，这三种氨基酸分别是（ ） 、 （ ） 、 （ ）20.胰岛素是由 A、B 两条肽链通过正确匹配的（ ）连接而成的蛋白质，在体内从一条肽链的前体经过（ ）的加工剪裁而成21.现欲分离某蛋白质溶液中的四个蛋白质成分，它们的分子量和等电点列于表内，如不考虑次要因素，它们在葡聚糖凝胶 G-75 柱上分离时，流出的先后次序将是：（ ）最先， （ ） （ ）其次，最后流出的蛋白质是（ ）蛋白成分 Mr pIA 12000 10B 62000 4C 28000 7D 9000 522.维持
10、蛋白质构象的次级键主要有（ ） 、 （ ）和（ ）23.测定一个小肽的氨基酸序列常用试剂是（ ）24.（ ） 、 （ ）和苯丙氨酸在紫外光区有吸收25.肽链的 N 末端可以用（ ）法、 （ ）法、 （ ）法和（ ）法测定，而（ ）法和（ ）法则是测定 C 末端氨基酸最常用的方法26.分离蛋白质混合物的各种方法主要根据蛋白质在溶液中的下列性质（ ） ，（ ） ， （ ） ， （ ）27.蛋白质是两性电解质，当溶液的 pH 在其等电点以上时蛋白质分子带（ ）电荷，而pH 在等电点以下时，带（ ）电荷28.确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用（ ） ，然后用（ ）技术分离水解后的混合肽段三.选择题1
11、.胰蛋白酶的作用点是（ ）a.精氨酰-X b.苯丙氨酰-X c.天冬氨酰-X d.X-精氨酸 （X 代表氨基酸残基）2.破坏螺旋结构的氨基酸残基之一是（ ）a.亮氨酸 b.丙氨酸 c.脯氨酸 d.谷氨酸 3.溴化氰作用于（ ）a.甲硫氨酰-X b.精氨酰-X c.X-色氨酸 d.X-组氨酸4.为了充分还原核糖核酸酶，除了应用巯基乙醇，还需（ ）a.过甲酸 b.尿素 c.调节 pH 到碱性 d.加热到 505.茚三酮与脯氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现（ ）色斑点a.蓝紫 b.红 c.黄 d.绿6.组蛋白都是富含（ ）残基a.组氨酸 b.赖氨酸 c.谷氨酸 d.丝氨酸7.生理状态下，血红蛋白与氧可
12、逆结合的铁处于（ ）a.还原性的二价状态 b.氧化性的三价状态 c.与氧结合时是三价，去氧后是二价8.用葡聚糖凝胶作为凝胶过滤载体，进行蛋白质和多肽混合物（含盐）的柱层析，在盐的洗脱峰后面出现两个峰，这说明（ ）a.实验有差错峰是假象 b.这是正常现象，多数的蛋白质和肽都在盐洗脱后才洗脱 c.这是因为葡聚糖凝胶吸附了蛋白质和肽，使之在盐峰之后洗脱9.典型的 螺旋中每圈含氨基酸残基数为（ ）a.3.6 b.2.6 c.4.610.用 Sepharose4B 柱层析来分离蛋白质这是一种（ ）a 离子交换柱层析 b.吸附柱层析 c.分子筛（凝胶过滤）柱层析 d.配柱层析11.如果要测定一个小肽的氨基
13、酸顺序，下列试剂中选择一个你认为最合适的（ ）a.茚三酮 b.CNBr c.胰蛋白酶 d.异硫氰酸苯酯12.在 pH 7 的水溶液中，在典型的球状蛋白质分子中，处于分子的内部的氨基酸残基经常是（ ）a.Glu b.Phe c.Thr d.Asn13.用凝胶过滤柱层析分离蛋白质时，一般讲都是（ ）a.分子体积最大的蛋白质首先洗脱 b.分子体积最小的蛋白质首先洗脱 c.没有吸附的蛋白质首先洗脱14.血红蛋白和肌红蛋白都含有血红素辅基，前者输氧，后者贮氧。之所以有这种差别，那是因为（ ）a.二者的蛋白质结构有相当大的不同 b.血红蛋白分子中还含有二磷酸甘油化合物 c.血红蛋白分子包含了四个亚基而肌红
14、蛋白只有一个亚基15.蛋白质的别构效应（ ）a.总是和蛋白质的四级结构紧密联系的 b.和蛋白质的四级结构关系不大 c.有时与蛋白质的四级结构有关，有时无关16.催产素含有 Cys, Tyr，Ile ，Gln，Gly，Leu，Pro 和 Asn 等八种氨基酸残基，并包括了 8个肽键，故称之为（ ）a.多聚肽 b.九肽 c.八肽17.定性鉴定 20 种氨基酸的双向纸层析是（ ）a.交换层析 b.亲和层析 c.分配层析 d.薄层层析18.研究蛋白质结构常用氧化法打开二硫键，所用的化学试剂是（ ）a.亚硝酸 b.过氯酸 c.硫酸 d.过甲酸19.氨基酸和单糖都有 D 和 L 不同构型，组成大多数多肽和
15、蛋白质的氨基酸以及多糖的大多数单糖构型分别是（ ）a.D 型和 D 型 b.L 型和 D 型 c.D 型和 L 型 d.L 型和 L 型20.有个天然肽的氨基酸顺序为：Pro-Ala-Phe-Arg-Ser ，你要证实 N 端第二位 Ala 的存在，最好的试剂选择是（ ）a.FDNB b.PITC c.无水肼 d.羧肽酶21.双缩脲反应主要用来测定（ ）a.DNA b.RNA c.胍基 d.肽22.胰蛋白酶专一水解多肽链中（ ）a.碱性残基 N 端 b.酸性残基 N 端 c.碱性残基 C 端 d.酸性残基 C 端23.羧肽酶 C 专门水解 C 端倒数第二位是哪个氨基酸残基形成的肽链（ ）a.精
16、氨酸 b.赖氨酸 c.脯氨酸24.牛胰岛素由 A、B 两条链组成，其中 B 链是（ ）a.30 肽 b.31 肽 c.20 肽 d.21 肽25.某蛋白质 pI 为 7.5，在 pH6.0 的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为（ ）a.原点不动 b.向正极泳动 c.向负极泳动26.通常使用（ ）测定多肽链的氨基末端a.CNBr b.丹磺酰氯 c.6mol/lHCl d.胰蛋白酶27.形成稳定的肽链空间结构，一个重要原因是肽键中的四个原子以及和它相邻的两个 碳原子处于（ ）a.不断绕动状态 b.可以相对自由旋转 c.同一平面 d.随外界不同环境而变化的状态28.在寡聚蛋白质中，亚基间的立体排
17、布、相互作用以及接触部位间的空间结构称为（ ）a.三级结构 b.缔合现象 c.四级结构 d.变构现象29.镰刀状细胞贫血病是最早被认识的一种分子病，它是由于血红蛋白的二条亚基中的两个谷氨酸分别为下述的氨基酸所替代（ ）a.丙氨酸 b 纈.氨酸 c.丝氨酸 d.苏氨酸30.要断裂由甲硫氨酸残基的羧基参加形成的肽键，可用（ ）a.胰蛋白酶 b.尿素 c.溴化氰31.测定蛋白质一级结构时，定位二硫键，需将含二硫键的肽段分离，可使用的方法是（ ）a.过甲酸氧化 b.对角线电泳 c.巯基化合物还原四.问答题1. 蛋白质的氨基酸排列顺序和核酸的核苷酸排列顺序、生物功能有怎样的关系？蛋白质的氨基酸顺序和它们
18、的立体结构有什么关系？2. 概述血红蛋白的结构。这种结构和它的功能有什么样的关系？血红蛋白和氧的结合受哪些因素的影响？3. 有这么一个广告，说某厂生产的一种补品含有 17 种氨基酸，其中有几种是必需氨基酸等等。你读了这一广告，有何感想？4. 有人纯化了一个未知肽，其氨基酸组成为：Asp1，Ser1 ，Gly1，Ala1，Met1，Phe1 和Lys2，又做了一系列分析，结果如下：a.FDNB 与之反应再水解后得 DNP-Ala b.胰凝乳蛋白酶（ CT）消化后，从产物中分出一个纯四肽，其组成为：Asp1，Gly1，Lys1， Met1，此四肽的 FDNB 反应降解产物为 DNP-Gly c.胰
19、蛋白酶（ T）消化八肽后又可得到组成分别为 Lys1，Ala1，Ser1及 Phe1，Lys1，Gly1 的两个三肽及一个二肽。此二肽被 CNBr 处理后游离出自由天冬氨酸。5. 蛋白质化学研究中常用的试剂有下列一些：CNBr，尿素，巯基乙醇，胰蛋白酶，过甲酸，丹磺酰氯，6mol/lHCl，茚三酮，异硫氰酸苯酯和胰凝乳蛋白酶等。为完成下列各项实验，请回答每一项的最适试剂是什么？a.一个小肽的氨基酸顺序的测定 b.多肽链的氨基末端的确定 c.芳香族氨基酸残基的羧基一侧肽键的水解 d.甲硫氨酸的羧基一侧肽键的裂解 e.通过氧化途径将二硫键打开 f.一个没有二硫键的蛋白质的可逆变性6. 蛋白质变性过
20、程中，有哪些现象出现？并指出三种能引起蛋白质变性的试剂。7. 任举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺序？8. 用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还必需加入什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的-SH 基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？9. 某天然九肽，其组成为：Gly2，Phe2，Tyr1，Met1，Asp1，Arg1 和 Pro1，经胰凝乳蛋白酶（CT）水解后可分得一个五肽和一个四肽，四肽的组成为：Phe1，Tyr1，Gly1 和Pro1。此九肽的 CNBr 处理产物再经阳离子交换树脂层析并洗脱得一个组成为Arg1， Phe1 和 Gly1 的三肽，此九肽如经胰蛋白酶（ T）水解可得 Phe，如用 FDNB 反应后再水解得 DNP-Tyr。请写出这九肽的全顺序解析过程。
