1、第 1 页，共 9 页1 检验目的: 1.1 参考值： 4.0-10.0X10 9/L1.2 临床意义：1.2.1 生理变化：因年龄，日夜变化，运动，疼痛与情绪作用，妊娠分娩等因素有所变化。1.2.2 病理变化：1.2.2.1 增高：大部分化脓细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多、传染性淋巴细胞增多，急性出血、组织损伤、大手术、白血病等。1.2.2.2 减低：病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再障、极度严重感染，防射线，肿瘤化疗后，非白血性白血病等。2 检验程序的原理：2.1 XE-2100 采用一束半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分，即前向散射光
2、，侧向射散光和侧向光和侧向荧光。前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物，如核和颗粒，侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。2.2 DIFF 通道：表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板，部分溶解白细胞。第 2 种试剂使核酸染上颜色。XE-2100 的 DIFF 通道可将白细胞分成 4 类。在 STROMATOLYSER-4DL 试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板，并在白细胞膜上打出小孔。在STROMATOLYSER-4DL 试剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞，与核酸和细胞器结合，经波长 633nm 的激光照射，所产生荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。在在
3、STROMATOLYSER-4DL 试剂中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合，根据侧向散射光信号强度，能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。2.3 WBC/BASO 通道：在 XE-2100 中，此通道运用前向和侧向散射光信号。酸性试剂可引起除嗜碱性粒细胞外的红细胞(影红细胞)、血小板(影血小板)和白细胞(裸核)溶解和皱缩。因而此通道可检测白细胞数和嗜碱性粒细胞数。在 STROMATOLYSER-FB 试剂中的表面活性剂作用细胞可形成影红细胞，影血小板和除嗜碱性粒细胞外的裸核白细胞。根据前向散射光信号，使嗜碱性粒细胞和其他细胞容积差异而区分。前向散射光强度代表细胞体积，侧向散射光代表细胞殘余
4、物复杂性。嗜碱性粒细胞形成独立群体。核殘余物也可从影细胞中区分出来。嗜碱性粒细胞和裸核数之和代表白细胞总数。有核红细胞也包括在内。2.4 NRBC 通道：在 NRBC 通道中，表面活性剂可使红细胞和血小板皱缩，使白细胞和有核红细胞核酸染色。XE-2100 应用半导体激光束照射标本，根据侧向荧光和侧向散射光信号来计数有核红细胞。在在 STROMATOLYSER-NR 试剂中表面活性剂可溶解红细胞膜，仅留下有核红细胞核，白细胞膜不被溶解，胞质完整。在 STROMATOLYSER-4DL 试剂中的第 2 页，共 9 页聚次甲基荧光染料，可渗入白细胞胞膜，使细胞器染上颜色。根据荧光强度的差异可将细胞分
5、成 2 组，根据前向散射光信号、容积差异可将有核红细胞和影细胞区分出来。3 性能参数：3.1 精密度（重现性）全血模式：3.0%或更低(4.0 10 3 / 微升或更高)末梢血模式：5.0%或更低(4.0 103 / 微升或更高)3.2 准确度：在3%范围内，或在0.20 10 3 / 微升范围内（在10%之内）3.3 线性全血模式：在3.0%或0.3 10 3 / 微升范围内（0 100.0 10 3 / 微升）末梢血模式：在5.0%或0.5 10 3 / 微升范围内（0 100.0 10 3 / 微升）4 原始样品系统4.1 受检者的准备：病人避免采血前剧烈活动。4.2 用含 EDTA-K
6、2抗凝剂的真空采血管，肘静脉采血 1ml，轻轻混匀，室温 4 小时内完成检测，不能在 4 小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（28）中保存，8 小时内有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。4.3 注意事项：4.3.1 防止溶血：混匀时不可用力震荡，避免产生大量气泡。4.3.2 避免淤血：止血带压迫时间不宜过长，最好不超过半分钟。4.3.3 标本不能从输液管中或输液手的同侧静脉采集。4.3.4 穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。4.3.5 抗凝管应贴有标签，并清楚注明病人姓名。5 容器和添加物类型：含 EDTA
7、-K2抗凝剂的真空采血管,有条形码的贴上条形码。乳胶手套、试管架6 要求的设备和试剂6.1 设备：Sysmex XE-2100 全自动血细胞分析仪6.2 试剂厂商：Sysmex 公司 6.2.1 试剂及包装：配套试剂包 CELLCLEAN 清洁液 (CL-50)第 3 页，共 9 页6.3 试剂稳定性：6.3.1 原包装试剂储存在 15-30，至标签所示失效日期。6.3.2 试剂如出现混浊或絮状物则失效。7 校准程序（计量学溯源性）7.1 校准品商品名称：SCS-10007.2 校准前检查：7.2.1 确认校准品瓶上批号和有效期于靶值表一致，没有过期。7.2.2 确认是否按厂家建议进行仪器保养
8、。尽可能不要再进行保养或试剂更换的当天进行校准或校准校验。7.2.3 浏览最近的质控数据，确保分析仪性能稳定。7.2.4 在仪器上登记试剂的批号和有效期。7.2.5 进行自动清洗，确认空白表示没有超出规定范围。7.3 校准准备：请严格遵守以下步骤，这对于保证 SCS-1000 校准品的性能正确非常重要。从冰箱或包装取出 1 瓶 SCS-1000，放置 30 分钟使其温度升至室温（18-25） 。保持瓶子直立的状态将其放在双手掌中轻轻滚动 20 秒，然后将其颠倒后再滚动 20 秒以上。轻轻来回倒转12 次使其混合均匀，确保所有细胞都已经悬浮起来。进行分析前在平面上静置瓶子 15秒，使泡沫散去。7
9、.4 校准步骤：注意：SCS-1000 的分析必须在开放模式进行，此时仪器设定为维修程序-“特殊模式”-菜单的“质控血模式” 。使用质控血模式可防止出现 WBC 通道错误。关于进入维修程序的方法，请咨询技术服务代表。7.4.1 在开放模式下连续进行 6 次分析。在分析当中不要混匀校准品。7.4.2 每次分析结束后，使用洁净无屑的纸巾或纱布拭净瓶子及瓶盖螺纹，之后盖上瓶盖。7.5 平均值的计算及校核数据7.5.1 排除第 1 次分析结果。7.5.2 计算其余 5 次分析结果的平均值，确认各参数的平均值都在可接受极限范围内。试剂名称 简写 样品数 每盒容量CELLPACK EPK 500 20LS
10、TROMATOLYSER-4DL FFD 1000 2LSTORMATOLYSER FB FBA 1000SULFOLYSER SLS 1000 500mlSTROMATOLYSER-4DS FFS 1050 42mlCELLSEATH SE第 4 页，共 9 页7.5.3 如果某个参数的平均值超出了可接受极限范围，并内部质控和/或室间质控的结果也显示出类似偏差，表示需要重新校准分析仪。7.5.4 计算新的校准设定系数。7.6 校准的频率：7.7.1 一般情况：每年校准 2 次上半年一次下半年一次。7.72 其他情况：试剂商更改，排除各种原因后的质控未能通过，主要部件更换后，仪器远距离搬动，或
11、严重故障须重新校准。仪器进行维修和保养校准后需做质控，校准后比对失败，工程师应验证质控品是否变质，在市内质控历史数据和室间质控数据表示良好时校准品可能变质，需更换重新校准，直至通过校准。7.8 校准验证：校准后及时进行验证，内容包括：精密度、线性、校准前后病人标本结果比对、新鲜血 close 和 open 进样模式结果比对、质控、白细胞分类手工和仪器分类方式的比对，由实验室操作人员完成。8 程序步骤8.1 打开电脑，单击 OK，同时按下 Ctrl，Alt 及 Delete 键进行登录。8.2 在登录框中单击 OK，出现 XE-2100 登录信息，在用户名一栏中键入“admin” ，并单击 OK
12、。8.3 检查废液是否已满，并倒空。8.4 开主机电源并进行登录。8.5 仪器进行自动冲洗及本底检测，如本底在范围以内，主机屏幕上将出现登录信息。如本底超出正常范围，将出现错误提示。需要在登录完成后，再次进行自动冲洗。8.6 按一下主机上的 NUM/ALPH 鍵切换为字符输入，然后，在登录名一栏中鍵入“ADMIN”，登录操作菜单。8.7 每天测试质控全血，从冰箱取出质控全血，包括 e-check 两支，临检中心质控品一支，室温放置 15 分钟后检测。选择 QC，分别选中相应质控全血的批号，以手工进样方式检测各质控品，每次检测结束选择 OK 确认，在主机电脑上观察质控结果，如在靶值范围，则可进行
13、样本测试； 如失控则需寻找失控原因，解决后再重做质控，各参数完全在控方可检测样本。8.8 标本检测：选 sampler 键，以架号为 1，位置号为 1，起始样本号为 1，检测方式为自动进样，检测参数为 CBC+DIF,将样本依次放入样本架内，选 sampler 即开始检测。8.9 开始分析标本。9 质量控制程序：9.1 质控品：9.1.1 质控品品牌：Sysmex（中、低值 2 个水平 e-CHECK）9.1.2 储存条件： 28（每日须复核一次冰箱温度） 。第 5 页，共 9 页9.1.3 使用期限： Sysmex e-CHECK 质控开瓶后 14 天。 9.1.4 质控品开启后应注明开启日
14、期，失效期并签名。9.2 质控频率：每天开机后在标本检测前进行一次质控品的分析（至少做两个水平质控）。9.3 质控操作：从冰箱中取出 e-CHECK，使用前检查有效期及状况（如极度溶血或失效，应及时更换）,在室温环境下（1830）静置 15 分钟。保持瓶子直立状态在双掌中轻轻滚动 10 次，将其颠倒再滚动 10 次，此过程反复 8 次，总共持续两分钟左右，再将质控品上下颠倒 10 次混匀至红细胞完全混合，在质控分析上选择相应批号质控文件，然后选择“执行” ； 将质控物混匀后置于手工吸样针下方，按绿色“START”开关；分析完成后，接受数据；在 IPU 中单击“质控” ，查看质控图。9.4 质控
15、期望值：至少满足 2 个 e-CHECK 在靶值极限值内，记录质控结果后开始做标本。9.5 失控时应采取的措施：质控结果超出期望值时，需查找原因，检查质控品是否在有效期内，过期或近过期需更换新的质控品,检查试剂情况，是否需更换。再检查仪器的各项参数是否在控，如各项检查操作后质控仍失控则联系工程师，责任人需通知组长。与此同时联系急症病人相关医生，如为急诊标本及时送往门急诊化验室检测。直至质控通过，开始做标本。9.6 每次失控必须分析原因，记录处理过程并签名。失控记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。9.7 更换批号后靶值设定：取开始 10 次 QC 结果，计算均值，为靶值，靶值应落在厂商提供
16、的范围内，以累计 6 个月 CV%均值（或近两个月 CV%较大值） ，通过均值乘以CV%=1SD, 质控范围设定为 2.7SD。由组长或组长指定人员负责计算。9.8 定期打印质控曲线，曲线上注明使用质控品的批号和效期，并签上责任人姓名。9.9 所有室内质控打印及记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。9.10 每日由操作员记录质控状况与 X-barm 记录于记录本。10 干扰（如乳糜血、溶血、胆红素血）和交叉反应10.1 严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高。10.2 红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低，白细胞假性增高(电阻抗法)或假性减低(激光法)和 MCV 假性增高。10.
17、3 冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高。10.4 有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低。11 生物参考区间参考区间（正常人群参考范围）是检测正常个体得出的。每一个参数的范围用 95%可信区间计算而得。第 6 页，共 9 页*女性的年龄范围为 21-41 岁，平均年龄为 24.5 岁.12 患者检验结果的可报告区间WBC： 10 9/L13 警告/危机值13.1 危机值：如遇以下危急值，应上报临床科室，并记录在危急值报告记录表(电话上报时接听者需复述)：WBC 40.0109/L。13.2 异常报警信息：WBC 异常：WBC Abn Scattergram WBC 散射图异常 L
18、eukocytosis 白细胞增加Neutropenia 嗜中性粒细胞减少 Neutrophilia 嗜中性粒细胞增加Lymphopenia 淋巴细胞减少 Lymphocytosis 淋巴细胞增加Monocytosis 单核细胞增加 Eosinophilia 嗜酸性粒细胞增加Basophilia 嗜碱性粒细胞增加 Leukocytopenia 白细胞减少WBC 怀疑：Blasts? 原始细胞 Immature Gran? 未成熟粒细胞Left Shift? 左移 Atypical Lympho? 异形淋巴细胞Abn Lympho/L-Blasts?异常淋巴/原始淋巴 NRBC 有核红细胞14
19、安全防护措施14.1 使用时的特殊要求XE-2100D 仅适用于人血或人工质控血的体外分析，无其它指定用途。使用条件还包括按规定拆卸清洁和保养。14.2 通用要求操作前先阅读本手册。弄清手册和仪器上有应注意的标志。妥善保管手册以备今后参考。必须按照手册说明启动仪器。14.2.1 长发、手指和衣服必须与旋转部件保持一定距离；如果仪器发出异味或冒烟，立即关掉总开关，拔掉电源线。14.2.2 不要让仪器中的血样或试剂溅出，也不要让其它东西掉入仪器。否则，会引起短路。如果发生上述情况，请立即关掉总开关，拔掉电源线，并与 Sysmex 代理商联系。14.2.3 请勿触摸仪器的电路，尤其不能用湿手，否则会
20、有触电危险。参数 女性范围(n=133) 男性范围(n=182)WBC 3.98-10.04 4.23-9.07第 7 页，共 9 页14.2.4 仪器必须连接在电压正确的电源插座上，并注意接地。14.2.5 避免损坏电源线。勿将任何设备压在电源线上。不能拉电源线。14.2.6 在连接其它设备（主计算机、打印机）之前必须将仪器电源关闭。14.3 安装14.3.1 仪器必须在干燥、无灰尘的地方安装。14.3.2 防止水溅到仪器上。14.3.3 勿将仪器暴露于温差大和太阳直射的地方。14.3.4 避免震荡和振动。14.3.5 安装地点必须通风良好。14.3.6 避免在发出噪音的设备旁安装仪器，如录
21、音机、离心机等。14.3.7 不能在贮存化学品和产生气体的地方安装仪器。14.4 防止感染14.4.1 一般说来，仪器所有的部件和表面都有潜在的传染性。14.4.2 操作、保养、服务或修理仪器时必须穿防护衣，戴橡皮手套。工作完毕后，用消毒液洗手。14.4.4 勿徒手接触废弃物，以及接触过废弃物的部件。14.4.5 如果不小心接触了有传染性的物质或表面，立即用水彻底清洗皮肤，然后按照实验室消毒规程操作。14.4.6 即使是质控品，也是有传染性的。进行质控时，也应穿防护衣，戴橡皮手套。14.5 试剂处理14.5.1 检查试剂包装上的标志。14.5.2 避免直接接触试剂。试剂会刺激眼睛、皮肤和粘膜。
22、14.5.3 如果皮肤接触了试剂，立即用大量清水冲洗。14.5.4 如果眼睛接触了试剂，立即用大量清水冲洗，并立即就医。阅读试剂安全使用说明书。14.5.5 实验室建立一整套急救措施是非常必要的。14.5.6 避免试剂与灰尘、污物或细菌接触。14.5.7 试剂必须在有效期内使用。14.5.8 妥善处理试剂，防止产生气泡。请勿摇晃！试剂运输后不能马上使用。14.5.9 勿将试剂溅出。如果溅出，用布擦干。14.5.10 CELLPACK 稀释液是一种优良导体。如果不小心在电线或设备旁将稀释液打翻，很容易触电。请关闭电源，拔掉插头，清除稀释液。14.5.11 CELLCLEAN（或漂白剂）是强碱性清
23、洁剂。请勿接触皮肤或衣服。一旦发生，立即用大量清水冲洗皮肤或衣服，以免造成皮肤损伤或衣服损坏。14.5.12 CELLCLEAN 清洁剂含有次氯酸钠。如果接触到仪器表面，会腐蚀表面，应立即第 8 页，共 9 页用布擦干。14.5.13 确保仪器使用的试剂与主机保持相同水平或更低。勿将试剂置于仪器上部。14.6、保养14.6.1 为防止感染、触电或灼伤，所有的保养工作必须戴上橡皮手套。工作完成后，用消毒液洗手。14.6.2 进行仪器保养时，必须使用专用工具。14.6.3 所有的清洁保养程序必须按手册中规定的进行操作。14.6.4 仅当更换备用部件时才能重新安装。15 参考文献15.1 SYSMEX XE-2100D 操作手册及技术资料15.2 中华医学检验杂志 200715.3 中华人民共和国卫生部医政司全国临床检验操作规程第 3 版16 相关记录不合格标本通知单不合格样本登记表25-5 检验后标本的保存及处理记录34-2 复检标本记录表34-4 延迟报告记录表8-9 试剂批号更换及验证原始记录8-11 试剂退货申请29-1 室内质控总结报告表月质控分析29-2 室内质控总结报告表年质控分析29-3 室内质控失控报告表29-4 标准物质和质控品使用记录表30-3 校准记录表29-6 内部质量控制计划30-2 检测系统量值溯源一览表30-5 医学检验测量系统校准计划及实施表
