1、实验四、放线菌及霉菌的形态观察放线菌的形态观察一、插片法1. 原理放 线 菌 在 形 态 上 分 化 为 菌 丝 和 孢 子 , 在 培 养 特 征 上 与 真 菌 相 似 。 放 线 菌种 类 很 多 , 多 数 具 有 发 育 良 好 的 分 支 状 菌 丝 体 , 少 数 为 杆 状 或 原 始 丝 状 的 简单 形 态 。 根 据 菌 丝 的 着 生 部 位 、 形 态 和 功 能 的 不 同 , 放 线 菌 菌 丝 可 分 为 基内 菌 丝 、 气 生 菌 丝 和 孢 子 丝 ( 繁 殖 菌 丝 ) 三 种 。 孢 子 丝 在 适 宜 条 件 下 吸 收水 分 , 孢 子 肿 胀 ,
2、 萌 发 出 芽 , 进 一 步 向 基 质 的 四 周 表 面 和 内 部 伸 展 , 形 成 基内 菌 丝 , 又 称 初 级 菌 丝 ( primary mycelium) 或 者 营 养 菌 丝 ; 气 生 菌 丝 是基 内 菌 丝 长 出 培 养 基 外 并 伸 向 空 间 的 菌 丝 , 又 称 二 级 菌 丝 ( secondary mycelium) ; 孢 子 丝 是 当 气 生 菌 丝 发 育 到 一 定 程 度 , 其 顶 端 分 化 出 的 可 形成 孢 子 的 菌 丝 , 叫 孢 子 丝 , 又 称 繁 殖 菌 丝 。2. 方法步骤:培养基的配制(高氏一号)、灭菌到平
3、板接种插片(45 度)培养(28 度 35 天)观察注意事项:1 、培养基的配制、灭菌; 2、到平板、预培养; 3、接种:无菌操作;4、插片:无菌操作、45 度;5、培养:倒置培养二、玻璃纸法培养基的配制(高氏一号)、灭菌到平板平铺玻璃纸(注意气泡的去处)接种培养(28 度 35 天) 取玻璃纸于载玻片上观察。三、印片法培养基的配制(高氏一号)、灭菌到平板接种培养(28度 35 天)挑菌苔于载玻片上 用另一块载玻片轻压 固定染色观察。霉菌的形态观察观察成型玻片,主要观察青霉、曲霉、根霉、毛霉的特化组织。为什么要倒置培养?1、倒置培养,在用强制通风的培养箱里,倒置平板可以减少培养基表面的空气流动,是培养基水分蒸发减慢,减慢培养基出现干裂的时间。水分不易流失,培养基不会断裂;2、倒置培养, 培养基中的水份蒸发遇皿盖冷凝后滴回培养基表面,影响菌落的分布。产生的水蒸气不会停留在平皿盖上,影响观察;3、倒置培养,可以防止拿起来的时候直接把盖子拿起来,从而暴露了培养基表面使其遭受污染。能很大程度的减少外来微生物的侵染;4、倒置培养,菌落生长比较集中,不易平面扩散较大,而影响实验结果和结果观察。