1、大鼠神经营养因子 -3ELISA试剂盒 神经营养因子 3( NT-3)是神经生长因子基因家族起着重要的作用,这在脊椎动物的神经系统的开发和维护的一个新成员。 NT-3 和受体,神经酪氨酸激酶受体 3( NTRK3,也称为元 TrkC),和整个胚胎发育早期表示。 NT-3 是一个 5 的神经营养因子的生长因子,塑造通过调节神经元的存活和分化的神经系统发展。NT-3 可以是一种中枢神经系统源性因子介导神经嵴( NC)的细胞增殖,在体内。 NT-3 已被映射到人类染色体 12p和小鼠染色体 6。 产品代码: 2901180015, 2901180045 大小: 96T, 48T 范围: 15.6pg
2、/ml-1000pg/ml 灵敏度: 2pg/ml 中心 特异性: 没有检测到交叉反应性与 NT-4 2.5,没有检测到与任何其他细胞因子的交叉反应性。 储存: 存放在 4 的频繁使用,在 -20 很少使用。 避免多次冻融循环(随用湿冰) 有效期: 4 个月,在 4 和 8 个月,在 -20 。 应用范围: 对于定量检测在大鼠神经营养因子 -3 的血清,血浆,体液,组织裂解物或细胞培养物上清。 注意事项应用套件 1 。在使用试剂 盒,旋转管到管底,并关闭所有元件。 2 。重复以及检测标准和样品测试。 3 ,不要让 96孔板中干,干板将活性成分失活板。 4 。为了避免边际效应的板孵化,由于温度差
3、(反应可能会更强的边际井), ABC 和 TMB的解决方案摊薄预先加热,在 37 30分钟前使用。 大鼠神经营养因子 -3 ELISA试剂盒 实验步骤: ABC 工作液和 TMB彩色显影剂必须在使用前 30分钟在 37 下保温。稀释样品和试剂时,必须将它们完全和均匀地混合。标准曲线 。用户将决定由粗略的估计中的样品稀释倍。 1。每孔分装 0.1 毫升 1000pg/ml, 500pg/ml, 250pg/ml, 125pg/ml, 62.5pg/ml, 31.2pg/ml, 15.6pg/ml大鼠神经营养因子 -3 到预涂的 96孔板中的标准溶液。加入 0.1ml 的样品稀释缓冲液控制(零井)
4、。每个人血清,血浆,体液,组织裂解物或细胞培养上清液适当稀释后的样品加入 0.1ml 的每个空的。 “样品稀释指引 ”上面的内容,我们建议每个神经营养因子 -3 标准的解决方案,每个样本一式两份测定。 2。密封板与盖和在 37 下孵育 90分钟。 3。取下盖子,舍弃板的内容,涂抹到纸巾或其它吸水材料板。不要让我们的井完全干燥,在任何时候。 4。加入 0.1ml 的生物素标记的抗大鼠神经营养因子 -3 抗体工作溶液导入各孔中,并 在 37 下孵育板 60分钟。 5。三次用 0.01M TBS或 0.01M PBS洗板,每一次让留在洗涤缓冲液井 1 分钟。弃去洗涤液,或其他吸水纸巾上吸干板材料。
5、6。导入各孔中,并加入 0.1ml 的制备 ABC 工作液,在 37 下孵育板 30分钟。 7。将板洗涤 5 次,用 0.01M TBS或 0.01M PBS,每一次让 洗涤缓冲液的孔中逗留 1-2 分钟。弃去洗涤液和纸巾或其它吸水材料上涂抹板。 8。 90微升制备 TMB底彩色显影剂添加到每个孔中并孵育板在 37 下 15分钟(深浅不一的蓝,可以看到在井的四个最集中的大鼠神经营养因子 -3 标准的解决方案, 其他水井没有明显的颜色)。 9。每孔加入 0.1ml 的准备 TMB的一站式解决方案。颜色立即变成黄色。 10。阅读的 OD 在酶标仪在 450nm 处的吸光度,添加停止溶液后,在 30分钟之内。 为了计算,(相对 OD 450 ) =(的 OD 450 ) - (的 OD 450 )。可以绘制 成的相对 OD 标准曲线。的大鼠神经营养因子 -3 的浓度的样品可以被内插。 注:如果测量的样品进行稀释,稀释前,乘以稀释倍数的浓度插值获得的浓度。