1、基 因 工 程（一轮复习）,东莞中学 谢永佳,基因工程的概念,基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。,原理、操作对象、操作水平、优点？,如何用基因工程技术培育蓝玫瑰？,背景资料：天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的B基因，而开蓝色花的矮牵牛中存在B基因，但不知道其碱基序列。,一、获取目的基因,从生物材料中分离 人工合成,一、获取目的基因,花瓣细胞的mRNA图谱,根细胞的mRNA图谱,1 2 3 4 5 6 7 8,B基因的mRNA可能存在哪一个普
2、带内？,3或5,一、获取目的基因,方法：从开蓝色花的矮牵牛中提取B基因的 mRNA，再逆转录得到B基因。,目的：是使目的基因在受体细胞中稳定存 在，并且可以遗传给下一代。,二、构建基因表达载体,二、构建基因表达载体,运载体（1）常用的运载体： 质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒（2）作为运载体必备的条件： 能在宿主细胞内稳定保存并大量复制； 有一至多个限制酶的切点； 有标记基因。,二、构建基因表达载体,限制酶（1）作用特点： 特异性（2）切割产生的末端： 黏性末端或平末端（3）切割的化学键： 磷酸二酯键,二、构建基因表达载体,二、构建基因表达载体,连接的部位：磷酸二酯键（梯子的扶手）， 不是氢键
3、（梯子的踏板）。,DNA连接酶,二、构建基因表达载体,二、构建基因表达载体,假设C表示蓝色素基因，D表示运载体。如果只考虑两两结合，可能有多少种重组DNA？分别是？,3种，分别是CD、CC、DD。,用什么方法分离出我们需要的表达载体？,离心法,启动子,终止子,目的基因,标记基因,表达载体模式图,二、构建基因表达载体,复制原点,它们有什么作用？,启动子： 位于基因的首端，能驱动基因转录出mRNA终止子： 位于基因的末端，能终止基因的转录标记基因： 有助于将含有目的基因的细胞筛选出来复制原点： 能驱动DNA复制的开始,二、构建基因表达载体,下列关于基因工程的叙述，错误的是 A.目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微 生物 B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的 工具酶 C.基因表达载体上没有起始密码子和终止密码子 D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细 胞和促进目的基因的表达,
