PAM-札幌医科大学.ppt

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资源描述

1、PAMPAS(腎染色),PAM目的,過素酸銀染色法(Periodic acid-methenamine-silver stain)、腎糸球体特殊鍍銀法、1953年Jones,D,B開発染色法。主、糸球体基底膜、細胞、細網血管染、碑、節細網構造、血管壁細胞間物質、間質結合組織微細好銀性構築染色。、腎糸球体以外応用真菌、細菌、粒子、代表生体内色素甲状腺、親和物質鍍銀事知、糸球体基底膜特殊鍍銀法目的、多糖体特殊染色法広用。Jones原法Helly液固定組織片応用矢島法広一般用。PAM染色超薄切片用電子顕微鏡的観察可能。,PAM原理,O,H,OH,O,O,H,H,H,OH,O,H,OH,O,H,H,H

2、,OH,O,H,O,O,H,CHO,O,H,O,H,CHO,CHO,CHO,O,H,O,O,H,COOH,O,H,O,H,COOH,COOH,COOH,+Ag,+Ag,+Ag,+Ag,過素酸酸化,銀鏡反応,IO4,Ag(NH3),基形成,PAM試薬,1%過素酸水溶液銀液3%水溶液50ml5%硝酸銀水溶液5ml精製水40ml5%砂(酸)5ml4%中性0.2%塩化金水溶液補強液酸性硬膜定着液,大谷法酸使用,PAM染色法,脱水洗,過素酸,精製水水洗,銀液,精製水水洗,中性,精製水水洗,塩化金水溶液,流水水洗,補強液,酸性硬膜定着液,流水水洗,流水水洗,流水水洗,封入,酸,鍍銀,酸化,鍍銀補強,鍍金,

3、定着,HE染色,PAM注意,銀液5860染色時間短縮。染色時間時間前暖、銀鏡反応開始黒注意。銀鍍銀本染色重要、反応時間時間目安、切片黄褐色見計鏡検。、太血管基底膜先染、次尿細管基底膜黒化、糸球体内毛細血管基底膜十分黒化確認鍍銀終了。矢島法銀液反応温度高、反応終末点近急激黒化、非特異的銀沈着共染、慣黄褐色時点室温、孵卵器反応鍍銀状態判断。銀液反応塩化金黒化基底膜染色性落過染気味染法良。,PAM注意,銀液鍍銀、金属等使用銀鏡反応起注意。銀液溶鍍銀行過剰銀鏡反応防事、銀液付着防事。4%中性水Jones原法使用、実際省略染色性差。矢島染色翌日時蒸留水長留鍍銀基底膜反応産物変色、変色防止意味用。PAM染

4、色後HE染色銀上染色、通常切片染色時間。、後染色染色染色用良。,PAM染色結果,PAS目的,PAS反応(過素酸染色 / Periodic acid Schiff reaction)McManus(1946)、Hotchkiss(1948)、多糖類組織化学的証明法発展、現在肝臓、消化管粘液物質証明、色素顆粒細胞顆粒、真菌、識別腎糸球体病変識別等、広糖質一般染色知。,O,H,O,H,CHO,CHO,+試薬,+試薬,O,原理完全解明、糖質過素酸酸化、生基試薬結合、赤紫色化合物形成反応利用。,PAS試薬,0.5%過素酸水溶液試薬hot schiff cold schiff亜硫酸水10%重亜硫酸6ml1N塩酸5ml精製水100ml,PAS染色法,脱水洗,精製水水洗,過素酸水溶液,試薬,亜硫酸水回,流水水洗,流水水洗,脱水封入,酸化,呈色,洗浄,核染,PAS注意,脱後流水、水洗糖質拡散、溶出、長水洗。過素酸酸化行場合、適温度、時間、一定範囲外反応非特異的。過素酸毎回新調、常温分。試薬染色時亜硫酸染。、試薬汚染防標本水分除去。亜硫酸水毎回新調、試薬直接水洗亜硫酸水移。核染色PAS反応核酸酸化塩基性色素親和性増、染色時間普通短。,PAS染色結果,

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