1、第十二章 细胞分化与基因表达调控,细胞分化(cell differentiation)：在个体发育中，由一 种相同的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异，产生各不相同的细胞类群的过程细胞分化是多细胞生物发育的基础与核心 细胞分化的关键在于特异性蛋白质合成 合成特异性蛋白质实质在于组织特异性基因在时间和空间上的差异性表达 差异性表达的机制是由于基因表达的组合调控 细胞癌变是正常细胞分化机制失控的表现,第一节 细胞分化(Cell differentiation),细胞分化的基本概念影响细胞分化的因素细胞分化与胚胎发育Hox genes,同源异型基因（homeotic sele
2、ctor gene，Hox gene）,果蝇体节发育中起关键作用的基因群。 含有高度保守的180bp组成的DNA序列，称同源框。编码60个氨基酸，形成螺旋-转角- 螺旋结构，与DNA序列大沟相互作用，启动基因表达同源异型基因在染色体上的排列与胚胎发育在时、空序列上是一致的,一、细胞分化的基本概念,细胞分化是基因选择性表达的结果组织特异性基因与当家基因组合调控引发组织特异性基因的表达 单细胞有机体的细胞分化转分化与再生,细胞分化是基因选择性表达的结果,分子杂交技术检测基因及其表达,细胞分化是基因选择性表达的结果,早期：选择性丢失现代：选择性表达所致鸡输卵管细胞卵清蛋白成红细胞珠蛋白胰岛细胞胰岛素
3、,组织特异性基因与管家基因,管家基因house-keeping genes：细胞中均要表达的基因，其产物对维持细胞基本生命活动所必需奢侈基因luxury genes，又组织特异基因tissue-specific genes：不同细胞类型进行特异性表达的基因，其产物赋予各种细胞特异形态结构与特异生理功能调节基因regulatory genes：产物调节组织特异性基因表达，或激活、或抑制作用细胞分化实质：组织特异性基因在时间与空间上的差异表达 mRNA差异显示法、DNA减法杂交、EST技术,组合调控引发组织特异性基因的表达,200多种不同类型细胞组合调控combinational control：
4、多种调控蛋白共同调控完成，2n单一调控蛋白：启动整个细胞分化过程骨骼肌细胞，MyoD使成纤维细胞表现骨骼肌细胞特征眼发育基因Ey，导入果蝇早期腿细胞，在腿中部形成眼靠一种关键性调控蛋白，启动级联调控蛋白，是令人惊奇的高效、经济的细胞分化启动机制,单细胞有机体的细胞分化,事例低等生物：多为适应不同的生活环境高等多细胞有机体：通过细胞分化构建执行不同功能组织与器官，分化程序与调节机制方面更复杂,转分化与再生,一种类型分化的细胞转变成另一种类型的分化细胞现象 称转分化（transdifferentiation）。 转分化经历去分化（dedifferentiation）和再分化的过程。 生物界普遍存在
5、再生现象（regeneration），再生是指生物 体缺失部分后重建过程，广义的再生可包括分子水平、细 胞水平、组织与器官水平及整体水平的再生。 不同的细胞有机体，其再生能力有明显的差异。,单细胞有机体的细胞分化,与多细胞有机体细胞分化的不同之处： 前者多为适应不同的生活环境，而后者则通过细胞分化构建执行不同功能的组织与器官。多细胞有机体在其分化程序与调节机制方面显得更为复杂。,组合调控引发组织特异性基因的表达,组合调控（combinational control）概念： 有限的少量调控蛋白启动为数众多的特异细胞类型的分化 的调控机制。即每种类型的细胞分化是由多种调控蛋白共同调节完成的。 生物
6、学作用：借助于组合调控，一旦某种关键性基因调控蛋白与其它 调控蛋白形成适当的调控蛋白组合，不仅可以将一种类型的 细胞转化成另一种类型的细胞，而且遵循类似的机制，甚至 可以诱发整个器官的形成（如眼的发育）。分化启动机制： 靠一种关键性调节蛋白通过对其他调节蛋白的级联启动。,二、 影响细胞分化的因素,细胞的全能性(totipotency)影响细胞分化的因素,细胞的全能性(totipotency),概念：细胞全能性是指细胞经分裂和分化后 仍具有产生完整有机体的潜能或特性。 植物细胞具有全能性，在适宜的条件下可培育成正常的植株 动物细胞核移植(Nuclear transfer)实验证明细 胞核具有发育
7、全能性 干细胞(Stem cell)与细胞发育潜能,影响细胞分化的因素,调控蛋白的组合是影响分化的主要的直接因胞外信号分子对细胞分化的影响, 如眼的发生 细胞记忆与决定 果蝇成虫盘(imaginal disc)受精卵细胞质的不均一性对细胞分化的影响细胞间的相互作用与位置效应环境对性别决定的影响染色质变化与基因重排对细胞分化的影响,如蛙红细胞核移植后发育成蝌蚪Dolly羊的诞生说明高度分化的哺乳动物体细胞核也具有发育全能性,干细胞分化模式胚胎干细胞(embryo stem cell)：具有分化成多种细胞类型及构建组织的潜能造血干细胞单能干细胞（monopotential cell）,细胞分化与胚
8、胎发育,细胞分化是胚胎发育的基础果蝇：同源异型基因Hox genes，又 Hox基因，180bp，同源框同源框编码的60氨基酸为同源异型结构域，形成螺旋-转角-螺旋结构与特异DNA大沟作用 Hox基因存在于多种无脊椎动物和高等脊椎动物,第二节 癌细胞(Cancer cell),癌细胞的基本特征致癌因素癌症产生是基因突变积累和自然选择的结果癌症能治疗吗？,癌症,癌是细胞生长与分裂失控引起的疾病，其根源是体细胞中调节细胞生长与分裂的基因异常表达。控制细胞生长与分裂的基因发生突变可以是随机自发的突变，更多的是一些环境因子作用的结果。例如，某些致癌因子、化学诱变剂、X射线、放射性辐射、病毒感染等都可能
9、引起基因发生突变，使细胞生长与分裂失控，从而引发癌症。,逆转录病毒癌基因,病毒的多种复制方式病毒学家Temin： 逆转录RNADNAVarmus和Bishop： RSV中的src基因 第一个癌基因 1987年诺贝尔奖,一癌细胞的基本特征,癌症是一种严重威胁人类生命安全的疾病。动物体内 细胞分裂调节失控而无限增殖的细胞称为肿瘤细胞(tumor cell)。具有转移能力的肿瘤称为恶性肿瘤（malignancy）。上皮组织的恶性肿瘤称癌。 基本生物学特征体外培养的恶性转化细胞的特征,体外培养的恶性转化细胞的特征,恶性转化细胞同癌细胞一样具有无限增殖的潜能 在体外培养时贴壁性下降失去接触抑制培养时对血
10、清依赖性降低当将恶性转化细胞注入易感动物体内，往往会形成肿瘤,二、致癌因素,多种理化因子致癌 DNA肿瘤病毒与RNA肿瘤病毒致癌,三、癌症产生是基因突变积累和自然选择的结果,癌症主要是体细胞突变产生的遗传病，涉及 到两大类与细胞增殖相关的基因的突变。促进细胞增殖相关基因突变：原癌基因 (proto-oncogene)突变形成癌基因(oncogene)抑制细胞增殖相关基因突变：肿瘤 抑制基因(tumor-suppressor gene)细胞癌变是基因突变累积和自然选择的 结果，所以患者多为年长者。原癌基因与肿瘤抑制基因产物协调作用， 避免细胞癌变,原癌基因存在于细胞基因组中(c-onc)，是控制
11、细胞生长和分裂的基因。 编码多种类型的蛋白质-细胞生长和分裂的调控因子。 癌基因是控制细胞生长和分裂的原癌基因的一种突变形式。 这类基因功能获得性突变(显性突变)， 其产物量增加或活性升高，促进细胞癌变。,抑癌基因是正常细胞增殖过程中的负调控因子。抑癌基因 编码的蛋白抑制细胞增殖，使细胞停留于检验点上阻止周 期进程。 抑癌基因发生功能丧失性突变(隐性突变)，则导致细胞周期 失控而过度增殖。Rb基因突变导致视网膜母细胞瘤形成。 pRb对细胞周期运转作用 P53基因突变将导致细胞癌变或凋亡,癌基因起源于原癌基因,原癌基因是一些与调节和控制细胞生长、分裂和细胞周期相关的基因。原癌基因的结构变化或者失
12、控就会演变成癌基因。4种类型的突变,10.5 HIV的结构与分子遗传机制,艾滋病的英文缩写AIDS的全称为获得性免疫缺陷综合症（acquired immune deficiency syndrome）。引起艾滋病的元凶是一种人类免疫缺陷病毒,HIV的结构,HIV的分子遗传过程,HIV基因组（RNA）进入T淋巴细胞，在逆转录酶的作用下，以HIV的RNA为模板，产生了与RNA互补的DNA链。前病毒DNA转录生成新的RNA片段，同时合成衣壳蛋白等，在宿主细胞中，新合成的RNA、逆转录酶及蛋白质等又装配生成更多的病毒颗粒，它们以出芽的方式从宿主细胞中释放出来，又去攻击其他的T淋巴细胞。,肿瘤的发生是基
13、因突变逐渐积累的结果,原癌基因突变，并非马上形成癌，而是继续生长直至细胞群体中新的偶发突变的产生癌症是一种典型的老年性疾病，它涉及一系列原癌基因与肿瘤抑制基因的致癌突变的积累,癌的发生是一个多次突变积累的复杂过程,细胞凋亡发生异常,四、癌症能治疗吗,传统思路是手术、放疗、化疗癌症治疗新方案 免疫治疗(Immunotherapy) 基因治疗(Gene therapy) 抑制癌症促进蛋白的活性 抑制肿瘤血管形成,第三节 真核细胞基因表达的调控,真核细胞基因表达的调控是多级调控系统，主要发生在三个彼此相对独立的水平上转录水平的调控加工水平的调控翻译水平的调控,真核生物基因表达的调控可发生在不同水平上
14、,一转录水平的调控,真核生物的转录激活基因表达阻遏,真核生物的转录激活,基因转录水平的控制错综复杂，受多种因素影响 TATA盒、CAAT盒和GC盒，TATA盒决定转录起始的 位点，CAAT盒和GC盒决定RNA聚合酶转录基因的效 率。这三种普遍的启动子元件的位置见图第1行。 缺失作图法（deletion mapping）与DNA足纹技术（DNA footprinting）鉴定启动子区域特殊位点的功能 转录因子结构转录因子与DNA序列相互作用最常见的几种结构模式,基因表达阻遏,DNA甲基化（DNA methylation）与基因表达阻遏有关 基因组印记（genomic imprinting） 是说
15、明甲基化作用在基因表达中具有 重要意义的最好例证，也是哺乳动物 所特有的现象,二加工水平的调控,选择性拼接是一种广泛存在的RNA加工机制， 通过这种方式，一个基因能编码两个或多个 相关的蛋白质组成型拼接(constitutive splicing), 一个基因只产生一种成熟的mRNA，一般 也只产生一种蛋白质产物可调控的选择性拼接产生不同的成熟mRNA， 翻译产生不同的蛋白质,如纤粘蛋白 (fibronectin）的合成某一特定的外显子是否被包括在成熟mRNA 内，主要取决于它的3和5端拼接位点是 否被拼接机器选择为切割位点,三翻译水平的调控,mRNA的细胞质定位mRNA翻译的调控mRNA稳定性的调控,mRNA的细胞质定位,启动一个动物受精卵形成胚胎所需要 的信息预存在卵子发生期的卵母细胞里 微管和微丝对细胞中特定部位的mRNA的 聚集有一定关系,mRNA翻译的调控,“隐蔽”mRNA（masked mRNA）的激活 调节编码铁蛋白（ferritin）的 mRNA翻译速率的机制,mRNA稳定性的调控,mRNA的寿命与它的多聚(A)尾巴长度有关哺乳动物细胞内mRNA的降解途径说明一旦多聚(A) 尾巴减少到一定长度，mRNA会迅速降解3UTR的核苷酸顺序的不同似乎在多聚(A)尾巴变短 时扮演一个与降解速率有关的角色,
